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原文传递用于评估重组蛋白表达或报告基因表达的侧向流动检测

专利名称：	用于评估重组蛋白表达或报告基因表达的侧向流动检测
摘要：	本公开涉及侧向流动测试装置及其用途，用于评估样品中的重组蛋白(多肽)表达或报告基因表达。在一些方面，本公开涉及侧向流动免疫测定法用于快速检测重组蛋白质表达的用途。在一些方面，侧向流动免疫测定可用于重组蛋白表达的定性和/或定量分析。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	美国;US
申请人：	QOOLABS有限公司
发明人：	齐宏
专利状态：	有效
申请日期：	2017-08-17T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-02T00:00:00+0800
申请号：	CN201780051503.3
公开号：	CN109964127A
代理机构：	北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司
代理人：	吴泳历
分类号：	G01N33/558(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	美国加利福尼亚州圣地亚哥
主权项：	1.一种用于评估样品中重组蛋白(多肽)表达或报告基因表达的侧向流动测试装置，其包括多孔基质，所述多孔基质包括在所述多孔基质上的测试位置，所述测试位置包含结合分析物的测试试剂或另一种与所述分析物结合的结合试剂，或者所述测试试剂是与所述样品中的分析物竞争结合所述分析物的结合试剂的分析物或分析物类似物，其中所述分析物是重组蛋白(多肽)表达产物或报告基因表达产物，且其中液体样品沿着所述测试装置侧向流动并流经所述测试位置形成可检测信号，从而确定在所述样品中所述重组蛋白(多肽)表达产物或所述报告基因表达产物的存在，不存在和/或量。 2.权利要求1的测试装置，其中所述基质包括硝化纤维素、玻璃纤维、聚丙烯，聚乙烯(优选具有非常高分子量)、聚偏二氟乙烯、乙烯醋酸乙烯酯、丙烯腈和/或聚四氟乙烯。 3.根据权利要求1所述的测试装置，其中所述测试试剂结合到所述分析物。 4.根据权利要求3所述的测试装置，其中所述测试试剂特异性结合所述分析物。 5.根据权利要求1所述的测试装置，其中所述测试试剂结合另一种结合所述分析物的结合试剂。 6.根据权利要求1所述的测试装置，其中所述测试试剂是分析物或分析物类似物，其与所述样品中的分析物竞争结合所述分析物的结合试剂。 7.如权利要求1-6中任一项所述的测试装置，其中所述测试试剂是肽或蛋白质。 8.如权利要求7所述的测试装置，其中所述蛋白质是抗原或抗体。 9.根据权利要求1-8中任一项所述的测试装置，其中所述基质呈条带或圆形。 10.根据权利要求1-9中任一项所述的测试装置，其中所述基质是单个元素或包含多个元素。 11.根据权利要求1-10中任一项所述的测试装置，其进一步包括在所述基质上游并与所述基质流体连通的样品施加元件。 12.根据权利要求1-11中任一项所述的测试装置，其进一步包括在所述基质下游并与所述基质流体连通的液体吸收元件。 13.根据权利要求1-12中任一项所述的测试设备，还包括对照位置。 14.根据权利要求1-13中任一项所述的测试装置，其中所述基质的至少一部分由固体背衬支撑。 15.根据权利要求1-14中任一项所述的测试装置，其中所述基质的一部分，在所述测试位置的上游，包括干燥的标记试剂，所述标记试剂能够被液体样品和/或另外的液体移动到所述测试位置和/或对照位置以产生可检测信号。 16.根据权利要求15所述的测试装置，其中所述干燥的标记试剂位于所述测试装置上的所述样品施加位置的下游。 17.根据权利要求15所述的测试装置，其中所述干燥的标记试剂位于所述测试装置上的所述样品施加位置的上游。 18.根据权利要求1-17中任一项所述的测试装置，其在所述测试位置的上游还包括结合元件，所述结合元件包含干燥的标记试剂，所述标记试剂能够通过液体样品和/或额外的液体移动到测试位置和/或对照位置以产生可检测信号。 19.根据权利要求18所述的测试装置，其中所述结合元件位于所述测试装置上的样品施加位置的下游。 20.根据权利要求18所述的测试装置，其中所述结合元件位于所述测试装置上的样品施加位置的上游。 21.根据权利要求15-20中任一项所述的测试装置，其中所述标记试剂与所述样品中的分析物结合，并且优选地特异性结合。 22.如权利要求15-21中任一项所述的测试装置，其中所述标记是可溶性标记，例如荧光标记。 23.根据权利要求15-21中任一项所述的测试装置，其中所述标记是颗粒标记，例如金或乳胶颗粒标记。 24.根据权利要求15-23中任一项所述的测试装置，其中所述标记试剂在存在：a)稳定所述标记试剂；b)促进所述标记试剂在液体中的溶解或再悬浮；和/或c)促进所述标记试剂的移动性，的材料条件下干燥。 25.根据权利要求24所述的测试装置，其中所述材料选自蛋白质例如酪蛋白或BSA、肽、多糖、糖、聚合物例如聚乙烯吡咯烷酮(PVP-40)、明胶和洗涤剂例如吐温-20。 26.如权利要求1-25中任一项所述的测试装置，其中单独用样品液体将分析物和/或标记的试剂输送到测试位置。 27.如权利要求1-26中任一项所述的测试装置，其中使用显影液将分析物和/或标记的试剂输送到测试位置。 28.根据权利要求1-27中任一项所述的测试装置，还包括覆盖所述测试装置的至少一部分的壳体，其中所述壳体包括样品施加口，以允许在所述测试位置上游或到所述测试位置施加样品，和在测试位置周围的视窗，以允许在所述测试位置处进行信号检测。 29.根据权利要求28所述的测试装置，其中所述壳体覆盖整个测试装置。 30.根据权利要求28所述的测试装置，其中所述基质或所述样品施加元件的所述样品接收部分的至少一部分未被所述壳体覆盖，并且样品被施加到所述基质的所述样品接收部分的所述部分或样品施加元件在壳体外部然后被运输到测试位置并且样品被施加到所述壳体外的所述基质的样品接收部分或所述样品施加元件的一部分上,然后被运送到所述测试位置。 31.根据权利要求28-30中任一项所述的测试装置，其中所述壳体包含塑料材料。 32.如权利要求15-31中任一项所述的测试装置，其中所述测试试剂和所述标记试剂与所述分析物结合，并且所述测试试剂和所述标记试剂中的至少一种特异性结合所述分析物。 33.根据权利要求32所述的测试装置，其中所述测试试剂和所述标记试剂特异性结合所述分析物。 34.根据权利要求15-31中任一项所述的测试装置，其中所述测试试剂是分析物或分析物类似物，其与所述样品中的分析物竞争结合与所述分析物结合的所述标记试剂。 35.根据权利要求34所述的测试装置，其中所述标记的试剂特异性结合所述分析物。 36.根据权利要求15-31中任一项所述的测试装置，其中所述测试试剂结合到所述分析物，并且所述标记的试剂包括分析物或分析物类似物，所述分析物或分析物类似物与所述样品中的分析物竞争结合所述测试试剂。 37.根据权利要求36所述的测试装置，其中所述测试试剂特异性结合所述分析物。 38.权利要求1-37中任一项的测试装置，其配置用于评估样品中的重组蛋白表达。 39.权利要求38的测试装置，其中测试试剂和标记试剂结合重组蛋白表达产物，并且测试试剂和标记试剂中的至少一种特异性结合重组蛋白表达产物。 40.如权利要求39所述的测试装置，其中所述重组蛋白表达产物包含靶蛋白部分和标签部分。 41.根据权利要求40所述的测试装置，其中所述测试试剂和所述标记试剂中的至少一种与所述靶蛋白质部分结合或特异性结合。 42.根据权利要求40所述的测试装置，其中所述测试试剂和所述标记试剂中的至少一种与所述标签部分结合或特异性结合。 43.根据权利要求38所述的测试装置，其中所述测试试剂是重组蛋白表达产物或其部分，其与样品中的重组蛋白表达产物竞争性结合或特异性结合那些结合所述重组蛋白表达产物的标记试剂。 44.如权利要求43所述的测试装置，其中所述重组蛋白表达产物包含靶蛋白部分和标签部分。 45.权利要求44的测试装置，其中测试试剂包含重组蛋白表达产物的靶蛋白部分或其部分，并且标记的试剂与重组蛋白表达产物的靶蛋白部分结合或特异性结合。 46.如权利要求44所述的测试装置，其中所述测试试剂包括所述重组蛋白表达产物的标签部分或其部分，并且所述标记试剂与所述标签部分结合或特异性结合。 47.权利要求1-37中任一项的测试装置，其配置用于评估样品中的报告基因表达。 48.如权利要求47所述的测试装置，其中所述测试试剂和所述标记试剂结合所述报告基因表达产物，并且所述测试试剂和所述标记试剂中的至少一种特异性结合所述报告基因表达产物。 49.如权利要求48所述的测试装置，其中所述报告基因表达产物包含报告蛋白部分和标签部分。 50.如权利要求49所述的测试装置，其中所述测试试剂和所述标记试剂中的至少一种与所述报告蛋白部分结合或特异性结合。 51.如权利要求49所述的测试装置，其中所述测试试剂和所述标记试剂中的至少一种与所述标签部分结合或特异性结合。 52.如权利要求47所述的测试装置，其中所述测试试剂是报告基因表达产物，或它们的部分，其与样品中的报道基因表达产物竞争结合或特异性结合那些结合所述报告基因表达产物的标记试剂。 53.如权利要求52所述的测试装置，其中所述报告基因表达产物包含报告蛋白部分和标签部分。 54.权利要求53的测试装置，其中测试试剂包含报告基因表达产物的报告蛋白部分或其部分，并且所述标记试剂结合或特异性结合所述报告基因表达产物的的报告蛋白部分。 55.如权利要求53所述的测试装置，其中所述测试试剂包括所述报告基因表达产物的标签部分或其部分，并且所述标记试剂与所述报告基因表达产物的标签部分结合或特异性结合。 56.如权利要求1-55中任一项所述的测试设备，其被配置用于： 1)评估样品中的多种重组蛋白表达产物或多种报告基因表达产物； 2)确定具有预期产量的重组蛋白表达的候选物； 3)评估重组蛋白表达或报告基因表达时程； 4)优化用于重组蛋白表达或报告基因表达诱导条件；和/或 5)在蛋白质纯化过程例如色谱法中确定具有预期的重组蛋白质的馏分。 57.一种评估样品中重组蛋白表达或报告基因表达的方法，该方法包括： a)使液体样品与权利要求1-56中任一项的测试装置接触，其中将液体样品施加到所述测试位置上游的测试装置的位点上； b)将分析物，如果存在于液体样品中，和标记试剂运输到所述测试位置；和 c)评估所述测试位置处的可检测信号以确定所述样品中所述重组蛋白表达产物或所述报告基因表达产物的存在，不存在和/或量。 58.如权利要求57所述的方法，其中将所述液体样品和所述标记试剂预混合以形成混合物并将所述混合物施加到所述测试装置上。 59.如权利要求58所述的方法，其特征在于,还包括在将混合物施加到测试装置上之后的洗涤步骤。 60.如权利要求59所述的方法，其中所述洗涤步骤包括在将所述混合物施加到所述测试装置之后添加洗涤液。 61.如权利要求58所述的方法，其中所述测试装置包括含有洗涤液的液体容器，并且所述洗涤步骤包括从所述液体容器释放所述洗涤液。 62.如权利要求57所述的方法，其中所述测试装置在使用前包含干燥的标记试剂，并且所述干燥的标记试剂被溶解或重悬浮，并通过所述液体样品运输到所述测试位置。 63.如权利要求62所述的方法，其中所述干燥的标记试剂位于所述样品施加部位的下游，并且所述干燥的标记试剂被溶解或重悬浮，并通过所述液体样品运输至所述测试位置。 64.如权利要求62所述的方法，其中所述干燥的标记试剂位于所述样品施用部位的上游，并且所述干燥的标记试剂被溶解或再悬浮，并通过另一种液体运输到所述测试位置。 65.权利要求62的方法，其中将标记试剂溶解或重悬，并仅通过液体样品运输到测试位置。 66.如权利要求62所述的方法，其中所述分析物和/或标记试剂被溶解或重悬浮，并通过另一种液体运输到所述测试位置。 67.权利要求57-66中任一项的方法，其中所述液体样品包含细胞裂解物、细胞培养基、体外转录产物、体外翻译产物、多肽纯化馏分和/或从受试者分离或衍生的样品。 68.权利要求57-67中任一项的方法，其中所述可检测信号由读数器评估。 69.权利要求68的方法，其中可检测信号是荧光信号，荧光信号由荧光读数器评估。 70.如权利要求69所述的方法，其中所述荧光读取器是基于激光的或基于发光二极管(LED)的荧光读取器。 71.如权利要求68-70中任一项所述的方法，其中所述读取器包括单个或多个光电探测器。 72.权利要求57-71中任一项的方法，其用于评估样品中的重组蛋白表达。 73.权利要求72的方法，其用于确定样品中重组蛋白表达产物的存在或不存在。 74.权利要求72的方法，其用于测定样品中重组蛋白表达产物的量。 75.权利要求57-71中任一项的方法，其用于评估样品中的报告基因表达。 76.权利要求75的方法，其用于确定样品中报告基因表达产物的存在或不存在。 77.权利要求75的方法，其用于测定样品中报告基因表达产物的量。 78.如权利要求57-77中任一项所述的方法，其用于： 1)评估样品中的多种重组蛋白表达产物或多种报告基因表达产物； 2)确定具有预期产量的重组蛋白表达的候选物； 3)评估重组蛋白表达或报告基因表达时程； 4)优化用于重组蛋白表达或报告基因表达诱导条件；和/或 5)在蛋白质纯化过程例如色谱法中确定具有预期的重组蛋白质的馏分。 79.如权利要求57-78中任一项所述的方法，其在进行约一小时或在约一小时内完成。 80.一种用于评估样品中重组蛋白表达或报告基因表达的系统，该系统包括： a)如权利要求1-56中任一项所述的测试装置；和 b)包括光源和光电检测器的读取器，用于检测可检测信号。 81.如权利要求80所述的系统，其中所述读取器还包括条形码检测器和/或RFID检测器。
所属类别：	发明专利