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原文传递基于电化学传感器快速检测自由基的方法

专利名称：	基于电化学传感器快速检测自由基的方法
摘要：	本发明公开了一种基于电化学传感器快速检测自由基的方法，包括以下步骤：步骤一，制备羧基化g‑C3N4纳米粒子；步骤二，构建电化学传感器，制得ssDNA/carboxylated‑g‑C3N4NPs/CS电极；步骤三，建立检测·OH自由基的标准曲线，配制不同浓度的·OH自由基溶液，其中将ssDNA/carboxylated‑g‑C3N4NPs/CS电极为工作电极，用亚甲基蓝作为信号分子；步骤四，提取肉品中的·OH自由基，利用ssDNA/carboxylated‑g‑C3N4NPs/CS电极对其进行检测。本发明方法快捷，灵敏度高，选择性好，有效地检测羟基自由基的浓度。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏省农业科学院
发明人：	孙冲;王道营;张牧焓;徐为民;邹烨;李鹏鹏
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-04T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-23T00:00:00+0800
申请号：	CN201910599998.4
公开号：	CN110161094A
代理机构：	北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	史霞
分类号：	G01N27/26(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	210014 江苏省南京市玄武区孝陵卫钟灵街50号
主权项：	1.基于电化学传感器快速检测自由基的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，制备羧基化g-C3N4纳米粒子，将三聚氰胺与NaCl和KCl研磨成粉末后煅烧4h，制得盐熔块；所述盐熔块经过研磨、去盐，离心以及透析后，将制得的溶液冻干备用；步骤二，构建电化学传感器，将所述步骤一制备的羧基化g-C3N4纳米粒子和壳聚糖固定在玻碳电极上制得羧基化g-C3N4 NPs/CS电极，之后将ssDNA修饰在羧基化g-C3N4NPs/CS电极上，制得ssDNA/carboxylated-g-C3N4 NPs/CS电极；步骤三，建立检测·OH自由基的标准曲线，配制不同浓度的·OH自由基溶液，其中将ssDNA/carboxylated-g-C3N4 NPs/CS电极为工作电极，用亚甲基蓝作为信号分子；步骤四，提取肉品中的·OH自由基，利用ssDNA/carboxylated-g-C3N4 NPs/CS电极对其进行检测。 2.如权利要求1所述的基于电化学传感器快速检测自由基的方法，其特征在于，所述步骤二中构建电化学传感器的具体步骤为： 1)玻碳电极前处理；将玻碳电极依次用0.3μm和0.05μm的氧化铝粉末抛光至镜面，然后用无水乙醇和超纯水依次超声30s，并在室温下用纯氮气吹干； 2)制备羧基化g-C3N4 NPs/CS电极；取3mg/mL的羧基化g-C3N4纳米粒子溶液5μL滴到电极上，室温下自然晾干后，滴加5μL的1％壳聚糖溶液到电极上，室温下自然晾干，使羧基化g-C3N4 NPs固定在电极表面； 3)制备ssDNA/g-C3N4 NPs/CS电极；先用EDC/NHS溶液处理carboxylated-g-C3N4NPs/CS电极，活化羧基，然后，将carboxylated-g-C3N4 NPs/CS电极用4μM的ssDNA溶液5μL处理40min后，用超纯水冲洗掉未结合的ssDNA，电极在室温下自然晾干后可得ssDNA/carboxylated-g-C3N4 NPs/CS电极。 3.如权利要求1所述的基于电化学传感器快速检测自由基的方法，其特征在于，所述步骤三中所述标准溶液的配制方法为：利用芬顿反应产生·OH自由基，其中硫酸亚铁与过氧化氢的摩尔浓度比为1:6，pH为3.5；用新制的硫酸亚铁与新制的过氧化氢配置不同浓度的·OH自由基溶液。 4.如权利要求1所述的基于电化学传感器快速检测自由基的方法，其特征在于，所述步骤一中所述羧基化g-C3N4纳米粒子的制备步骤具体为：按比例称取三聚氰胺、NaCl和KCl混合研磨均匀后，将粉末置于马弗炉中670℃煅烧4h，升温速率为10℃/min；冷却至室温后，可得亮黄色的盐熔块；之后将盐熔块研磨成均一的粉末，然后用稀盐酸除去产物中的盐，离心，将产物重新分散到超纯水中再次离心，除去大的氮化碳颗粒；收集上清液，用分子量为500的透析袋在超纯水中透析以除去残余的Na+，K+，Cl-；最后，将透析后的溶液冻干，可得羧基化g-C3N4纳米粒子。 5.如权利要求4所述的基于电化学传感器快速检测自由基的方法，其特征在于，三聚氰胺、NaCl和KCl的比例为4:1:1.2-1.3。 6.如权利要求1所述的基于电化学传感器快速检测自由基的方法，其特征在于，所述步骤三和步骤四中，利用方波伏安法对不同浓度的·OH自由基溶液和待检测溶液进行检测。
所属类别：	发明专利