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一种基于纳米荧光探针检测细胞膜蛋白过表达的方法及其应用
| 专利名称： | 一种基于纳米荧光探针检测细胞膜蛋白过表达的方法及其应用 |
| 摘要： | 本发明涉及一种基于纳米荧光探针检测细胞膜蛋白过表达的方法及其应用。于96孔板中，加入细胞膜蛋白溶液和纳米荧光探针溶液，于20‑25℃下孵化5‑10min后检测荧光强度。所述纳米荧光探针溶液的制备方法是：将碳源用水完全溶解，向溶液中加入小分子配体进行掺杂，超声溶解后在190‑220℃下加热反应，得纳米荧光探针，将纳米荧光探针经过滤，透析，冻干后分散于PBS缓冲溶液中，得到纳米荧光探针溶液。采用本发明的方法可以鉴别不同响应状态的细胞膜蛋白，而且还具有生物相容性好、安全无毒、作用效果稳定等特点。可特异性识别细胞膜蛋白的过表达，制备方法工艺简单、易于操作，制备成本低，易于推广。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 辽宁;21 |
| 申请人： | 辽宁大学 |
| 发明人： | 刘学;毕秀丽;刘禹霖;陈扬 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-06-12T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-08-06T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910504646.6 |
| 公开号： | CN110095448A |
| 代理机构： | 沈阳杰克知识产权代理有限公司 |
| 代理人： | 金春华 |
| 分类号： | G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21 |
| 申请人地址： | 110000 辽宁省沈阳市沈北新区道义南大街58号 |
| 主权项： | 1.一种基于纳米荧光探针检测细胞膜蛋白过表达的方法，其特征在于，包括如下步骤：向96孔板中，加入细胞膜蛋白溶液和纳米荧光探针溶液，于20-25℃下孵化5-10min后检测荧光强度；所述纳米荧光探针溶液的制备方法是：将碳源用水完全溶解，向溶液中加入小分子配体进行掺杂，超声溶解后在190-220℃下加热反应，得纳米荧光探针，将纳米荧光探针经过滤，透析，冻干后分散于PBS缓冲溶液中，得到纳米荧光探针溶液。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，向96孔板中，加入100μL蛋白质浓度为1-100μg/mL的细胞膜蛋白溶液和100μL浓度为5-20mg/L的纳米荧光探针溶液。 3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述碳源为天然氨基酸的一种或多种。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述小分子配体为氨类小分子。 5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述氨类小分子为乙二胺或氨水。 6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，按摩尔比，碳源:小分子配体＝(1-5):1。 7.权利要求1所述的方法在筛选抑制细胞膜蛋白过度表达药物中的应用。 8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：方法如下：向96孔板中，加入经药物处理的过表达细胞膜蛋白溶液和纳米荧光探针溶液，于20-25℃下孵化5-10min后检测荧光强度；所述纳米荧光探针溶液的制备方法是：将碳源用水完全溶解，向溶液中加入小分子配体进行掺杂，超声溶解后在190-220℃下加热，得纳米荧光探针，将纳米荧光探针经过滤，透析，冻干后分散于PBS缓冲溶液中，得到纳米荧光探针溶液。 9.根据权利要求7或8所述的应用，其特征在于：所述细胞膜蛋白为小胶质细胞膜蛋白。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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