详情

原文传递一种定量测定α-淀粉酶活性的多层膜干片及其测定方法

专利名称：	一种定量测定α-淀粉酶活性的多层膜干片及其测定方法
摘要：	本发明公开了属于医学免疫体外检验技术领域的一种定量测定α‑淀粉酶活性的多层膜干片及其测定方法。该多层膜干片为从上到下由多功能层、试剂层和支撑层组成，主要用于血清或尿液样品的测定；其中多功能层能快速均匀地将样品平铺到下面的试剂层上，同时，多功能层中含有95％以上高反射系数的白色反光物质；试剂层中的试剂含有反应显色所需要的物质；支撑层采用高分子聚合材料，起着支持和固定的作用。当样品通过多功能层渗透到试剂层，在试剂层发生化学反应，并产生颜色改变，从而定量测定人体中的α‑淀粉酶活性。本发明具有具特异性好，抗干扰能力强、操作简便、能快速准确得到结果，易于存储运输、成本低，适用于全自动化分析仪，临床应用价值大。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京石油化工学院
发明人：	靳海波;郭晓燕;何广湘;叶飞飞;杨索和
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-31T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-30T00:00:00+0800
申请号：	CN201910469655.6
公开号：	CN110187106A
代理机构：	北京众合诚成知识产权代理有限公司
代理人：	张文宝
分类号：	G01N33/573(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	102617 北京市大兴区黄村清源北路19号
主权项：	1.一种定量测定α-淀粉酶活性的多层膜干片；其特征在于，所述定量测定α-淀粉酶活性的多层膜干片为从上到下由多功能层、试剂层和支撑层组成，主要用于血清或尿液样品的测定；其中多功能层能快速均匀地将样品平铺到下面的试剂层上，同时，多功能层中含有95％以上高反射系数的白色反光物质；试剂层中的试剂含有反应显色所需要的物质；支撑层采用高分子聚合材料，起着支持和固定的作用。 2.根据权利要求1所述定量测定α-淀粉酶活性的多层膜干片；其特征在于，所述试剂层中的试剂包括缓冲试剂、底物、激活剂、防腐剂和增稠剂。 3.根据权利要求1所述定量测定α-淀粉酶活性的多层膜干片；其特征在于，所述高反射系数的白色反光物质为硫酸钡、二氧化钛或钛酸钡。 4.根据权利要求1所述定量测定α-淀粉酶活性的多层膜干片；其特征在于，所述支撑层采用各种高分子聚合材料制成的透明塑料。 5.根据权利要求4所述定量测定α-淀粉酶活性的多层膜干片；其特征在于，所述高分子聚合材料为聚乙烯、聚氯乙烯、聚苯二甲酸乙二醇酯。 6.根据权利要求4所述定量测定α-淀粉酶活性的多层膜干片；其特征在于，所述多功能层由亲水性高分子材料的醋酸纤维素、非离子型表面活性剂以及上述反光物质构成。 7.一种权利要求1所述定量测定α-淀粉酶活性的多层膜干片的α-淀粉酶活性测定方法；其特征在于，所述定量测定α-淀粉酶活性的检测步骤是： 1)将待测样品血清或尿液滴定到多功能层上； 2)待测样品通过多功能层快速均匀地渗透、平铺到试剂层上； 3)试剂层是主要发生化学反应的区域，待测样品与试剂层中的试剂发生化学反应及颜色变化，通过颜色的深浅或者测定反应过程的光密度变化，从而定量测定人体中的α-淀粉酶活性；具体是待测样品中的α-淀粉酶催化底物产生游离的2-氯-4-硝基苯酚(CNP)，即一种黄色颜料指示剂，在37℃下，用配套使用的反射分光光度计测量该干片在405nm下硝基苯酚的生成速率，采用两点速率法进行数据处理，即可得出结论；其生成速率与淀粉酶活性成正比。 8.根据权利要求7所述定量测定α-淀粉酶活性的多层膜干片的α-淀粉酶活性测定方法；其特征在于，所述待测样品与试剂层中的试剂发生化学反应及颜色变化主要是试剂中包含：使用的MES缓冲液是2-吗啉乙磺酸缓冲液，PH为6，浓度为10-100mM；采用的底物是人工合成多糖衍生物2-氯-4-硝基苯酚(CNP)，底物浓度为3-30Mm；激活剂为氯化钙、氯化镁，其中氯化钙的浓度为50-130mM，氯化镁的浓度为10-60mM；采用的增稠剂为明胶。 9.根据权利要求7所述定量测定α-淀粉酶活性的多层膜干片的α-淀粉酶活性测定方法；其特征在于，所述多功能层能够过滤掉一些大分子量物质和使样品快速均匀地多功能到下面试剂层中，从而使样品能与试剂层中试剂充分反应，显色更加均匀；同时多功能层还起到反射光的作用，减少有色物质对反射光的干扰，减少检测误差。
所属类别：	发明专利