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原文传递基于血清的布鲁氏菌感染快速检测方法

专利名称：	基于血清的布鲁氏菌感染快速检测方法
摘要：	本发明提供了基于血清的布鲁氏菌感染快速检测方法，涉及蛋白质谱检测技术领域。本发明根据布鲁氏菌感染血清和健康人血清的质谱数据，通过ClinProTools软件的SVM模型算法构建感染布鲁氏菌血清的标准检测模型，并获得了用于鉴别布鲁氏菌感染血清的特征蛋白组合，所构建模型的识别能力为99.15%，交叉验证值为96.04%。利用标准检测模型对待测血清的MALDI‑TOF MS质谱数据进行分类分析，可准确判断待检测血清是否为布鲁氏菌感染。本发明方法适于布鲁氏菌感染人群的血清检测，准确度高、重复性好，通量高，检测成本低廉，结果可靠，具有良好的应用前景。
专利类型：	发明专利
申请人：	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
发明人：	肖迪;姜海;张慧芳;张炳华;王磊;杨文涛;李天一;赵飞
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T09:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T14:00:00+0805
申请号：	CN202010156263.7
公开号：	CN111007139A
代理机构：	北京路浩知识产权代理有限公司
代理人：	陈征
分类号：	G01N27/62;G16B5/00;G16B50/00;G;G01;G16;G01N;G16B;G01N27;G16B5;G16B50;G01N27/62;G16B5/00;G16B50/00
申请人地址：	102206 北京市昌平区昌百路155号
主权项：	1.一种检测感染布鲁氏菌（Brucella）血清的特征蛋白组合，其特征在于，所述特征蛋白组合中每个特征蛋白的质荷比m/z分别为：2069.35、2081.28、2932.93、3095.84、4466.26、6631.4、7644.8、8930.09、9514.58、9578.16。 2.权利要求1所述的特征蛋白组合在构建检测布鲁氏菌（Brucella）感染血清的试剂盒或检测模型中的应用。 3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，利用ClinProTools软件的SVM模型算法进行构建。 4.一种检测感染布鲁氏菌（Brucella）血清的标准检测模型，其特征在于，通过以下方法构建得到：（1）将具有统计学意义数量的布鲁氏菌抗体阴性的人血清样本、布鲁氏菌感染抗体阳性的人血清样本经富集蛋白处理后，采集血清样本的MALDI-TOF MS质谱数据形成两组数据；（2）利用ClinProTools软件，按软件使用要求编辑参数，将步骤（1）中获得的两组质谱数据调入，进行峰统计分析；（3）选择模型算法，构建得到标准检测模型，并确定10个特征蛋白，每个特征蛋白的质荷比m/z分别为：2069.35、2081.28、2932.93、3095.84、4466.26、6631.4、7644.8、8930.09、9514.58、9578.16。 5.根据权利要求4所述的标准检测模型，其特征在于，所述模型算法为SVM模型，算法参数选择：模型中峰数目设为在1-25范围内自动选择，最邻近分类数选择1-7进行优化。 6.权利要求4或5所述的标准检测模型在构建布鲁氏菌感染血清检测系统中的应用。 7.一种布鲁氏菌感染的血清检测系统，其特征在于，所述检测系统的工作程序包括以下步骤：（1）前处理待检测血清样本，以富集血清中的蛋白；（2）前处理后的血清样本点到质谱仪样本靶上，自然干燥后在样本上覆盖基质饱和溶液；（3）采用质谱仪采集数据，每个样本平行采集两张原始谱图数据；（4）采用ClinProTools软件调用权利要求4或5所述标准检测模型，对步骤（3）获得的全部待测血清样本的原始数据进行检索分类，确定检测的血清样本是来源于健康人还是布鲁氏菌感染者。 8.根据权利要求7所述的血清检测系统，其特征在于，步骤（3）中，采集的数据强度叠加至少为1.0×104。 9.根据权利要求7或8所述的血清检测系统，其特征在于，所述质谱仪为MALDI-TOF 质谱仪，氮激光器波长377nm, 质量采集范围1000至20000Da，源1电压, 20 kV, 源2电压,18.5 kV, 透镜电压, 8.45 kV；延时提取, 320 ns；激光频率20Hz，调整总采集频次使谱图总强度大于10000；采用大肠杆菌ATCC8739质控校正仪器，使质量偏差小于300ppm。
所属类别：	发明专利