专利名称: |
一种用于检测人VEGF蛋白表达水平的体外试剂盒 |
摘要: |
本发明提供了一种用于检测人VEGF蛋白表达水平的体外试剂盒,本发明提供的试剂盒中的人源化单克隆抗体能够很好地、特异性与VEGF抗原结合,具有高效检测VEGF相关疾病的辅助诊断作用。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
浙江;33 |
申请人: |
浙江众意生物科技有限公司 |
发明人: |
吕鹏辉 |
专利状态: |
有效 |
申请日期: |
2019-04-03T00:00:00+0800 |
发布日期: |
2019-08-16T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN201910268089.2 |
公开号: |
CN110133278A |
代理机构: |
杭州橙知果专利代理事务所(特殊普通合伙) |
代理人: |
李品 |
分类号: |
G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33 |
申请人地址: |
311100 浙江省杭州市余杭区兴国路503号1幢三层 |
主权项: |
1.一种用于检测人VEGF蛋白表达水平的体外试剂盒,其特征在于,将VEGF抗体包被板制成固相抗体,往包被抗体的微孔中依次加入样品,再加入HRP标记的酶标液,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色,TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在终止液作用下转化为黄色,颜色深浅与VEGF抗原含量成正相关,利用酶标仪测定450nm波长下OD,通过标曲计算VEGF含量,所述检测试剂盒包含新型人源化VEGF单抗,所述VEGF抗体包括: 包含SEQ ID NO:07的氨基酸序列的CDR-L1,和/或 包含SEQ ID NO:08的氨基酸序列的CDR-L2,和/或 包含SEQ ID NO:09的氨基酸序列的CDR-L3,和/或 包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列的CDR-H1,和/或 包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列的CDR-H2,和/或 包含SEQ ID NO:12的氨基酸序列的CDR-H3。 2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述抗体为单克隆抗体, 可选地,所述抗体为特异性结合人VEGF的抗体片段, 可选地,所述抗体为包含特异性结合人VEGF抗体片段的融合蛋白, 可选地,所述抗体为鼠源抗体, 可选地,所述抗体为人源化抗体, 可选地,所述抗体为鼠源单克隆抗体。 优选地,所述抗体为人源化单克隆抗体。 3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述抗体包含抗体重链可变区氨基酸序列包括如SEQ ID NO:23所示或与SEQ ID NO:24的氨基酸序列具有至少99%序列同一性的VH序列; 可选地,所述抗体包含抗体轻链可变区氨基酸序列包括如SEQ ID NO:25所示或与SEQID NO:26的氨基酸序列具有至少99%序列同一性的VL序列; 优选地,所述抗体重链恒定区氨基酸序列如SEQ ID NO:23所示,所述抗体轻链恒定区氨基酸序列如SEQ ID NO:24所示。 4.根据权利要求1-5所述任一试剂盒,其特征在于,所述抗体包含选自人抗体IgG1、IgG2、IgG3、IgG4的任一Fc端的氨基酸序列。 5.根据权利要求1-6所述的试剂盒,其特征在于,所述抗体的生产步骤包括:在培养基中和合适的培养条件下培养含有权利要求1-6所述抗体的宿主细胞,从培养基中或从所培养的宿主细胞中回收产生的抗体及其抗体片段。 6.根据权利要求1-5所述任一试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括酶标包被板、标品、标品缓冲剂、酶标液、样品稀释液、TMB显色剂、洗涤液、终止液。 7.根据权利要求7所述试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒可以用于辅助诊断癌症及眼内疾病。 8.根据权利要求8所述试剂盒,其特征在于,所述癌症包括但不限于白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、脑肿瘤、头颈部鳞状细胞癌、非小细胞肺癌、鼻咽癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、胆囊癌、肝癌、结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、子宫肉瘤、前列腺癌、膀胱癌、肾细胞癌、黑色素瘤。 |
所属类别: |
发明专利 |