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原文传递一种快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒及其制备方法

专利名称：	一种快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒及其制备方法
摘要：	本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒及其制备方法，所述快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒包括相互独立的试剂R1和试剂R2，其特征在于，所述试剂R1包括：磷酸盐缓冲液50～150mmol/L；氯化钠11～15g/L；表面活性剂3～11g/L；牛血清蛋白5～12g/L；乙二醇聚氧乙烯醚80～100g/L；防腐剂3～6g/L；且所述试剂R1的pH值为6.3～7.5；所述试剂R2包括：磷酸盐缓冲液80～120mmol/L；抗人钙卫蛋白抗体包被胶乳颗粒15～30mg/L；封闭剂20～50mg/L；氯化钠5～8g/L；牛血清蛋白3～8g/L；防腐剂4～6g/L；且所述试剂R2的pH值为7～8，其中，试剂R2中组分浓度为组分在试剂中的终浓度。本发明提供的钙卫蛋白检测试剂盒，能够准备、快速、灵敏的检测出人粪便和血液中的钙卫蛋白。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	安徽;34
申请人：	芜湖森爱驰生物科技有限公司
发明人：	王晓波;朱雪姣;朱海峰
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-01T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910257726.6
公开号：	CN110133275A
代理机构：	北京润平知识产权代理有限公司
代理人：	刘兵
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	241000 安徽省芜湖市芜湖县安徽新芜经济开发区南次一路369号
主权项：	1.一种快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒，包括相互独立的试剂R1和试剂R2，其特征在于，所述试剂R1包括：磷酸盐缓冲液50～150mmol/L；氯化钠11～15g/L；表面活性剂3～11g/L；牛血清蛋白5～12g/L；乙二醇聚氧乙烯醚80～100g/L；防腐剂3～6g/L；且所述试剂R1的pH值为6.3～7.5；所述试剂R2包括：磷酸盐缓冲液80～120mmol/L；抗人钙卫蛋白抗体包被胶乳颗粒15～30mg/L；封闭剂20～50mg/L；氯化钠5～8g/L；牛血清蛋白3～8g/L；防腐剂4～6g/L；且所述试剂R2的pH值为7～8，其中，试剂R2中组分浓度为组分在试剂中的终浓度。 2.根据权利要求1所述的快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1包括：磷酸盐缓冲液80～120mmol/L；氯化钠12～15g/L；表面活性剂5～8g/L；牛血清蛋白6～10g/L；乙二醇聚氧乙烯醚85～96g/L；防腐剂3～6g/L；且所述试剂R1的pH值为6.3～7.5；所述试剂R2包括：磷酸盐缓冲液90～110mmol/L；抗人钙卫蛋白抗体包被胶乳颗粒18～25mg/L；封闭剂25～45mg/L；氯化钠5～8g/L；牛血清蛋白5～6g/L；防腐剂4～6g/L；且所述试剂R2的pH值为7～8，其中，试剂R2中组分浓度为组分在试剂中的终浓度。 3.根据权利要求2所述的快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒，其特征在于，在试剂R2中，所述封闭剂包括明胶1～3wt％、NH2-PEG 2～4wt％和壳聚糖1～5wt％，其余为磷酸盐缓冲液。 4.根据权利要求3所述的快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述抗人钙卫蛋白抗体包被胶乳颗粒与所述封闭剂的浓度比为1:1.1～2.5。 5.根据权利要求1所述的快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述防腐选自叠氮钠、苯酚、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸乙酯中的至少一种。 6.根据权利要求1所述的快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂选自Triton X-100、Tween-20、月桂醚、聚氧乙烯烷基苯基醚、聚氧乙烯壬基苯基醚和聚氧乙烯辛基苯醚中的至少一种。 7.一种根据利要求1～6中任意一项所述的快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)试剂R1的制备； (2)试剂R2的制备：将聚苯乙烯乳胶微球用磷酸盐缓冲液稀释，然后加入氯化钠、牛血清蛋白、3-(N-吗啉)丙磺酸、N-羟基硫代琥珀酰亚胺、稀土离子和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐活化聚苯乙烯乳胶微球，超声分散30～60min，得到产物A；将产物A均分为两份，即A1和A2，在产物A1中加入抗人钙卫蛋白抗体A，反应1～3h后，加入封闭剂，得到乳胶液C1；在产物A2中胶乳加入抗人钙卫蛋白抗体B，反应1～3h后，加入封闭剂，得到乳胶液C2；分别对乳胶液C1和乳胶液C2进行离心，弃去上清液，分别得到沉淀物D1和沉淀物D2，接着将沉淀物D1和沉淀物D2分别溶于磷酸盐缓冲液中，得到钙卫蛋白抗体标记液E1和E2，接着将钙卫蛋白抗体标记液E1和E2进行混合，并加入防腐剂，即得到抗人钙卫蛋白抗体包被胶乳颗粒溶液。 8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述稀土离子选自Eu2+和Eu3+中的一种。 9.根据权利要求7所述的快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒，所述聚苯乙烯胶乳的颗粒直径为100～300nm。
所属类别：	发明专利