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原文传递评估患者样品中GFAP状态的改进方法

专利名称：	评估患者样品中GFAP状态的改进方法
摘要：	本文公开了评估受试者的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)状态的改进方法(例如用作创伤性脑损伤的度量或用于其它临床原因)。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	美国;US
申请人：	雅培实验室
发明人：	S·德特维勒;B·麦奎斯顿;E·布拉特;J·莱普;D·帕森缇
专利状态：	有效
申请日期：	2017-10-02T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201780061647.7
公开号：	CN110249226A
代理机构：	北京市中伦律师事务所
代理人：	杨黎峰;钟锦舜
分类号：	G01N33/573(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	美国伊利诺伊州
主权项：	1.一种评估受试者的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)状态的方法，所述方法包括以下步骤：检测来自所述受试者的生物样品中的至少一种生物标志物，其中所述生物标志物中的至少一种是GFAP，并且其中所述方法(i)可用于确定其量低于或等于50,000pg/mL的GFAP水平；(ii)具有5log的动态范围；并且(iii)在所述动态范围内是线性的。 2.一种评估受试者的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)状态的方法，所述方法包括以下步骤： a)使来自所述受试者的生物样品同时或以任意顺序依次与至少一种第一特异性结合成员和至少一种第二特异性结合成员接触，其中所述第一特异性结合成员和所述第二特异性结合成员各自特异性结合GFAP，从而产生包含所述第一特异性结合成员-GFAP-第二特异性结合成员的一种或多种第一复合物； b)检测所述样品中存在的所述一种或多种第一复合物中的GFAP，其中所述方法： (i)可用于确定少于或等于50,000pg/mL GFAP的水平，并且不需要稀释所述生物样品；或者 (ii)可用于确定其量低于或等于50,000pg/mL的GFAP水平，并且其中所述方法具有5log的动态范围，并且在所述动态范围内是线性的，或者 (iii)能够在约5pg/mL至约50,000pg/mL的动态范围内定量所述GFAP水平，其中精度小于10％CV，并且在所述动态范围内实现线性偏差(DL)小于10％。 3.一种评估受试者的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)状态的方法，所述方法包括以下步骤： a)使来自所述受试者的生物样品同时或以任意顺序依次与至少一种第一特异性结合成员和至少一种第二特异性结合成员接触，其中所述第一特异性结合成员和所述第二特异性结合成员各自特异性结合GFAP，从而产生包含所述第一特异性结合成员-GFAP-第二特异性结合成员的一种或多种第一复合物，其中所述第一特异性结合成员或第二特异性结合成员包含可检测标记；以及 b)评估来自所述一种或多种第一复合物的信号，其中所述可检测标记中可检测信号的量表明所述样品中GFAP的存在量，其中所述方法： (i)可用于确定少于或等于50,000pg/mL GFAP的水平，并且不需要稀释所述生物样品；或者 (ii)可用于确定其量低于或等于50,000pg/mL的GFAP水平，并且其中所述方法具有5log的动态范围，并且在所述动态范围内是线性的，或者 (iii)能够在约5pg/mL至约50,000pg/mL的动态范围内定量GFAP水平，其中精度小于10％CV，并且在所述动态范围内实现线性偏差(DL)小于10％。 4.一种测量来自受试者的生物样品中GFAP的方法，所述方法包括 (a)从所述受试者获得生物样品； (b)使所述生物样品同时或以任意顺序依次与以下物质接触： (1)至少一种捕获抗体，其与GFAP或GFAP片段上的表位结合以形成捕获抗体-GFAP抗原复合物；(2)至少一种第一检测抗体，其包含可检测标记并与GFAP上未被所述捕获抗体结合的表位结合以形成至少一种捕获抗体-GFAP抗原-至少一种第一检测抗体复合物；以及 (c)根据所述至少一种捕获抗体-GFAP抗原-至少一种第一检测抗体复合物中由所述可检测标记生成的信号，确定所述生物样品中GFAP的量或浓度，其中所述方法： (i)可用于确定其量低于或等于50,000pg/mL的GFAP水平，并且其中所述方法具有5log的动态范围，并且在所述动态范围内是线性的；或者 (ii)能够在约5pg/mL至约50,000pg/mL的动态范围内定量GFAP水平，其中精度小于10％CV，并且在所述动态范围内实现线性偏差(DL)小于10％。 5.根据权利要求1或2所述的方法，其中通过免疫测定或单分子检测测定来检测GFAP。 6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述方法可用于确定选自由以下组成的组中的GFAP水平：～10pg/mL-～50,000pg/mL、～20pg/mL-～50,000pg/mL、～25pg/mL-～50,000pg/mL、～30pg/mL-～50,000pg/mL、～40pg/mL-～50,000pg/mL、～50pg/mL-～50,000pg/mL、～60pg/mL-～50,000pg/mL、～70pg/mL-～50,000pg/mL、～75pg/mL-～50,000pg/mL、～80pg/mL-～50,000pg/mL、～90pg/mL-～50,000pg/mL、～100pg/mL-～50,000pg/mL、～125pg/mL-～50,000pg/mL、～150pg/mL-～50,000pg/mL。 7.根据权利要求2或3所述的方法，其中任何不包含所述可检测标记的所述第一特异性结合成员或第二特异性结合成员固定在实心载体上。 8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述方法使用床旁设备执行。 9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中GFAP与一种或多种其它生物标志物一起评估。 10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述方法检测选自由以下组成的组中的GFAP水平：～10pg/mL-～50,000pg/mL、～35pg/mL-～50,000pg/mL、～100pg/mL-～50,000pg/mL、～125pg/mL-～50,000pg/mL、～150pg/mL-～15,000pg/mL、～175pg/mL-～10,000pg/mL。 11.根据权利要求2-10中任一项所述的方法，其中所述接触是同时进行的。 12.根据权利要求2-10中任一项所述的方法，其中所述接触是依次进行的。 13.根据权利要求4-12中任一项所述的方法，其中所述至少一种捕获抗体固定在实心载体上。 14.根据权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述方法在约5分钟至约20分钟内执行。 15.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中所述方法在约15分钟内执行。 16.根据权利要求1-15中任一项所述的方法，其中所述生物样品选自由全血样品、血清样品、脑脊髓液样品和血浆样品组成的组。 17.根据权利要求1-16中任一项所述的方法，其中所述方法用于确认发生创伤性脑损伤或不存在创伤性脑损伤。 18.根据权利要求17所述的方法，其中所述创伤性脑损伤是轻度创伤性脑损伤。 19.根据权利要求1、2、3、5-12或14-18中任一项所述的方法，其中通过在单个时间点测量GFAP的水平或量来评估状态。 20.根据权利要求1、2、3、5-12或14-18中任一项所述的方法，其中通过在监视下完成测量GFAP的水平或量来评估状态。 21.根据权利要求1-20中任一项所述的方法，其中所述方法可在任何受试者上施行，而不考虑选自由以下组成的组中的因素：所述受试者的临床状况，所述受试者的实验室值，所述受试者被分类为轻度、中度或重度TBI，所述受试者的GFAP表现为低或高水平，以及其中所述受试者可能已经收受到头部损伤的任何事件的时间。 22.根据权利要求1-21中任一项所述的方法，其中所述方法使用小于20微升体积的所述生物样品进行。 23.根据权利要求1、4-6或8-22中任一项所述的方法，其中所述生物样品不需要稀释。 24.根据权利要求1-23中任一项所述的方法，其中所述方法具有10pg/mL的下端检测限(LoD)。 25.根据权利要求1-23中任一项所述的方法，其中所述方法具有20pg/mL的下端检测限(LoD)。 26.根据权利要求1-25中任一项所述的方法，其中所述方法提供扩展的检测窗口。 27.根据权利要求2、3或7所述的方法，其中所述一种第一GFAP特异性结合成员固定在实心载体上。 28.根据权利要求2、3或7所述的方法，其中至少一种第二GFAP特异性结合成员固定在实心载体上。 29.根据权利要求2、3或7所述的方法，其中所述至少一种第一GFAP特异性结合成员和至少一种第二GFAP特异性结合成员是单特异性抗体。 30.根据权利要求16所述的方法，其中所述生物样品被稀释或未被稀释。
所属类别：	发明专利