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原文传递评估患者样品中UCH-L1状态的改进方法

专利名称：	评估患者样品中UCH-L1状态的改进方法
摘要：	本文公开了评估受试者的泛素羧基末端水解酶L1(UCH‑L1)状态的改进方法(例如用作创伤性脑损伤的量度或用于其它临床原因)。本文还公开了评估受试者中受试者的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和UCH‑L1状态的方法(例如用作创伤性脑损伤的量度或用于其它临床原因)。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	美国;US
申请人：	雅培实验室
发明人：	S·德特维勒;B·麦奎斯顿;G·博利格尔;E·布拉特;J·莱普;D·帕森缇
专利状态：	有效
申请日期：	2017-10-02T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-25T00:00:00+0800
申请号：	CN201780061590.0
公开号：	CN110383068A
代理机构：	北京市中伦律师事务所
代理人：	杨黎峰;钟锦舜
分类号：	G01N33/573(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	美国伊利诺伊州
主权项：	1.一种评估受试者的泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)状态的方法，所述方法包括以下步骤：在来自所述受试者的生物样品中检测至少一种生物标志物，其中所述生物标志物中的至少一种是UCH-L1，并且其中所述方法(i)可用于确定其量小于或等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，(ii)具有5log的动态范围，并且(iii)在所述动态范围内是线性的。 2.一种评估受试者的泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)状态的方法，所述方法包括以下步骤： a)使来自所述受试者的生物样品同时或以任意顺序依次接触至少一种第一特异性结合成员和至少一种第二特异性结合成员，其中所述第一特异性结合成员和所述第二特异性结合成员各自特异性结合UCH-L1，从而产生包含所述第一特异性结合成员-UCH-L1-第二特异性结合成员的一种或多种第一复合物；以及 b)检测所述样品中存在的所述一种或多种第一复合物中的UCH-L1，其中所述方法： (i)可用于确定小于或等于25,000pg/mL UCH-L1的水平，并且不需要稀释所述生物样品；或者 (ii)可用于确定其量小于或等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，并且其中所述方法具有5log的动态范围，并且在所述动态范围内是线性的，或者 (iii)能够在约5pg/mL至约25,000pg/mL的动态范围内定量所述UCH-L1水平，其中精确度小于10％CV，并且在所述动态范围内实现线性偏差(DL)小于10％。 3.一种评估受试者的泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)状态的方法，所述方法包括以下步骤： a)使来自所述受试者的生物样品同时或以任意顺序依次接触至少一种第一特异性结合成员和至少一种第二特异性结合成员，其中所述第一特异性结合成员和所述第二特异性结合成员各自特异性结合UCH-L1，从而产生包含所述第一特异性结合成员-UCH-L1-第二特异性结合成员的一种或多种第一复合物，其中所述第一特异性结合成员或第二特异性结合成员包含可检测标记；以及 b)评估来自所述一种或多种第一复合物的信号，其中来自所述可检测标记的可检测信号的量指示所述样品中UCH-L1的存在量，其中所述方法： (i)可用于确定小于或等于25,000pg/mL UCH-L1的水平，并且不需要稀释所述生物样品；或者 (ii)可用于确定其量小于或等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，并且其中所述方法具有5log的动态范围，并且在所述动态范围内是线性的，或者 (iii)能够在约5pg/mL至约25,000pg/mL的动态范围内定量所述UCH-L1水平，其中精确度小于10％CV，并且在所述动态范围内实现线性偏差(DL)小于10％。 4.一种评估来自受试者的生物样品中UCH-L1的方法，所述方法包括： (a)从所述受试者获得生物样品； (b)使所述生物样品同时或以任意顺序依次接触以下物质： (1)至少一种捕获抗体，其与UCH-L1或UCH-L1片段上的表位结合以形成捕获抗体-UCH-L1抗原复合物；和(2)至少一种检测抗体，其包含一种可检测标记并与UCH-L1上的未被所述捕获抗体结合的表位结合以形成至少一种捕获抗体-UCH-L1抗原-至少一种第一检测抗体复合物，以及 (c)根据所述至少一种捕获抗体-UCH-L1抗原-至少一种第一检测抗体复合物中由所述可检测标记产生的信号确定所述生物样品中UCH-L1的量或浓度，其中所述方法： (i)可用于确定其量小于或等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，并且其中所述方法具有5log的动态范围，并且在所述动态范围内是线性的；或者 (ii)能够在约5pg/mL至约25,000pg/mL的动态范围内定量所述UCH-L1水平，其中精确度小于10％CV，并且在所述动态范围内实现线性偏差(DL)小于10％。 5.根据权利要求3所述的方法，其中所述方法进一步包括至少一种第三特异性结合成员，其与未被所述至少一种第一特异性结合成员和所述至少一种第二特异性结合成员结合的表位结合，并且其中所述第一特异性结合成员、第二特异性结合成员和第三特异性结合成员中的至少两种包含可检测标记。 6.根据权利要求5所述的方法，其中所述至少一种特异性结合成员、至少一种第二特异性结合成员和至少一种第三特异性结合成员是单特异性抗体。 7.根据权利要求4所述的方法，其中所述方法进一步包括至少一种第二检测抗体，其包含可检测标记并且与UCH-L1上未被所述捕获抗体和所述第一检测抗体结合的表位结合。 8.根据权利要求7所述的方法，其中所述至少一种捕获抗体、至少一种检测抗体和至少第二检测抗体是单特异性抗体。 9.根据权利要求3、5或6所述的方法，其中将任何不包含所述可检测标记的所述第一特异性结合成员和所述第二特异性结合成员固定在实心载体上。 10.根据权利要求1-9所述的方法，其中UCH-L1与一种或多种其它生物标志物一起评估。 11.根据权利要求1所述的方法，其中UCH-L1与所述受试者的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)状态一起评估，所述方法包括以下步骤：检测来自所述受试者的生物样品中的至少两种生物标志物，其中所述生物标志物中的至少两种是GFAP和UCH-L1，并且其中所述方法(i)可用于确定其量小于或等于50,000pg/mL的GFAP水平和其量小于或等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，(ii)具有5log的动态范围，并且(iii)在所述动态范围内是线性的 12.根据权利要求1、2或11所述的方法，其中通过免疫测定或单分子检测分析检测所述UCH-L1。 13.根据权利要求11或12所述的方法，其中通过免疫测定或单分子检测分析检测所述GFAP。 14.根据权利要求2所述的方法，其中所述方法进一步涉及评估受试者的GFAP状态，其中所述方法进一步包括以下步骤： a)使所述生物样品同时或依次接触以下物质：(i)至少一种第一GFAP特异性结合成员和至少一种第二GFAP特异性结合成员，其中所述至少一种第一GFAP特异性结合成员和至少一种第二GFAP特异性结合成员各自特异性结合GFAP；从而产生包含所述至少一种第一GFAP特异性结合成员-GFAP-至少一种第二GFAP特异性结合成员的一种或多种第二复合物；以及 b)检测所述样品中的所述一种或多种第二复合物中的GFAP，其中所述方法(i)可用于确定水平至多50,000pg/mL的GFAP和25,000pg/mL的UCH-L1，(ii)不需要稀释所述生物样品，并且(iii)使用床旁设备执行。 15.根据权利要求3、5、6、9或14所述的方法，其中所述方法进一步涉及评估受试者的GFAP状态，其中所述方法进一步包括以下步骤： a)使所述生物样品同时或依次接触以下物质：(i)至少一种第一GFAP特异性结合成员和至少一种第二GFAP特异性结合成员，其中所述至少一种第一GFAP特异性结合成员和至少一种第二GFAP特异性结合成员各自特异性结合GFAP；从而产生包含所述至少一种第一GFAP特异性结合成员-GFAP-至少一种第二GFAP特异性结合成员的一种或多种第二复合物；其中所述至少一种第二GFAP特异性结合成员包含第二可检测标记；以及 b)评估来自所述一种或多种第二复合物的信号；其中(i)来自所述至少一种第二GFAP特异性结合成员中所述可检测标记的可检测信号的存在指示所述样品中存在GFAP，并且来自所述至少一种第二GFAP特异性结合成员中所述可检测标记的可检测信号的量指示所述样品中GFAP的存在量，使得可以使用来自所述至少一种第二GFAP特异性结合成员中所述可检测标记的所述可检测信号的存在和/或量评估所述受试者的GFAP状态，其中所述方法(i)可用于确定水平至多50,000pg/mL的GFAP和25,000pg/mL的UCH-L1，(ii)不需要稀释所述生物样品，并且(iii)使用床旁设备执行。 16.根据权利要求4、7、8或15所述的方法，其中所述方法进一步涉及测量来自受试者的生物样品中的GFAP，包括以下步骤： (a)使生物样品同时或以任意顺序依次接触以下物质： (1)(i)至少一种捕获抗体，其与GFAP或GFAP片段上的表位结合以形成至少一种捕获抗体-GFAP抗原复合物；和(ii)至少一种检测抗体，其包含可检测标记并与GFAP上的未被所述捕获抗体结合的表位结合以形成GFAP抗原-检测抗体复合物，以及 (b)根据所述至少一种捕获抗体-GFAP抗原-至少一种检测抗体复合物中由所述可检测标记产生的信号确定所述生物样品中GFAP的量或浓度，其中所述方法可用于确定其量小于或等于50,000pg/mL的GFAP水平和其量小于或等于25,000pg/mL的UCH-L1水平，并且其中所述方法具有5log的动态范围，并且在所述动态范围内是线性的。 17.根据权利要求14、15或16中任一项所述的方法，其中所述方法检测选自由以下组成的组中的GFAP水平：约16pg/mL至约50,000pg/mL、约35pg/mL至约50,000pg/mL、约100pg/mL至约50,000pg/mL、约125pg/mL至约50,000pg/mL，以及约150pg/mL至约50,000pg/mL。 18.根据权利要求1-17中任一项所述的方法，其中所述方法检测选自由以下组成的组中的UCH-L1水平：约10pg/mL至约25,000pg/mL、约35pg/mL至约20,000pg/mL、约100pg/mL至约25,000pg/mL、约125pg/mL至约20,000pg/mL、约150pg/mL至约15,000pg/mL，以及约175pg/mL至约10,000pg/mL。 19.根据权利要求3、4、14、15或16中任一项所述的方法，其中所述接触是同时进行的。 20.根据权利要求3、4、14、15或16中任一项所述的方法，其中所述接触是依次进行的。 21.根据权利要求4、8或16中任一项所述的方法，其中所述至少一种捕获抗体固定在实心载体上。 22.根据权利要求1-21中任一项所述的方法，其中在约5分钟到约20分钟内执行所述方法。 23.根据权利要求1-22中任一项所述的方法，其中在约15分钟内执行所述方法。 24.根据权利要求1-23中任一项所述的方法，其中所述生物样品选自由全血样品、血清样品、脊髓液样品和血浆样品组成的组。 25.根据权利要求1-24中任一项所述的方法，其中执行所述方法以确认发生创伤性脑损伤或不存在创伤性脑损伤。 26.根据权利要求25所述的方法，其中所述创伤性脑损伤是轻度创伤性脑损伤。 27.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中通过在单个时间点测量UCH-L1的水平或量来评估状态。 28.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中通过在监视下完成测量UCH-L1的水平或量来评估状态。 29.根据权利要求1-28中任一项所述的方法，其中所述方法可在任何受试者上进行而不考虑选自由以下组成的组中的因素：所述受试者的临床状况，所述受试者的实验室值，所述受试者被分类为轻度、中度或重度TBI，所述受试者的UCH-L1表现为低或高水平，以及其中所述受试者可能已经受到头部损伤的任何事件的时间。 30.根据权利要求1-29中任一项所述的方法，其中所述方法使用小于20微升体积的所述生物样品进行。 31.根据权利要求1、4、7或8中任一项所述的方法，其中所述生物样品不需要稀释。 32.根据权利要求1-31中任一项所述的方法，其中所述方法具有约10pg/mL的下端检测限(LoD)。 33.根据权利要求1-32中任一项所述的方法，其中所述方法具有约20pg/mL的下端检测限(LoD)。 34.根据权利要求1-33中任一项所述的方法，其中所述方法提供扩展的检测窗口。 35.根据权利要求14所述的方法，其中所述一种第一GFAP特异性结合成员固定在实心载体上。 36.根据权利要求14所述的方法，其中至少一种第二GFAP特异性结合成员固定在实心载体上。 37.根据权利要求24所述的方法，其中所述生物样品被稀释或未被稀释。 38.根据权利要求14-15所述的方法，其中所述至少一种第一GFAP特异性结合成员和所述至少一种第二GFAP特异性结合成员是单特异性抗体。 39.根据权利要求1-13和16-38中任一项所述的方法，其中使用床旁设备执行所述方法。 40.根据权利要求14所述的方法，其中通过免疫测定或单分子检测分析检测所述GFAP。
所属类别：	发明专利