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原文传递一种C18色谱柱性能评价体系的建立方法

专利名称：	一种C18色谱柱性能评价体系的建立方法
摘要：	本发明公开了一种色谱柱性能评价体系建立方法，用色谱柱疏水性、立体选择性、总离子交换容量、酸性离子交换容量、金属残留量表征色谱性能参数，结合多层前馈神经网络模型对拖尾因子、色谱柱效、酚酸类物质分离度进行跨柱预测，具有系统，全面，快速，准确，简单的特点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	天津;12
申请人：	天津大学
发明人：	乔斌;李明珠;那平
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-08T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-24T00:00:00+0800
申请号：	CN201910276339.7
公开号：	CN110274967A
代理机构：	天津创智天诚知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	王秀奎
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	300072 天津市南开区卫津路92号
主权项：	1.一种C18色谱柱性能评价体系的建立方法，包括以下步骤： 1)标准品溶液及检测样品的配制：疏水性检测混合标准品：将尿嘧啶、戊基苯、丁基苯溶于第一溶剂中，尿嘧啶浓度为0.01-0.08μg/mL、戊基苯浓度为2-8μg/mL、丁基苯浓度为2-8μg/mL，得到疏水性检测混合标准品；立体选择性检测混合标准品：将尿嘧啶、苯并菲、邻三联苯溶于第一溶剂中，尿嘧啶、苯并菲、邻三联苯浓度均为0.01-0.2mg/mL，得到立体选择性检测混合标准品；离子交换容量检测混合标准品：将尿嘧啶、苯酚、苯甲胺溶于第一溶剂中，尿嘧啶浓度为0.01-0.2mg/mL、苯酚和苯甲胺浓度均为0.1-1.0mg/mL，得到总离子交换容量检测混合标准品；酸性离子交换容量检测混合标准品：将尿嘧啶、苯酚、苯甲胺溶于第一溶剂中，尿嘧啶浓度为0.01-0.2mg/mL、苯酚和苯甲胺浓度均为0.1-1.0mg/mL，得到酸性离子交换容量检测混合标准品；金属残留量检测混合标准品：将2,2’-联吡啶、4,4’-联吡啶溶于第一溶剂中，2,2’-联吡啶和4,4’-联吡啶浓度均为0.1-1.0mg/mL，得到金属残留量检测混合标准品；拖尾因子检测样品：将阿米替林溶于第一溶剂中，阿米替林浓度为60μg/mL，得到拖尾因子检测样品；色谱柱效检测样品：将尿嘧啶、萘溶于第一溶剂中，尿嘧啶浓度为0.1-2.0mg/mL、萘浓度为0.1-1.0mg/mL，得到色谱柱效检测样品；酚酸类物质分离度检测样品：将尿嘧啶、没食子酸、鞣花酸溶于第一溶剂中，其中尿嘧啶浓度为0.1-2.0mg/mL、没食子酸和鞣花酸浓度均为0.1-1.0mg/mL、鞣花酸浓度为0.1-1.0mg/mL，得到酚酸类物质分离度检测样品； 2)检测：通过高效液相色谱对上述标准品及样品进行检测，用第二溶液进行洗脱，用二极管阵列检测器检测出峰情况，从而得到上述各标准品及检测样品色谱峰的相关参数，将所述各标准品及检测样品的相关参数进行数据处理，进而得到色谱柱疏水性、立体选择性、总离子交换容量、酸性离子交换容量、金属残留量、拖尾因子、色谱柱效、酚酸类物质分离度； 3)训练：将上述检测结果对多层前馈神经网络进行学习训练，以疏水性、立体选择性、总离子交换容量、酸性离子交换容量、金属残留量参数为输入层，隐含层节点为3，4或5，输出层分别为拖尾因子、色谱柱效、酚酸类物质分离度； 4)反相色谱柱评价：选择不同填料的C18色谱柱，检测色谱柱的疏水性、立体选择性、总离子交换容量、酸性离子交换容量、金属残留量，以上述检测数据作为训练好的多层前馈神经网络输入层，即可在输出层得到拖尾因子、色谱柱效、酚酸类物质分离度的预测数据；所述第一溶剂为水、甲醇、乙醇或乙腈中的一种，所述第二溶液为MeOH-H2O、MeOH-20mMKH2PO4、ACN-H2O中的一种。 2.根据权利要求1所述的C18色谱柱性能评价体系的建立方法，其特征在于，所述疏水性检测混合标准品进样量1-10μL，用体积比为20-80:80-20的MeOH-H2O进行洗脱，流速0.5-1.5mL/min，紫外检测波长230-280nm，柱温25-45℃。 3.根据权利要求1所述的C18色谱柱性能评价体系的建立方法，其特征在于，所述立体选择性检测混合标准品进样量1-10μL，用体积比为10-90:90-10的MeOH-H2O进行洗脱，流速0.5-1.5mL/min，紫外检测波长220-260nm，柱温25-45℃。 4.根据权利要求1所述的C18色谱柱性能评价体系的建立方法，其特征在于，所述总离子交换容量检测混合标准品进样量1-10μL，用体积比为20-80:80-20的MeOH-20mM KH2PO4缓冲液(pH＝6-8)进行洗脱，流速0.1-2.0mL/min，紫外检测波长200-250nm，柱温25-45℃。 5.根据权利要求1所述的C18色谱柱性能评价体系的建立方法，其特征在于，所述酸性离子交换容量检测混合标准品进样量1-10μL，用MeOH-20mM KH2PO4缓冲液(pH＝1-3)进行洗脱，流速0.1-2.0mL/min，紫外检测波长200-250nm，柱温25-45℃。 6.根据权利要求1所述的C18色谱柱性能评价体系的建立方法，其特征在于，所述金属残留量检测混合标准品进样量1-10μL，用体积比为20-80:80-20的MeOH-H2O进行洗脱，流速0.1-2.0mL/min，紫外检测波长210-260nm，柱温25-45℃。 7.根据权利要求1所述的C18色谱柱性能评价体系的建立方法，其特征在于，所述拖尾因子检测样品进样量1-10μL，用体积比为10-90:90-10的MeOH-20mM KH2PO4(pH＝6-8)进行洗脱，流速0.1-2.0mL/min，紫外检测波长220-260nm，柱温20-30℃。 8.根据权利要求1所述的C18色谱柱性能评价体系的建立方法，其特征在于，所述色谱柱效检测样品进样量1-10μL，用体积比为10-90:90-10的ACN-H2O进行洗脱，流速0.1-2.0mL/min，紫外检测波长220-260nm，柱温25-45℃。 9.根据权利要求1所述的C18色谱柱性能评价体系的建立方法，其特征在于，所述酚酸类物质分离度检测样品进样量1-10μL，用ACN-H2O进行洗脱，流速0.1-5mL/min，紫外检测波长220-260nm，柱温25-35℃。 10.根据权利要求1～9中任意一项所述的C18色谱柱性能评价体系的建立方法，其特征在于，所述尿嘧啶也可为硫脲、茶碱、邻苯二甲酸二甲酯或苯甲醇中的任意一种，所述色谱柱效检测混合标准品中萘也可以为硝基苯、芴、蒽、菲、苊中任意一种。
所属类别：	发明专利