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原文传递一种化妆品中过敏原检测方法

专利名称：	一种化妆品中过敏原检测方法
摘要：	本发明提供了一种化妆品中过敏原检测法，包括：甲醇和2g/L抗坏血酸水溶液的混合溶液配置56种过敏原物质的混合标准品溶液，其中丁香酚和异丁香酚等7组同分异构体单独配制单标溶液，在静电场轨道阱高分辨质谱的正负离子一级质谱全扫描加数据依赖的二级质谱扫描方式下进行质谱分析，采集一级母离子精确质量数、保留时间和二级碎片离子信息建立高分辨质谱数据库；将待测样品采用甲醇和2g/L抗坏血酸水溶液的混合溶液提取，进行质谱分析，利用数据库采用Tracefinder软件建立筛查和定量分析方法，对样品中的过敏原物质进行检测。本发明方法快捷、灵敏度高、特异性好。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	青岛农业大学
发明人：	李兆杰;鞠玲燕;高飞;徐成钢;刘玉敏;魏玮
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-10T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-27T00:00:00+0800
申请号：	CN201910495828.1
公开号：	CN110174488A
代理机构：	威海科星专利事务所
代理人：	于涛
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	266109 山东省青岛市城阳区长城路
主权项：	1.一种化妆品中过敏原检测法，其特征在于包括如下步骤： (1)建立过敏原数据库； (2)待测样品的处理； (3)检测：采用超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱进行检测，所述超高效色谱条件为：色谱柱：ZORBAX Eclipse Plus C18；流动相A为甲醇，流动相B为5mmol/L的乙酸铵水溶液，梯度洗脱程序；所述质谱的条件为：电喷雾离子源；正负离子扫描；离子源温度：350℃；喷雾电压：正离子模式3.5kV，负离子模式3.0kV；所述过敏原为香料类过敏原、防腐剂类过敏原、染发成分类过敏原。 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征是所述香料类过敏原为苎烯、苯甲醇、芳樟醇、香茅醇、香叶醇、羟基香茅醛、丁香酚、异丁香酚、α-异甲基紫罗兰酮、铃兰醛、新铃兰醛、已基肉桂醛、苯甲酸苄酯、水杨酸苄酯、肉桂酸苄酯、戊基肉桂醛、肉桂醇柠檬醛、肉桂醛、香豆素。 3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征是所述防腐剂类过敏原为甲基异噻唑啉酮、甲基氯异噻唑啉酮、重氮烷基脲、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸丁酯、水杨酸、苯甲酸、山梨酸。 4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征是所述染发成分类过敏原为间苯二酚、甲苯-2，5-二胺硫酸盐、对苯二胺、对氨基苯酚、间氨基苯酚、2-氨基-3羟基吡啶、4-氯间苯二酚、4-氨基-2-羟基甲苯、2，4-二氨基苯氧基乙醇盐酸盐、N，N-双(2-羟乙基)对苯二胺硫酸盐、2-氯对苯二胺硫酸盐、2-甲基间苯二酚、6-氨基间甲酚、苯基甲基吡唑啉酮、4-氨基-3-硝基苯酚、4-氨基间甲酚、对甲基氨基苯酚硫酸盐、4-硝基邻苯二胺、2，6-二氨基吡啶、6-羟基吲哚、2，7-萘二酚、N-苯基对苯二胺、1，5-萘二酚或1-萘酚。 5.根据权利要求1-4任一项所述的检测方法，其特征是所述步骤(1)用甲醇和2g/L抗坏血酸水溶液，1：1，v/v，配置过敏原物质的混合标准品溶液，同分异构体单独配置单标溶液，采用正负离子切换FullMS/ddMS2扫描方式分析，获得多种过敏原物质的保留时间、一级母离子和二级碎片离子精确质量数，构建过敏原物质数据库。 6.根据权利要求1-4任一项所述的检测方法，其特征是所述步骤(2)具体为准确称取待测样品0.25g至50mL离心管中，加入25mL甲醇和2g/L抗坏血酸水溶液，1∶1，v/v，涡旋1min，超声提取15min，10000r/min离心5min，移取上清液过0.22μm微孔滤膜，上机检测；蜡质含量较高、油包水类样品先加入5mL正己烷分散均匀后，再涡旋超声提取。 7.根据权利要求1-4任一项所述的检测方法，其特征是液相色谱流速：0.3mL/min；柱温：30℃；梯度洗脱条件：0～1min10％A，2～6min10％～50％A，6～8min50％～60％A，8～16min60％A，16～18min60％～10％A，18～20min10％～90％A，20～26min90％A，26～29min90％～10％A，29～30min10％A。 8.根据权利要求1-4任一项所述的检测方法，其特征是质谱的母离子、二级碎片离子参数如下： 9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征是还包括定性筛查方法的建立：利用TraceFinder软件将(1)中建立的数据库导入后，设置筛查参数，包括保留时间偏差设为30s、母离子精确质量数质量偏差阈值设为5ppm、碎片离子精确质量数质量偏差阈值设为10ppm，建立定性筛查方法，将样品通过高分辨质谱分析获得的信息与谱库相关信息匹配。 10.根据权利要求1所述的检测方法，其特征是还包括定量分析方法的建立：以一级母离子作为定量离子，建立定量分析方法，以外标法定量。
所属类别：	发明专利