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原文传递一种特异性结合铜离子和半胱氨酸的多肽荧光探针

专利名称：	一种特异性结合铜离子和半胱氨酸的多肽荧光探针
摘要：	本发明公开了特异性结合铜离子和半胱氨酸的多肽荧光探针。所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；用荧光发光物质修饰所述多肽的N端形成多肽荧光探针P，该探针能够靶向结合Cu2+，具有选择性好、毒性低、检测限低，而且制备简单、检测方便，为生物和环境样品中的铜离子的检测提供了一种高效的检测方法；探针P与Cu2+结合形成P‑Cu探针，该探针能够特异性的识别Cys，为生物体及环境样品中Cys的快速检测提供了一种高效的检测方法。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	甘肃;62
申请人：	兰州大学
发明人：	肖建喜;胡悦
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-12T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-30T00:00:00+0800
申请号：	CN201910503632.2
公开号：	CN110186891A
代理机构：	北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	韩慧颖
分类号：	G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	730000 甘肃省兰州市城关区天水南路222号
主权项：	1.一种多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。 2.一种如权利要求1所述的多肽在制备多肽荧光探针中的应用。 3.一种特异性识别Cu2+的多肽荧光探针P，其特征在于，所述的多肽荧光探针P由荧光发光物质与如权利要求1所述的多肽组成，所述荧光发光物质修饰在所述多肽的N端。 4.如权利要求3所述的多肽荧光探针P，其特征在于，所述的荧光发光物质为荧光素类、罗丹明类、香豆素类、喹啉类、萘酰亚胺、多芳基乙烯类中的任一种。 5.如权利要求4所述的多肽荧光探针P，其特征在于，所述的荧光发光物质为丹磺酰氯。 6.一种如权利要求3所述的多肽荧光探针P在检测Cu2+含量中的应用，其特征在于，所述的多肽荧光探针P与Cu2+以1:1配位结合，所述Cu2+的最低检测限为52nM，所述检测方法包括以下步骤： (1)标准曲线的制备：向10mM，pH7.4的HEPES缓冲液中加入10-5mol/L的多肽荧光探针P，再加入浓度为0.0，0.25，0.5，0.75，1.0，1.25μM的Cu2+，并检测波长为540nm处溶液的荧光强度，以Cu2+浓度为横坐标，荧光强度为纵坐标，绘制标准曲线； (2)样品中Cu2+含量的测定：向10mM，pH7.4的HEPES缓冲液中加入一定浓度的待测样品，并检测540nm处溶液的荧光强度； (3)计算待测样品中Cu2+的含量：将步骤(2)所得的荧光强度值带入步骤(1)制备的标准曲线中，计算出待测样品中Cu2+的含量。 7.一种如权利要求3所述的多肽荧光探针P在制备细胞成像试剂中的应用。 8.一种特异性识别Cys的多肽荧光探针P-Cu，其特征在于，所述多肽荧光探针P-Cu是由如权利要求3所述的多肽荧光探针P与Cu2+以1:1配位结合形成的配合物。 9.一种如权利要求8所述的多肽荧光探针P-Cu在检测Cys含量中的应用，其特征在于，所述多肽荧光探针P-Cu与Cys以2:1配位结合，所述Cys的最低检测限为43nM，所述检测方法包括以下步骤： (1)标准曲线的制备：向10mM，pH7.4的HEPES缓冲液中加入10-5mol/L的多肽荧光探针P-Cu，再加入浓度为0.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2μM的Cys，并检测波长为515nm处溶液的荧光强度，以Cys浓度为横坐标，荧光强度为纵坐标，绘制标准曲线； (2)样品中Cys含量的测定：向10mM，pH7.4的HEPES缓冲液中加入一定浓度的待测样品，并检测515nm处溶液的荧光强度； (3)计算待测样品中Cys的含量：将步骤(2)所得的荧光强度值带入步骤(1)制备的标准曲线中，计算出待测样品中Cys的含量。 10.一种如权利要求8所述的多肽荧光探针P-Cu在制备细胞成像试剂中的应用。
所属类别：	发明专利