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诱导分泌表达生产重组葎草主要致敏蛋白Hum j 3的方法
| 专利名称： | 诱导分泌表达生产重组葎草主要致敏蛋白Hum j 3的方法 |
| 摘要： | 本发明提供一种在酵母系统中诱导表达重组葎草花粉主要致敏蛋白Hum?j?3的方法，包括：构建表达SEQ?ID?NO.2所示氨基酸序列的重组表达载体；线性化重组表达载体，转化感受态酵母细胞；筛选阳性克隆，得重组菌株，并扩大培养；重组菌株的诱导表达以及筛选：Hum?j?3蛋白在酵母中以α-factor信号肽蛋白引导的分泌表达；以高活性的重组菌株为种子菌进行高密度的诱导表达重组Humj?3蛋白；收集培养上清并分离纯化Humj?3。本发明首次在国际上确证了葎草主要致敏蛋白的全基因序列，并首次成功进行了酵母分泌表达，且证实了该重组蛋白具有免疫活性，为葎草花粉过敏患者的分子诊断和临床免疫治疗提供了全新的蛋白。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 北京;11 |
| 申请人： | 中国医学科学院北京协和医院 |
| 发明人： | 尹佳;周俊雄;程璇 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2009-08-25T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN200910091766.4 |
| 公开号： | CN101993888A |
| 代理机构： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 |
| 代理人： | 王朋飞 |
| 分类号： | C12N15/81(2006.01)I |
| 申请人地址： | 100730 北京市东城区王府井大街帅府园胡同一号 |
| 主权项： | 一种诱导分泌表达生产重组葎草主要致敏蛋白Hum?j?3的方法，其特征在于它包括如下步骤：(1)构建表达SEQ?ID?NO.2所示氨基酸序列的重组表达载体；(2)线性化重组表达载体，转化感受态酵母细胞；(3)筛选阳性克隆，得重组菌株，并扩大培养；(4)重组菌株的诱导表达以及筛选：Humj?3蛋白在酵母中以α?factor信号肽蛋白引导的分泌表达，筛选活性较高的重组菌；(5)以活性较高的重组菌株为种子菌进行高密度的诱导表达重组Hum?j?3蛋白；(6)收集培养上清并分离纯化Hum?j?3。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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