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原文传递一种测定腐胺的电化学生物传感器工作电极的制备方法及其应用

专利名称：	一种测定腐胺的电化学生物传感器工作电极的制备方法及其应用
摘要：	本发明涉及电分析化学技术领域，具体公开了一种测定腐胺的电化学生物传感器工作电极的制备方法及其应用。所述的电化学生物传感器工作电极的制备方法，包含如下步骤：(1)将粘土分散液均匀滴涂于玻碳电极表面，晾干后制得Clay/GCE；(2)将Clay/GCE置于变性Hb溶液中，于3～5℃冰箱静置吸附0.5～1.5h，使变性Hb固定在电极表面，吸附完成后以超纯水淋洗电极，晾干后得到uHb/Clay/GCE；(3)将GLU溶液均匀滴涂于uHb/Clay/GCE上，然后立即在其表面再滴涂DAO溶液，晾干后得到DAO‑GLU/uHb/Clay/GCE，即所述的测定腐胺的电化学生物传感器工作电极。该电化学生物传感器工作电极具有良好的重现性和稳定性，且灵敏度高，适用于猪肉等样品中腐胺的检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	仲恺农业工程学院
发明人：	赵晓娟;杨春婷;张敏;白卫东;曾晓房
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-03T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-13T00:00:00+0800
申请号：	CN201910595302.0
公开号：	CN110231387A
代理机构：	佛山帮专知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	颜春艳
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	510225 广东省广州市海珠区东纺织路东沙街24号
主权项：	1.一种测定腐胺的电化学生物传感器工作电极的制备方法，其特征在于，包含如下步骤： (1)将粘土分散液均匀滴涂于玻碳电极表面，晾干后制得Clay/GCE； (2)将Clay/GCE置于变性Hb溶液中，于3～5℃冰箱静置吸附0.5～1.5h，使变性Hb固定在电极表面，吸附完成后以超纯水淋洗电极，晾干后得到uHb/Clay/GCE； (3)将GLU溶液均匀滴涂于uHb/Clay/GCE上，然后立即在其表面再滴涂DAO溶液，晾干后得到DAO-GLU/uHb/Clay/GCE，即所述的测定腐胺的电化学生物传感器工作电极。 2.根据权利要求1所述的测定腐胺的电化学生物传感器工作电极的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的粘土分散液的用量为5μL；所述的粘土分散液的浓度为1mg/mL。 3.根据权利要求2所述的测定腐胺的电化学生物传感器工作电极的制备方法，其特征在于，所述的粘土分散液通过如下方法制备得到：准确称取粘土溶于超纯水中，超声分散均匀后于4℃冰箱过夜膨胀得1mg/mL的粘土分散液。 4.根据权利要求1所述的测定腐胺的电化学生物传感器工作电极的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的变性Hb(uHb)溶液通过如下方法制备得到：准确称取一定质量的尿素，溶于PBS溶液中，配制成浓度为3mol/L的尿素溶液，接着称取Hb溶于3mol/L尿素溶液配制浓度为63μmol/L的变性Hb溶液；再将配制好的变性Hb溶液在3～5℃冰箱中储存20～24h以达到变性平衡。 5.根据权利要求4所述的测定腐胺的电化学生物传感器工作电极的制备方法，其特征在于，所述的PBS溶液是pH为2.0，浓度为0.1mol/L的PBS溶液。 6.根据权利要求1所述的测定腐胺的电化学生物传感器工作电极的制备方法，其特征在于，步骤(2)中将2μL GLU溶液均匀滴涂于uHb/Clay/GCE上，然后立即在其表面再滴涂5μLDAO溶液，晾干后得到DAO-GLU/uHb/Clay/GCE。 7.根据权利要求6所述的测定腐胺的电化学生物传感器工作电极的制备方法，其特征在于，所述的GLU溶液为质量分数为2.5％的GLU水溶液。 8.根据权利要求6所述的测定腐胺的电化学生物传感器工作电极的制备方法，其特征在于，所述的DAO溶液通过如下方法制备得到：准确称取DAO溶于pH值为7.0、浓度为0.1mol/L的PBS溶液中，配制成浓度为90mg/mL的DAO溶液。 9.权利要求1～8任一项所述制备方法制备得到的测定腐胺的电化学生物传感器工作电极在测定食品中腐胺的应用。 10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，具体包含如下步骤：电化学工作站连接步骤：工作电极选用权利要求1～8任一项所述制备方法制备得到的测定腐胺的电化学生物传感器工作电极、参比电极选用Ag/AgCl(饱和KCl溶液)电极，辅助电极选用铂丝电极，将三电极体系连接至电化学工作站；样品前处理步骤：将待测样品进行前处理制备得到待测样品溶液；含量测定步骤：采用方波伏安法测定待测样品溶液的还原峰电流差值，根据线性方程换算出待测样品溶液中腐胺的浓度，进而得出样品中腐胺的含量；在1.0×10-11～1.0×10-10mol/L时，线性方程为：ΔI＝3.9475C+1.6957(r＝0.997,n＝5)；在1.0×10-10～1.0×10-9mol/L时，线性方程为：ΔI＝0.2956C+2.1278(r＝0.998,n＝4)；方程中C为腐胺的浓度，单位为nmol/L；ΔI＝I腐胺－IPBS为还原峰电流差值，单位为μA；所述的方波伏安法的检测条件为：电位窗口为(0.2V)～(-0.8V)，电位增量4mV/s，方波振幅25mV，方波频率15Hz。
所属类别：	发明专利