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一种检测牛布鲁氏菌HSP70的间接ELISA的建立方法
| 专利名称： | 一种检测牛布鲁氏菌HSP70的间接ELISA的建立方法 |
| 摘要： | 本发明公开了一种检测牛布鲁氏菌HSP70的间接ELISA的建立方法，具体步骤如下：制备牛布鲁氏菌HSP70的融合蛋白，并对蛋白进行纯化，获得纯化的蛋白；以获得的纯化的蛋白为抗原检测布鲁氏菌血清样本，同时确定抗原包被浓度、血清稀释度、封闭液种类、二抗稀释浓度以及显色时间；确定间接ELISA的临界值；间接ELISA结果判定标准；分析间接ELISA方法的敏感性和特异性。本发明具体通过对HSP70进行原核表达，获得纯化的蛋白，以纯化蛋白作为抗原，建立检测牛布鲁氏菌间接ELISA的方法，为布鲁氏菌病的血清学检测提供重要方法。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 河北;13 |
| 申请人： | 河北科技师范学院 |
| 发明人： | 吴同垒;于秀剑;庞洪泽;李巧玲;杜万年;肖丽荣;张志强;史秋梅 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请号： | CN201811141012.0 |
| 公开号： | CN109490541A |
| 代理机构： | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 |
| 代理人： | 李冉 |
| 分类号： | G01N33/569(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33 |
| 申请人地址： | 066004 河北省秦皇岛市海港区河北大街西段360号 |
| 主权项： | 1.一种检测牛布鲁氏菌HSP70的间接ELISA的建立方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)制备牛布鲁氏菌HSP70融合蛋白，并对蛋白进行纯化，获得纯化的蛋白；(2)以步骤(1)获得的纯化的蛋白为抗原检测布鲁氏菌血清样本，同时确定抗原包被浓度、血清稀释度、封闭液种类、二抗稀释浓度以及显色时间；(3)确定间接ELISA的临界值：临界值＝平均值+2.58×标准差；平均值为阴性血清间接ELISA结果的平均值，标准差为阴性血清间接ELISA结果的标准差；间接ELISA结果判定标准：布鲁氏菌血清样本的OD值大于等于临界值判断为阳性，布鲁氏菌血清样本的OD值小于临界值判断为阴性；(4)分析间接ELISA方法的敏感性和特异性。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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