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原文传递一种毛孢子菌的检测试剂盒及其制备方法

专利名称：	一种毛孢子菌的检测试剂盒及其制备方法
摘要：	本发明公开了一种毛孢子菌检测试剂盒及其制备方法，毛孢子菌检测试剂盒包含毛孢子菌捕获抗体包被的酶标板、毛孢子菌检测抗体、标准品、样本稀释缓冲液、包被缓冲液、封闭缓冲液、底物溶液及终止液。本发明利用多克隆毛孢子菌捕获抗体包被酶标板，使用高度特异性ELISA结合标准真菌培养方法证明了毛孢子菌特异性多抗(pAb)在混合培养物中区分T.asahii与其他酵母病原体的准确性，以及本发明中捕获抗体与可与毛孢子菌特异性结合。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广州爱康生物技术有限公司
发明人：	赖演媚;刘灵辉;赖柔贝
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-22T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910438041.1
公开号：	CN110133263A
代理机构：	广州三环专利商标代理有限公司
代理人：	颜希文;宋静娜
分类号：	G01N33/569(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	510000 广东省广州市黄埔区瑞和路39号自编号G1座301-307
主权项：	1.一种毛孢子菌检测试剂盒，其特征在于，包含毛孢子菌捕获抗体包被的酶标板、毛孢子菌检测抗体、标准品、样本稀释缓冲液、包被缓冲液、封闭缓冲液、底物溶液及终止液。 2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述毛孢子菌捕获抗体为抗TA-Ag小鼠多克隆抗体。 3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述毛孢子菌检测抗体为抗TA-Ag兔多克隆抗体。 4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述抗TA-Ag兔多克隆抗体的效价比大于或等于1：5000。 5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述样本稀释缓冲液为Tris-Cl缓冲液、磷酸缓冲液或柠檬酸缓冲液的一种或多种的组合，所述样本稀释缓冲液的浓度为10～100mM，含有1.0～5.0％的封闭剂、0.01～0.05％非离子型去污型、0.1～5.0％的蛋白稳定剂、50～200mM NaCl、0.01～0.05％防腐剂，pH值为7.0～8.0。 6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述包被缓冲液为0.05～0.1M碳酸缓冲液，pH值为9.0～9.6。 7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述封闭缓冲液为Tris-Cl缓冲液、磷酸缓冲液或柠檬酸缓冲液的一种或多种的组合，所述封闭缓冲液的浓度为10～100mM，含有1.0～5.0％的封闭剂、0.01～0.05％的非离子型去污型，50～200mM NaCl，pH值为7.0～8.0。 8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述底物溶液为TMB显色溶液。 9.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述终止液为2M H2SO4溶液。 10.权利要求1～9任一项所述检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: 1)用包被缓冲液稀释毛孢子菌捕获抗体，加入酶标板的孔中，静置包被； 2)向步骤1)所得孔中入封闭缓冲液进行封闭，之后进行干燥、冷藏； 3)标准品的制备：通过裂解毛孢子菌获得TA-Ag总抗原，加入血清稀释所得溶液作为阳性对照样本，无添加TA-Ag总抗原的血清作为阴性对照样本； 4)毛孢子菌检测抗体用抗体稀释液稀释到工作浓度；以及 5)提供显色溶液、样品稀释缓冲液、浓缩洗涤液、封闭液，与步骤1)～4)所得，整合、包装即得所述检测试剂盒。
所属类别：	发明专利