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原文传递促红细胞生成素化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法

专利名称：	促红细胞生成素化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法
摘要：	本发明涉及一种促红细胞生成素化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法。所述试剂盒包括：链霉亲和素磁颗粒；化学发光标记物标记的EPO单克隆抗体；偶联标记物标记的EPO单克隆抗体。本发明的试剂盒以链霉亲和素磁颗粒作为固相载体，双抗体夹心原理进行检测，结合发光强度和灵敏度都较高的化学发光物质对EPO进行标记，采用过氧化氢化学发光体系，以双抗体夹心法实现对EPO的定量检测，该试剂盒选择吖啶酯为化学发光免疫分析系统的标记材料，该材料有激发态回到基态时产生的能量跃迁为直接化学发光，不需要酶的参与，节约时间及成本；采用链霉亲和素磁珠与生物素标记的类似物可以牢牢的结合在一起，减少非特异性吸附，提高测试样本的准确度，抗干扰能力强。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	吉林;22
申请人：	迪瑞医疗科技股份有限公司
发明人：	李磊;李冬梅;孙成艳;高威;何浩会
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-04T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-03T00:00:00+0800
申请号：	CN201910479870.4
公开号：	CN110196336A
代理机构：	长春众邦菁华知识产权代理有限公司
代理人：	周蕾
分类号：	G01N33/74(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	130103 吉林省长春市高新区宜居路3333号
主权项：	1.一种促红细胞生成素化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，包括：链霉亲和素磁颗粒；化学发光标记物标记的促红细胞生成素单克隆抗体；偶联标记物标记的促红细胞生成素单克隆抗体。 2.根据权利要求1所述的促红细胞生成素化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述链霉亲和素磁颗粒质量百分比为0.01％～1％。 3.根据权利要求2所述的促红细胞生成素化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述链霉亲和素磁颗粒的粒径是0.05～3μm。 4.根据权利要求1所述的促红细胞生成素化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物标记的促红细胞生成素单克隆抗体中促红细胞生成素单克隆抗体与化学发光标记物的摩尔比为1:1～1:20，化学发光标记物标记的促红细胞生成素单克隆抗体的浓度为≥0.1μg/mL。 5.根据权利要求4所述的促红细胞生成素化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、异鲁米诺或三联吡啶钌。 6.根据权利要求1所述的促红细胞生成素化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述偶联标记物标记的促红细胞生成素单克隆抗体中促红细胞生成素单克隆抗体与偶联标记物的摩尔比为1:1～1:20，偶联标记物标记的促红细胞生成素单克隆抗体的浓度为≥0.7μg/mL。 7.根据权利要求6所述的促红细胞生成素化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述偶联标记物为生物素。 8.根据权利要求1所述的促红细胞生成素化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，还包括化学发光底物液，所述化学发光底物液包括A液和B液；所述A液为过氧化氢和硝酸溶液，B液为氢氧化钠溶液。 9.根据权利要求1所述的促红细胞生成素化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，还包括促红细胞生成素校准品；所述校准品是将促红细胞生成素纯品用标准品稀释液配制成浓度分别为0.00mIU/mL、5mIU/mL、10mIU/mL、50mIU/mL、100mIU/mL和200mIU/mL的促红细胞生成素标准溶液。 10.一种权利要求1-7任意一项所述的促红细胞生成素化学发光免疫检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：链霉亲和素磁颗粒的制备将链霉亲和素磁颗粒溶液和TBST溶液混匀后，放置在磁分离器上，直至上清液无混浊，弃上清，留取磁颗粒，清洗后在缓冲液中配成固相试剂；步骤二：化学发光标记物标记的促红细胞生成素单克隆抗体的制备将促红细胞生成素单克隆抗体放入离心管中离心，然后加入碳酸缓冲液，混匀后加入化学发光标记物溶液离心，将离心管密封后放入避光暗盒中，然后将暗盒放入气浴恒温振荡器中混匀，加入封闭液，放入气浴恒温振荡器中混匀，将封闭好的抗体经过纯化、收集，然后放入缓冲液中稀释，保存；步骤三：偶联标记物标记的促红细胞生成素单克隆抗体的制备将促红细胞生成素单克隆抗体放入离心管中离心，然后加入TRIS缓冲液，混匀后加入偶联标记物溶液离心，反应后加入赖氨酸继续反应，最后将反应液用脱盐柱纯化、收集后放入缓冲液中稀释，保存。
所属类别：	发明专利