详情

原文传递一种测定乙醇脱氢酶活性的方法

专利名称：	一种测定乙醇脱氢酶活性的方法
摘要：	本发明提供一种测定乙醇脱氢酶活性的方法，通过乙醇脱氢酶催化乙醇转化为乙醛，乙醛与3‑甲基‑2‑苯并噻唑啉酮腙盐酸盐(MBTH)及FeCl₃反应生成蓝色化合物，在610nm处产生吸收峰，在一定范围内，吸光度与酶活性成正比。本发明克服了一般测定中时间难以准确控制的缺点；采用酶标仪测定，实现了样品的批量测定，降低了测定的时间成本。同时，本发明不受酶液中的杂质干扰，灵敏度和准确性高，重复性好，操作简便，效率高等优点，且不依赖高档仪器设备，便于推广应用。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	浙江大学
发明人：	徐昌杰;王如倩;吴春霞;王文丽;张波;陈昆松
专利状态：	有效
申请号：	CN201811167343.1
公开号：	CN109470637A
代理机构：	杭州求是专利事务所有限公司 33200
代理人：	赵杭丽
分类号：	G01N21/31(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号
主权项：	1.一种测定乙醇脱氢酶活性的方法，其特征在于，通过以下步骤实现：(1)试剂配制，包括提取液配制、酶反应液配制、MBTH盐酸溶液配制、FeCl3溶液配制和乙醛标曲母液配制；(2)粗酶液制备，包括研磨、离心；(3)标准曲线绘制，包括乙醛标准系列配制、吸光度测定、绘制回归方程；(4)样品测定，包括控制反应时间、测定吸光度；(5)结果计算，包括计算公式、酶活性表示单位。
所属类别：	发明专利