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用于Hum j 3检测的夹心ELISA试剂盒
| 专利名称： | 用于Hum j 3检测的夹心ELISA试剂盒 |
| 摘要： | 本发明提供一种用于Hum?j3检测的夹心ELISA试剂盒，其通过天然葎草花粉纯化主要致敏蛋白Hum?j3的制备、小鼠杂交瘤单抗的制备和筛选、夹心ELISA方法两种单抗的选择、夹心ELISA方法试验条件的确定、夹心ELISA方法敏感性、特异性、线性范围、稳定性等方法学指标的确定等步骤建立夹心ELISA法。本发明试剂盒包括该方法的运用包括：捕捉抗体和检测抗体，所述捕捉抗体包被于酶标板中，所述检测抗体为酶标记抗体，所述捕捉抗体和检测抗体分别特异性地针对Hum?j3的不同抗原决定簇。本发明在临床实践、变应原制药工业生产、质控与新药研发、气候与环境中Hum?j3含量监测与预报中有重要的运用价值。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 北京;11 |
| 申请人： | 中国医学科学院北京协和医院 |
| 发明人： | 尹佳;周俊雄;程璇;孙劲旅 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2009-08-06T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN200910090769.6 |
| 公开号： | CN101988928A |
| 代理机构： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 |
| 代理人： | 王朋飞 |
| 分类号： | G01N33/68(2006.01)I |
| 申请人地址： | 100730 北京市东城区王府井大街帅府园胡同一号 |
| 主权项： | 一种检测葎草花粉主要致敏蛋白Hum?j3的夹心ELISA建立方法，其包括如下步骤：1)通过纯化主要致敏蛋白Hum?j3免疫BALB/c小鼠，制备多株小鼠杂交瘤单抗；2)通过十字交叉法筛选小鼠杂交瘤的单抗，寻找最优的构建夹心ELISA方法的两种单抗的配置：首先经过单抗与特异葎草花粉主要致敏蛋白过敏的人血清IgE的竞争ELISA法分析，确定与人血清IgE的存在最大竞争抑制率的一种候选单抗；其次通过与Hum?j3结合的单抗之间的相互竞争抑制ELISA的分析，确定构建夹心ELISA方法的另一种单抗；3)优化夹心ELISA方法检测葎草花粉主要致敏蛋白Hum?j3的条件，包括：包被单抗浓度、葎草变应原浸液和纯化葎草花粉主要致敏蛋白的浓度稀释范围，酶标单抗的稀释浓度；4)确定夹心ELISA方法检测葎草花粉主要致敏蛋白Hum?j3的各种方法学指标，包括：敏感性、特异性、线性范围、显色稳定性。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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