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一种DNA链作为信号开关检测重金属离子的制备方法
| 专利名称： | 一种DNA链作为信号开关检测重金属离子的制备方法 |
| 摘要： | 本发明提供了一种DNA链作为信号开关检测重金属离子的制备方法，利用银镜反应制作的玻片Ag‑film作为表面增强拉曼散射(SERS)检测的基底，用葡萄糖还原的方法，将银纳米粒子还原在玻片(Si)上。通过硫醇键将用Cy5标记的DNA单链(CY5‑B1‑SH)连接在铺有银纳米颗粒的玻璃板上，用DNA链作为拉曼信号的开关，以此来间接表明待测介质中是否存在重金属离子汞（Hg2+）。通过银镜反应制作的玻片做为重金属检测的基底，狭窄和尖锐的拉曼峰导致很小的背景噪音，使得SERS增强因子(EF)大大地增强，提高了检测的灵敏度，检测结构具有极好的重复性。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 福建;35 |
| 申请人： | 福建师范大学 |
| 发明人： | 冯尚源;刘秀杰;吴长机;卢玉栋 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-06-05T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-08-16T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910487686.4 |
| 公开号： | CN110132937A |
| 代理机构： | 福州元创专利商标代理有限公司 |
| 代理人： | 饶文君;蔡学俊 |
| 分类号： | G01N21/65(2006.01);G;G01;G01N;G01N21 |
| 申请人地址： | 350117 福建省福州市闽侯县上街镇大学城科技路1号,福建师范大学旗山校区 |
| 主权项： | 1.一种DNA链作为信号开关检测重金属离子的制备方法，其特征在于：包括如下步骤： （1）表面增强拉曼散射基底Ag-film的制备 1）清洗玻片：将玻璃片除油并用铬酸浸泡一整夜，超纯水洗净，在无水乙醇中超声30min，超纯水洗净，待用； 2）在体积为3mL、0.1mol/L的AgNO3溶液中滴加0.25mol/L氢氧化铵溶液，首先形成棕色难溶物氧化银，持续滴加到难溶物全部溶解，获得银铵溶液，将处理后的玻璃片放入银铵溶液中，然后加入0.05ml、6wt %的葡萄糖溶液作为还原剂，银镜反应的时间5min～20min，温度为70～90℃，最终在玻璃上合成银膜； （2）构建检测重金属离子汞的探针 1）准备好的Ag-film通过与单链Cy5-B1-SH共轭来构建特异性感应Hg2+的SERS传感器； 2）Cy5-B1-SH通过硫醇分子与银膜基底Ag-film相连，当没有重金属离子Hg2+，DNA探针体现一个开放的构象，Cy5标记酶链的一端与基底相距较远，只能产生微弱的拉曼光谱信号；在重金属离子Hg2+存在时，开放的结构构象发生变化：开放的DNA结构构象转变成由胸腺嘧啶(T)-Hg2 + -（T）形成的发夹结构，这种构象变化导致Cy5标记分子和纳米颗粒表面的距离更近，从而产生强烈的拉曼光谱信号。 2.根据权利要求1所述的一种DNA链作为信号开关检测重金属离子的制备方法，其特征在于：步骤（2）中的单链Cy5-B1-SH为：CY5-TTCTTTCTTCCCCTTGTTTGTT-SH。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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