详情

原文传递一种介孔有机硅中空纳米球固定尿酸酶检测尿酸的方法

专利名称：	一种介孔有机硅中空纳米球固定尿酸酶检测尿酸的方法
摘要：	一种介孔有机硅中空纳米球固定尿酸酶检测尿酸的方法，属于尿酸检测技术领域。本实验是以单分散SiO2纳米球作为硬模板，采用一步生长诱导腐蚀法制备介孔有机硅中空纳米球。这种方法简单易操作，要求不高，合成过程高度可控，且通过使用不同的前驱体可以合成具有不同功能基团的中空结构的介孔有机硅纳米球。合成的介孔有机硅中空纳米球孔道有序，孔径均一，内部含有中空空腔。利用合成后的介孔有机硅中空纳米球固定尿酸酶对血清尿酸进行检测，建立了一种介孔有机硅中空纳米球固定尿酸酶检测尿酸的方法，在血清尿酸快速检测方面具有应用前景。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	吉林;22
申请人：	吉林大学
发明人：	王春艳;王润伟;苗婷婷;段秉怡;王欢;田牧晓;于惠源
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-31T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-09T00:00:00+0800
申请号：	CN201910467336.1
公开号：	CN110108656A
代理机构：	长春吉大专利代理有限责任公司
代理人：	刘世纯;王恩远
分类号：	G01N21/33(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	130012 吉林省长春市前进大街2699号
主权项：	1.一种介孔有机硅中空纳米球固定尿酸酶检测尿酸的方法，其步骤如下： (1)介孔有机硅中空纳米球的合成：将100mg单分散SiO2纳米球通过超声分散于11mL乙醇和22mL超纯水的混合物中，再将120mg十六烷基三甲基溴化铵和2mL氨水、0.22mL的1，2-双(三乙氧基甲硅烷基)乙烷加入到上述的混合物中，搅拌2h后装釜，然后于100℃下静置24h，冷却至室温，离心分离，并用水和乙醇洗涤，80℃下干燥后用65mL乙醇和2mL、质量分数36％的浓盐酸进行萃取，离心洗涤后烘干即得到介孔有机硅中空纳米球载体，研磨待用； (2)固定尿酸酶：取10mg步骤(1)研磨的介孔有机硅中空纳米球载体，加入10mL浓度为0.2mg/mL的尿酸酶液，4℃环境下搅拌8h，离心后取沉淀物冻干，即得到载体-尿酸酶； (3)将7份步骤(2)得到的质量3mg的载体-尿酸酶分别加入到2mL、pH＝8.5的甘氨酸缓冲液和0.5mL超纯水的混合溶液中，再分别加入0.5mL浓度分别为0.001mg/mL、0.01mg/mL、0.05mg/mL、0.1mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、1.5mg/mL的尿酸标准液，40℃水浴反应20min，然后使用紫外分光光度计分别检测混合液在290nm处的吸光度值；以尿酸标准液的浓度为横坐标，以测得的290nm处的吸光度值为纵坐标制作标准曲线； (4)将3mg步骤(2)得到的载体-尿酸酶加入到2mL、pH＝8.5的甘氨酸缓冲液和0.5mL超纯水的混合溶液中，再加入0.5mL未知浓度的尿酸溶液，40℃水浴反应20min，然后使用紫外分光光度计检测混合液在290nm处的吸光度值；将该吸光度值代入步骤(3)得到的标准曲线中，计算得到该尿酸溶液的浓度，从而实现对尿酸的检测。 2.如权利要求1所述的一种介孔有机硅中空纳米球固定尿酸酶检测尿酸的方法，其特征在于：采用stober法制备单分散SiO2纳米球，即将3mL正硅酸乙酯加入到37mL乙醇、5mL超纯水和1.6mL氨水的混合物中，搅拌离心后清洗晾干，得到单分散SiO2纳米球。 3.如权利要求1所述的一种介孔有机硅中空纳米球固定尿酸酶检测尿酸的方法，其特征在于：步骤(1)中氨水的质量分数为28％。
所属类别：	发明专利