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原文传递一种基于C18键合相色谱柱分离测定奥沙利铂有关物质的方法

专利名称：	一种基于C18键合相色谱柱分离测定奥沙利铂有关物质的方法
摘要：	本发明属于药物分析技术领域，涉及一种基于C18键合相色谱柱分离测定奥沙利铂有关物质的方法。其采用C18键合相硅胶柱，分别以磷酸盐缓冲液和乙腈配制流动相A相和B相，进行洗脱，检测波长为205‑230nm，柱温为25‑40℃，流速为0.8‑2ml/min，进样量为5‑50uL；其中，磷酸盐缓冲液的配制方法为：取磷酸二氢铵0.1503g，加三乙胺1ml加水1000ml溶解，用磷酸调pH值为3.0；梯度洗脱程序为：0‑40min，A：80‑30％，40‑45min，A：30‑30％，45‑50min，A：30‑80％，50‑55min，A：80‑80％。与现有技术相比，本发明在检测时奥沙利铂与相邻杂质均分离良好，且具有灵敏度高、专属性强、精密度好，耐用性强等优点，可作为奥沙利铂的有关物质检查方法。涉及的色谱柱除具备上述良好性能外，而且还健合原料易得，加工简单，适合大规模工业生产。
专利类型：	发明专利
申请人：	辰欣药业股份有限公司
发明人：	徐丽侠;程红艳
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T08:00:00+0805
申请号：	CN201911422043.8
公开号：	CN111122740A
代理机构：	北京太兆天元知识产权代理有限责任公司
代理人：	郝彦东
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
申请人地址：	272073 山东省济宁市高新区同济科技工业园
主权项：	1.一种基于C18键合相色谱柱分离测定奥沙利铂有关物质的方法，其特征在于，采用C18键合相硅胶柱，分别以磷酸盐缓冲液和乙腈配制流动相A相和B相，进行洗脱，检测波长为205～230nm，柱温为25～40℃，流速为0.8～2ml/min，进样量为5～50uL；其中，磷酸盐缓冲液的配制方法为：取磷酸二氢铵0.1503g，加三乙胺1ml加水1000ml溶解，用磷酸调pH值为3.0；梯度洗脱程序为：0-40min，A：80-30％，40-45min，A：30-30％，45-50min，A：30-80％，50-55min，A：80-80％；所述C18键合相色谱柱的制备步骤如下： 1)将颗粒分布均匀、直径2-5μm的硅胶微球置于HCl溶液中，超声0.5-2h后，过滤，用蒸馏水充分洗涤至近中性，干燥，得到活化硅胶； 2)将活化硅胶加入干燥甲苯中，甲苯相对于活化硅胶的用量为8mL/g，移取十八烷基三氯硅烷，控制水浴温度为30℃，350rmp的搅拌速度下反应2h；反应结束后，再用干燥的甲苯洗涤数次，以除去剩余的十八烷基三氯硅烷及反应生成的少量HCl； 3)加入摩尔量为十八烷基三氯硅烷两倍以上的6-异戊烯基柚皮素或8-异戊烯基柚皮素，使C18键合硅胶中的氯转化为醚氧键，先用甲醇冲洗，最后用干燥二氯甲烷洗涤以除去反应生成的少量HCl，将洗后的产物置于真空干燥箱中，80℃真空干燥8h，得到复合填料； 4)将柱子以丙酮清洗干净，并以加热的N2气热风吹干，将清洁后的柱管的一端装配上带滤板的柱头，另一端则连接至匀浆罐上； 5)将复合填料浮选得到颗粒均匀的色谱填料；将色谱填料以四氯化碳为匀浆液混合均匀后，匀浆法装入色谱柱中，替换四氯化碳，即得。 2.根据权利要求1的基于C18键合相色谱柱分离测定奥沙利铂有关物质的方法，其特征在于，所述HCl溶液的质量百分浓度为12-18％，相对于硅胶微球用量为5-7mL/g 。 3.根据权利要求1的基于C18键合相色谱柱分离测定奥沙利铂有关物质的方法，其特征在于，所述十八烷基三氯硅烷相对于活化硅胶用量为6-8mL/g。 4.根据权利要求1的基于C18键合相色谱柱分离测定奥沙利铂有关物质的方法，其特征在于，所述检测波长为215nm，流速为1.0ml/min，柱温为40℃，进样量为20uL。 5.一种C18键合相色谱柱，其特征在于，具体制备步骤为：1)将颗粒分布均匀、直径2-5μm的硅胶微球置于HCl溶液中，超声0.5-2h后，过滤，用蒸馏水充分洗涤至近中性，干燥，得到活化硅胶；2)将活化硅胶加入干燥甲苯中，甲苯相对于活化硅胶的用量为8mL/g，移取十八烷基三氯硅烷，控制水浴温度为30℃，350rmp的搅拌速度下反应2h；反应结束后，再用干燥的甲苯洗涤数次，以除去剩余的十八烷基三氯硅烷及反应生成的少量HCl；3)加入摩尔量为十八烷基三氯硅烷两倍以上的6-异戊烯基柚皮素或8-异戊烯基柚皮素，使C18键合硅胶中的氯转化为醚氧键，先用甲醇冲洗，最后用干燥二氯甲烷洗涤以除去反应生成的少量HCl，将洗后的产物置于真空干燥箱中，80℃真空干燥8h，得到复合填料；4)将柱子以丙酮清洗干净，并以加热的N2气热风吹干，将清洁后的柱管的一端装配上带滤板的柱头，另一端则连接至匀浆罐上；5)将复合填料浮选得到颗粒均匀的色谱填料；将色谱填料以四氯化碳为匀浆液混合均匀后，匀浆法装入色谱柱中，替换四氯化碳，即得。
所属类别：	发明专利