专利名称: |
一种检测牛布鲁氏菌HSP70的间接ELISA的建立方法 |
摘要: |
本发明公开了一种检测牛布鲁氏菌HSP70的间接ELISA的建立方法,具体步骤如下:制备牛布鲁氏菌HSP70的融合蛋白,并对蛋白进行纯化,获得纯化的蛋白;以获得的纯化的蛋白为抗原检测布鲁氏菌血清样本,同时确定抗原包被浓度、血清稀释度、封闭液种类、二抗稀释浓度以及显色时间;确定间接ELISA的临界值;间接ELISA结果判定标准;分析间接ELISA方法的敏感性和特异性。本发明具体通过对HSP70进行原核表达,获得纯化的蛋白,以纯化蛋白作为抗原,建立检测牛布鲁氏菌间接ELISA的方法,为布鲁氏菌病的血清学检测提供重要方法。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
河北;13 |
申请人: |
河北科技师范学院 |
发明人: |
吴同垒;于秀剑;庞洪泽;李巧玲;杜万年;肖丽荣;张志强;史秋梅 |
专利状态: |
有效 |
申请号: |
CN201811141012.0 |
公开号: |
CN109490541A |
代理机构: |
北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 |
代理人: |
李冉 |
分类号: |
G01N33/569(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33 |
申请人地址: |
066004 河北省秦皇岛市海港区河北大街西段360号 |
主权项: |
1.一种检测牛布鲁氏菌HSP70的间接ELISA的建立方法,其特征在于,具体步骤如下:(1)制备牛布鲁氏菌HSP70融合蛋白,并对蛋白进行纯化,获得纯化的蛋白;(2)以步骤(1)获得的纯化的蛋白为抗原检测布鲁氏菌血清样本,同时确定抗原包被浓度、血清稀释度、封闭液种类、二抗稀释浓度以及显色时间;(3)确定间接ELISA的临界值:临界值=平均值+2.58×标准差;平均值为阴性血清间接ELISA结果的平均值,标准差为阴性血清间接ELISA结果的标准差;间接ELISA结果判定标准:布鲁氏菌血清样本的OD值大于等于临界值判断为阳性,布鲁氏菌血清样本的OD值小于临界值判断为阴性;(4)分析间接ELISA方法的敏感性和特异性。 |
所属类别: |
发明专利 |