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原文传递一种快速检测小分子化合物的方法

专利名称：	一种快速检测小分子化合物的方法
摘要：	本发明提供了一种快速检测小分子化合物的方法，包括以下步骤：明确待测样品内的目标化合物，选取与待测样品相兼容的基质，以及与目标化合物结构一致且含有稳定同位素标记的标准品，将基质和标准品配制为乙腈水溶液后与待测样品混合，得进样混合液，采用具有MRM功能的MALDI‑MS质谱仪对待测样品依次进行一级扫描和二级扫描，得到二级图谱，在二级图谱的基础上进行数据处理和分析，即可对目标化合物进行定性定量分析。本发明无需开发应用不受限且适合小分子的基质，也避开了衍生化的繁琐步骤，快速、准确、成本低、普适性高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	天津;12
申请人：	中国科学院天津工业生物技术研究所
发明人：	张志丹
专利状态：	有效
申请日期：	2018-03-09T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201810196478.4
公开号：	CN110243917A
代理机构：	北京市万慧达律师事务所
代理人：	段晓玲
分类号：	G01N27/62(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	300308 天津市滨海新区空港经济区西七道32号
主权项：	1.一种快速检测小分子化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)明确待测样品内的目标化合物，选取基质与标准品；所述基质与所述待测样品相兼容即可；所述标准品化学结构与所述目标化合物结构一致，且含有稳定同位素标记； (2)将所述基质配置为基质乙腈水溶液；将所述标准品配置为标准品乙腈水溶液，得内标溶液；将所述基质乙腈水溶液和所述内标溶液按比例与所述待测样品进行混合，得进样混合液； (3)采用MALDI-MS质谱仪对所述进样混合液内的目标化合物进行检测；其中所述MALDI-MS质谱仪具有MRM功能，所述MRM功能用于对选定的所述目标化合物进行质谱信号的采集，并获得二级碎片信息； (4)对所述二级碎片信息进行数据处理，获取所述待测样品内目标化合物的浓度。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述稳定同位素标记为13C标记、15N标记、氘标记或氚标记。 3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述基质为有机基质和/或无机基质，所述有机基质包括CHCA、DHB、SA、9-AA、1,5-DAN，所述无机基质包括石墨烯、纳米材料、介孔材料。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述基质为1,5-DAN，步骤(2)中所述基质乙腈水溶液和所述内标溶液均为50％的乙腈水溶液。 5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述基质乙腈水溶液以及所述内标溶液的浓度均为10mg/mL，所述基质乙腈水溶液、所述内标溶液与所述待测样品的体积比为10：1：1。 6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述二级碎片数据的采集方法为： a、先设定一级参数，根据所述目标化合物选定具有特征性的母离子； b、再设定二级参数，将所述具有特征性的母离子进行碰撞诱导，得到二级谱图以及各子离子峰的质谱信号。 7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中所述数据处理为通过所述二级碎片信息调出具有同一特征子离子的目标化合物的碎片峰以及被稳定同位素标记的目标化合物的碎片峰，并根据公式计算目标化合物的相对定量信息。 8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述公式为：其中，C内标为内标溶液的浓度； X为二级谱图中特征子离子双峰中非标化合物特征子离子峰的intensity值； Y为二级谱图中特征子离子双峰中内标化合物特征子离子峰的intensity值； e为根据化合物结构式计算得到的非标化合物特征离子峰与其天然存在的同位素峰的相对丰度，为一常数； f为内标溶液中可能产生的与非标化合物特征离子峰分子量相同的子离子与内标化合物特征离子峰的相对丰度，为一常数，由实验测得，也可为0。 9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述进样混合液通过自动液体处理设备或手动点到所述MALDI-MS质谱仪的样品靶上，得样品点，所述样品点的个数为多个，步骤(4)中所述数据处理为对每一个所述样品点的二级碎片信息进行处理，获取平均值。
所属类别：	发明专利