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纳米抗体I22在重组人干扰素α2b检测中的应用
| 专利名称： | 纳米抗体I22在重组人干扰素α2b检测中的应用 |
| 摘要： | 本发明纳米抗体I22在重组人干扰素α2b检测中的应用，通过一系列实验研究证明在重组人干扰素α2b检测中纳米抗体I22比商品化的单克隆抗体更灵敏，纳米抗体I22与胶体金标记技术相结合，检测重组人干扰素α2b的检测限可达到1μg/mL。首次开发的胶体金试纸条实现了快速检测，将原本耗时两天的免疫鉴别试验缩短为几分钟完成的快速检测，实现了对重组人干扰素α2b快速检测的初步应用。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 北京;11 |
| 申请人： | 中国食品药品检定研究院 |
| 发明人： | 饶春明;秦玺;段茂芹;裴德宁;周勇;陶磊;史新昌;于雷 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-05-25T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-09-17T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910442316.9 |
| 公开号： | CN110244054A |
| 代理机构： | 北京中知法苑知识产权代理事务所(普通合伙) |
| 代理人： | 常玉明;张兰海 |
| 分类号： | G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33 |
| 申请人地址： | 100050 北京市东城区天坛西里2号 |
| 主权项： | 1.纳米抗体I22在重组人干扰素α2b检测中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：采用纳米抗体I22与胶体金试纸条结合方式对重组人干扰素α2b实现快速检测。 3.权利要求1或2所述应用的纳米抗体I22标记胶体金试纸条，其特征在于：由以下制备方法获得： 第一步，进行标记蛋白，用10mM的磷酸钾缓冲液在低温下透析蛋白两个小时； 第二步，将1.5mL离心管用超纯水清洗两遍，吸取1mL胶体金缓慢加入管中，向管中加入10μL的0.2M碳酸钾后上下震荡混合，通过磁力搅拌，逐滴加入总量为20μg的纳米抗体I22，混匀后反应40min； 第三步，加入90μL的8％BSA，进行封闭反应40min； 第四步，在14000rpm/min转速下低温离心35min，去掉上清液，用含1％BSA的PBS液洗涤重复此步骤6-8次，保留沉淀； 第五步，用600μL金复溶液将沉淀复溶后铺在7mm×160mm的金垫上进行干燥； 第六步，用PBS稀释液稀释重组人干扰素α2b标准品至浓度为2mg/mL，包被10μL的量；将包被His标签的抗体用PBS稀释液稀释至浓度为1mg/mL，包被10μL的量；进行包被NC膜； 第七步，在室温低湿度条件下进行干燥； 第八步，从底板上从上到下依次粘贴吸水纸、NC膜、金垫、样品层析垫，用斩切机切成3.6mm宽的试纸条用以检测使用； 第九部，对胶体金试纸条进行应用测试，得出胶体金试纸条的检测限为1μg/mL，能满足快速检测重组人干扰素α2b制品的要求。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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