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原文传递细胞介导的免疫应答试验

专利名称：	细胞介导的免疫应答试验
摘要：	本公开内容一般涉及基于免疫学的诊断试验领域，所述基于免疫学的诊断试验包括检测细胞介导的免疫应答力试验。本发明教导了基于细胞介导的免疫应答诊断对象对抗原的暴露，其具有增强的灵敏度，且通过在样品与抗原孵育期间添加非还原糖来实现。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	澳大利亚;AU
申请人：	塞尔雷斯蒂斯有限公司
发明人：	J·伯勒;A·奈茨;C·穆尼安
专利状态：	有效
申请日期：	2013-12-20T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-13T00:00:00+0800
申请号：	CN201910318768.6
公开号：	CN110118871A
代理机构：	上海专利商标事务所有限公司
代理人：	陶家蓉
分类号：	G01N33/50(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	澳大利亚维多利亚
主权项：	1.一种测量细胞介导的免疫应答活性的方法，所述方法包括： (a)通过使包含免疫细胞的样品接触至少一种抗原和至少一种非还原糖来提供孵育组合物，所述免疫细胞能够在由抗原进行刺激后产生免疫效应分子；以及 (b)检测是否存在至少一种免疫效应分子或其水平。 2.如权利要求1所述的方法，所述非还原糖是非还原二糖，优选选自海藻糖和蔗糖。 3.如权利要求1或2所述的方法，所述孵育组合物中所述非还原糖的浓度是至少1.5mg/ml，优选至少2mg/ml。 4.如权利要求1-3中一项或多项所述的方法，在步骤(a)中，所述样品接触包含所述抗原和所述非还原糖的组合物，且优选地，所述组合物包含在样品收集容器中。 5.如权利要求4所述的方法，所述组合物还包含抗凝血剂，优选肝素，且所述样品是全血样品。 6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，所述样品具有一种或多种以下特性： i)所述样品获自人对象； ii)所述样品获自免疫抑制或免疫缺陷的人对象； iii)所述样品包含免疫细胞，所述免疫细胞选自NK细胞、T细胞、B细胞、树突细胞、巨噬细胞和单核细胞；和/或 iv)所述样品是全血。 7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，所述抗原具有一种或多种以下特性： i)一种或多种肽被用作抗原，所述一种或多种肽的长度选自5-100个氨基酸或7-50个氨基酸； ii)所述抗原由一种或多种合成肽提供； iii)所述抗原由至少两组肽提供，第一组包含至少一种长度为约7-14个氨基酸残基的肽且第二组包含至少一种长度为15个氨基酸残基或更长的肽，所述肽包括全部或一部分蛋白抗原； iv)所述抗原由被CD8+细胞毒性T细胞识别的一种或多种肽提供；和/或 v)所述抗原由被CD8+细胞毒性T细胞识别的一种或多种肽提供且所述一种或多种肽的长度为小于15个氨基酸，优选长度选自7-14个氨基酸。 8.如权利要求1-7中一项或多项所述的方法，其中，在步骤(a)中使用了两种或多种不同的抗原和/或在步骤(b)中检测了两种或多种不同的效应分子。 9.如权利要求1-8中一项或多项所述的方法，所述抗原是疾病特异性抗原，特别是病原体特异性抗原。 10.如权利要求1-9中一项或多项所述的方法，所述抗原具有一种或多种以下特性： i)所述抗原与疾病或病症相关或代表疾病或病症，其中针对所述疾病或病症测试细胞介导的免疫应答； ii)所述抗原来源于来自疾病病症相关病原体的抗原或与其具有交叉反应性，或者是与癌症相关的肿瘤相关抗原； iii)所述抗原是病原体特异性抗原且所述病原体是细菌、病毒、寄生虫、酵母或真菌； iv)所述抗原是病原体特异性抗原，即细菌特异性抗原，且所述细菌选自革兰氏阳性和革兰氏阴性微生物，特别是分枝杆菌属如结核分枝杆菌，葡萄球菌属，链球菌属，大肠杆菌，沙门氏菌属，梭状芽孢杆菌属，志贺菌属，变形杆菌属，芽孢杆菌属，嗜血杆菌属和伯疏氏螺旋体属； v)所述抗原是病原体特异性抗原，即病毒特异性抗原，且所述病毒选自肝炎病毒如乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒、疱疹病毒、CMV病毒和人免疫缺陷病毒(HIV)；和/或 vi)所述抗原来自或特异性针对病毒，优选巨细胞病毒(CMV)，且由一种或多种肽提供，所述肽的长度为7-14个氨基酸残基、7-13个氨基酸残基或8-12个氨基酸残基。 11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其用于监测或测定是否存在疾病或病症或其水平或阶段，所述疾病或病症选自致病物感染、自身免疫疾病、癌症、炎性病症、暴露于毒性试剂、对治疗剂应答、免疫缺陷和免疫抑制。 12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，所述方法包括： (a)通过使获自人对象的全血样品接触包含至少一种肽抗原和至少一种优选海藻糖或蔗糖的非还原二糖的组合物来提供孵育组合物，并将所述孵育组合物孵育至少2小时；以及 (b)测量是否存在因所述抗原刺激而释放的IFN-γ或其水平；其中，存在经检测的IFN-γ或其量表示所述人对象中细胞介导的免疫应答的水平。 13.如权利要求1-12中一项或多项所述的方法，所述非还原糖选自海藻糖、甘露醇、蔗糖和棉子糖，且优选地，所述非还原糖是海藻糖。 14.一种用于诱导细胞介导的免疫应答的组合物，所述组合物包含： a)至少一种抗原，所述抗原是疾病特异性抗原； b)至少一种非还原糖；以及 c)可选的至少一种抗凝血剂。 15.如权利要求14所述的组合物，所述组合物具有一种或多种以下特性： i)所述非还原糖是非还原二糖，优选选自海藻糖和蔗糖； ii)所述非还原糖不用作抗原的稳定剂； iii)所述非还原糖选自海藻糖、甘露醇、蔗糖和棉子糖； iv)所述非还原糖是海藻糖； v)所述抗原具有权利要求7-10中一项或多项所定义的一种或多种特性； vi)所述抗原由一种或多种肽提供，优选合成肽，其长度小于15个氨基酸、优选长度选自7-14个氨基酸； vii)所述抗凝血剂是肝素；和/或 viii)所述组合物是喷雾干燥的组合物。 16.一种样品收集容器，其包含权利要求14或15所述的组合物。 17.一种试剂盒，所述试剂盒用于测量对象中细胞介导的免疫应答活性，包含至少一种抗原、至少一种非还原糖、至少一种样品收集容器和至少一种针对至少一种免疫效应分子的检测手段。 18.如权利要求17所述的试剂盒，所述样品收集容器具有权利要求16 所述的样品收集容器的特性。 19.非还原糖在测量细胞介导的应答活性的免疫试验中的应用，其中，所述样品与所述抗原孵育期间添加所述非还原糖增加了对所述试验中测试的所述抗原产生应答的免疫细胞释放的免疫效应分子，且优选地，所述非还原糖具有一种或多种以下特性： i)所述非还原糖是二糖； ii)所述非还原糖选自海藻糖和蔗糖； iii)所述非还原糖选自海藻糖、甘露醇、蔗糖和棉子糖； iv)所述非还原糖是海藻糖； v)所述非还原糖以至少1mg/ml、优选2mg/ml的浓度用于包含待测试样品和所述抗原的所述孵育组合物中；和/或 vi)所述非还原糖以组合物的形式提供，所述组合物还包含待测试抗原和可选的抗凝血剂。
所属类别：	发明专利