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原文传递使用MALDI-TOF质谱法的配体结合测定

专利名称：	使用MALDI-TOF质谱法的配体结合测定
摘要：	用于配体结合测定的设备，其包括将多个珠与目的样品进行孵育的培养箱，其中多个珠中的每一个珠都包含预定质量的标签和诱饵分子。冲洗器冲洗经孵育的珠，以便除去弱结合的分子同时保留强结合的分子。样品板加载器将经冲洗的珠加载到样品板中，使得多个珠中的相应珠都被加载到多个孔中的相应孔中。喷雾器将基质辅助激光解吸电离(MALDI)基质材料沉积在样品板的表面上，使得多个珠中的每一个珠都暴露于MALDI基质材料。MALDI‑TOF质谱仪接收样品板并对多个孔中的样品进行质谱分析。计算机执行分析质谱的算法。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	美国;US
申请人：	维尔京仪器公司
发明人：	M·L·韦斯塔
专利状态：	有效
申请日期：	2018-01-03T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-23T00:00:00+0800
申请号：	CN201880005874.2
公开号：	CN110168369A
代理机构：	中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
代理人：	韩威威
分类号：	G01N33/543(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	美国马萨诸塞
主权项：	1.一种用于配体结合测定的设备，所述设备包括： a)培养箱，其将多个珠与目的样品进行孵育，其中多个珠中的每一个珠都包含预定质量的标签和诱饵分子，所述孵育使诱饵分子结合到目的样品所包含的样品分子上； b)冲洗器，其冲洗经孵育的珠，以便除去弱结合的样品分子，同时保留强结合的样品分子； c)样品板，其配置用于加载到MALDI-TOF质谱仪中； d)样品板加载器，其将经孵育并冲洗的珠加载到样品板中，以便在样品板上形成单层珠； e)基质材料点样器，其将基质辅助激光解吸电离(MALDI)基质材料沉积到样品板的表面上，使得多个珠中的至少一些珠暴露于MALDI基质材料； f)基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱仪，其接收加载的样品板并对位于样品板上的珠进行飞行时间质谱分析，从而生成质谱；以及 g)计算机，其使用由MALDI-TOF质谱仪所生成的质谱执行算法以生成配体结合测定。 2.根据权利要求1所述的用于配体结合测定的设备，其中所述样品板界定多个孔，所述多个孔中每一个孔的尺寸都使得每个孔中仅能安置一个珠。 3.根据权利要求1所述的用于配体结合测定的设备，其中所述多个珠包括至少两组的多个珠，其中所述至少两组珠中的每一组都包含本组独特的质量标签和诱饵分子。 4.如权利要求1所述的用于配体结合测定的设备，其中所述多个珠中的每一个珠都包括固定有链霉抗生物素蛋白的琼脂糖珠。 5.如权利要求4所述的用于配体结合测定的设备，其中将所述质量标签分子和诱饵分子生物素化并与固定在琼脂糖珠上的链霉抗生物素蛋白相结合。 6.如权利要求1所述的用于配体结合测定的设备，其中所述质量标签分子和诱饵分子将生物素共价连接至肽、蛋白质或核酸中的至少一种上。 7.如权利要求1所述的用于配体结合测定的设备，其中所述多个珠中的至少一个珠的标称直径为34μm。 8.如权利要求1所述的用于配体结合测定的设备，其中所述多个珠中的至少一个珠包含生物素化的适配体。 9.如权利要求1所述的用于配体结合测定的设备，其中所述多个珠中的至少一个珠包含生物素化的肽。 10.如权利要求1所述的用于配体结合测定的设备，其中所述样品板包括微孔样品板。 11.如权利要求1所述的用于配体结合测定的设备，其中所述样品板加载器包括振动器。 12.如权利要求1所述的用于配体结合测定的设备，其中所述冲洗器包括微量离心机。 13.如权利要求1所述的用于配体结合测定的设备，其中所述基质材料点样器包括喷雾器。 14.一种用于产生配体结合测定的方法，所述方法包括： a)提供多个珠，其中所述多个珠中的每一个珠都包含预定质量的标签和诱饵分子； b)将所述的多个珠与目的样品进行孵育，所述孵育使诱饵分子结合到目的样品所包含的样品分子上； c)冲洗经孵育的珠，以便除去弱结合的样品分子，同时保留强结合的样品分子； d)用经孵育并冲洗的珠加载包括多个孔的样品板，使得多个珠中的相应珠都加载到多个孔中的相应孔中； e)将基质辅助激光解吸电离(MALDI)基质材料添加到加载的样品板的表面上，使得多个珠中的至少一些珠暴露于MALDI基质材料； f)在多个珠中的至少一些珠上进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析，从而生成质谱；以及 g)处理所生成的质谱以生成配体结合测定。 15.根据权利要求14所述的用于产生配体结合测定的方法，其中提供多个珠包括提供至少两组的多个珠，其中所述至少两组中的每一组都包含本组独特的质量标签和诱饵分子。 16.根据权利要求14所述的用于产生配体结合测定的方法，其中提供多个珠包括提供固定有链霉抗生物素蛋白的琼脂糖珠。 17.根据权利要求16所述的用于产生配体结合测定的方法，其中提供多个珠包括将固定在琼脂糖珠上的链霉抗生物素蛋白所结合的质量标签分子和诱饵分子生物素化。 18.根据权利要求14所述的用于产生配体结合测定的方法，其中所述质量标签分子和诱饵分子将生物素共价连接到肽、蛋白质或核酸中的至少一种上。 19.根据权利要求14所述的用于产生配体结合测定的方法，其中提供多个珠包括提供至少一些标称直径为34μm的珠。 20.根据权利要求14所述的用于产生配体结合测定的方法，其中提供多个珠包括提供至少一些包含生物素化适配体的珠。 21.根据权利要求14所述的用于产生配体结合测定的方法，其中提供多个珠包括提供至少一些包含生物素化肽的珠。 22.根据权利要求14所述的用于产生配体结合测定的方法，其中冲洗包括用TrispH7.3缓冲液进行冲洗。 23.根据权利要求14所述的用于产生配体结合测定的方法，其中进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析包括移动加载的样品板，同时光栅化电离激光束。 24.根据权利要求14所述的用于产生配体结合测定的方法，其中进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析包括以多重模式进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析。 25.根据权利要求14所述的用于产生配体结合测定的方法，其中处理所生成的质谱包括将所生成的质谱相加。 26.根据权利要求14所述的用于产生配体结合测定的方法，所述方法还包括干燥沉积在所述样品板表面上的MALDI基质材料，以断开所述质量标签分子、捕获物分子或诱饵分子中的至少一种。 27.根据权利要求14所述的用于产生配体结合测定的方法，所述方法还包括选择用于珠识别并有助于分析物信号平均的质量标签。
所属类别：	发明专利