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原文传递一种基于甲烷氧化菌素功能化纳米金的铜离子检测方法

专利名称：	一种基于甲烷氧化菌素功能化纳米金的铜离子检测方法
摘要：	本发明提供了一种基于甲烷氧化菌素功能化纳米金的铜离子检测方法，涉及一种检测样品中微量铜离子的方法；该方法包括以下步骤：首先利用甲烷氧化菌素催化四氯金酸原位合成甲烷氧化菌素功能化纳米金溶液，然后将经过预处理的对照样和待测样分别添加到甲烷氧化菌素功能化纳米金的水溶液中，放置一段时间后，对照样品颜色无变化的同时待测样颜色变为蓝紫色，则证明所检测的样品中含有铜离子。本发明方法利用甲烷氧化菌与铜之间的特异性结合实现铜离子的检测，专一性强，检验结果通过肉眼即能辨别，无需复杂的操作步骤和大型仪器，可实现铜离子的快速检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	黑龙江;23
申请人：	哈尔滨商业大学
发明人：	辛嘉英;孙立瑞;王艳;刘峰源
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-20T00:00:00+0800
申请号：	CN201910454940.0
公开号：	CN110146497A
分类号：	G01N21/78(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	150000 黑龙江省哈尔滨市道里区通达街138号
主权项：	1.一种基于甲烷氧化菌素功能化纳米金的铜离子检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）样品的预处理：向空白对照样品及待检测的样品中加入三氯乙酸，20min后以10000r/min的转速离心10min，取上清液，并向上清液中加NaOH至pH值为7，得到经过预处理的空白对照样品和待检测样品；其中对照样为不含铜离子的空白对照；（2）甲烷氧化菌素功能化纳米金的制备：取一定浓度的甲烷氧化菌素溶液，加入浓度为1×10-4~1×10-6mol/L氯金酸溶液，在一定温度的水浴条件下反应30~120min，得到甲烷氧化菌素功能化纳米金溶液；（3）取步骤（1）中经过预处理的空白对照样和经过预处理的待检测样品分别加入至步骤（2）中制备好的甲烷氧化菌素功能化纳米金溶液中，然后将对照样和待检测样品在室温下放置5~20min；（4）观察溶液的颜色变化并于对照样进行对比，若对照样品颜色无变化的同时待测样颜色变为蓝紫色，则证明待测液中含有铜离子。 2.根据权利要求1所述的基于甲烷氧化菌素功能化纳米金的铜离子检测方法，其特征在于，步骤（1）中三氯乙酸的加入量为待检测的样品体积的1/5。 3.根据权利要求1所述的基于甲烷氧化菌素功能化纳米金的铜离子检测方法，其特征在于，步骤（2）中甲烷氧化菌素与氯金酸的物质的量比为1:(1~10)，甲烷氧化菌素溶液与氯金酸溶液的体积比为1:1。 4.根据权利要求1所述的基于甲烷氧化菌素功能化纳米金的铜离子检测方法，其特征在于，步骤（2）中水浴温度为30~80℃。 5.根据权利要求1所述的基于甲烷氧化菌素功能化纳米金的铜离子检测方法，其特征在于，步骤（3）中待检测样品体积为甲烷氧化菌素功能化纳米金溶液体积的1/100；对照样品体积为甲烷氧化菌素功能化纳米金溶液体积的1/100。 6.根据权利要求1所述的基于甲烷氧化菌素功能化纳米金的铜离子检测方法，其特征在于，步骤（2）中甲烷氧化菌素溶液所用甲烷氧化菌素由以下方法制备得到：将1L甲烷氧化细菌发酵液在4℃条件下使用高速冷冻离心机以8000r/min的速度离心20min；取离心后的上清液使用活化的Diaion HP-20大孔径树脂进行动态吸附，分别用2倍柱体积的双蒸水除去未被吸附的杂质，再用60%甲醇洗脱吸附的甲烷氧化菌素，洗脱液经旋转蒸发除去甲醇后经真空冷冻干燥得白色粉末，即得甲烷氧化菌素。 7.根据权利要求1-6中任一项所述的基于甲烷氧化菌素功能化纳米金的铜离子检测方法，其特征在于，将步骤（4）中的步骤替换为：放置结束后使用紫外分光光度计进行400~700nm的波长扫描，若待检测样品与对照样品在波长为500~600nm的扫描图不能完全重合并且出现的吸收峰小于对照样品，则证明待测液中含有铜离子。 8.根据权利要求1-6中任一项所述的基于甲烷氧化菌素功能化纳米金的铜离子检测方法，其特征在于，将步骤（4）中的步骤替换为：放置结束后使用紫外分光光度计进行400~700nm的波长扫描，若待检测样品与对照样品在波长为600~700nm的扫描图出现的吸收峰大于对照样品并且出现新的吸收峰，则证明待测液中含有铜离子。 9.根据权利要求1-6中任一项所述的基于甲烷氧化菌素功能化纳米金的铜离子检测方法，其特征在于，将步骤（4）中的步骤替换为：放置结束后使用紫外分光光度计测定波长为520nm、654nm时的吸光度值，计算A654/A520的比值并与空白样品的比值进行比较，若两数值不同并且对照样品的比值大于待测样的比值，则证明待测液中含有铜离子。
所属类别：	发明专利