详情

原文传递测定人血清磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA抗体的细胞免疫荧光试剂盒及其制备方法和应用

专利名称：	测定人血清磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA抗体的细胞免疫荧光试剂盒及其制备方法和应用
摘要：	本发明公开了测定人血清磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA抗体的细胞免疫荧光试剂盒及其制备方法和应用，其包括，盒体、设在盒体内的生物载玻片、盖玻片和设在盒体内的试剂；所述生物载玻片上包被有磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA转染细胞；所述盒体内的试剂包括荧光抗体试剂、阳性对照品、阴性对照品、血清样本稀释液、浓缩洗液、封片剂。所述试剂盒能够检测狼疮肾炎、糖尿病肾病及IgAN、MN、FSGS足细胞病的病人血清中的血清磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA抗体的浓度，作为诊断试剂盒，诊断特异性为100％，敏感性为98.1％。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏省人民医院(南京医科大学第一附属医院)
发明人：	段俗言;邢昌赢;袁杨刚;张承宁;张波
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-05T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-20T00:00:00+0800
申请号：	CN201910602135.8
公开号：	CN110261620A
代理机构：	南京禹为知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	王江南
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	210029 江苏省南京市广州路300号
主权项：	1.一种测定人血清磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA抗体的细胞免疫荧光试剂盒，其特征在于：包括，盒体、设在盒体内的生物载玻片、盖玻片和设在盒体内的试剂；所述生物载玻片上包被有磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA转染细胞；所述盒体内的试剂包括荧光抗体试剂、阳性对照品、阴性对照品、血清样本稀释液、浓缩洗液、封片剂。 2.如权利要求1所述的测定人血清磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA抗体的细胞免疫荧光试剂盒，其特征在于：所述荧光抗体试剂，为异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗人IgG。 3.如权利要求1或2所述的测定人血清磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA抗体的细胞免疫荧光试剂盒，其特征在于：所述阳性对照品，为人源抗ShcA抗体阳性血清；所述阴性对照品，为人源ShcA抗体阴性血清。 4.如权利要求1或2所述的测定人血清磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA抗体的细胞免疫荧光试剂盒，其特征在于：所述血清样本稀释液，为pH＝7.2的0.05mol/L磷酸盐缓冲液。 5.如权利要求1或2所述的测定人血清磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA抗体的细胞免疫荧光试剂盒，其特征在于：所述浓缩洗涤液，为含有体积分数为0.1％吐温-20的pH＝7.2、浓度为0.1mol/L的磷酸盐缓冲液。 6.如权利要求1或2所述的测定人血清磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA抗体的细胞免疫荧光试剂盒，其特征在于：所述封片剂为甘油：PBS的体积比为1：1的封片剂。 7.如权利要求1或2所述的测定人血清磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA抗体的细胞免疫荧光试剂盒，其特征在于：所述盖玻片的尺寸为62mm×23mm。 8.权利要求1所述的测定人血清磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA抗体的细胞免疫荧光试剂盒的制备方法，其特征在于：为将所述磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA的三种异构体p46shc、p52shc和p66shc同时转染HEK 293细胞后接种于生物载玻片上。 9.如权利要求8所述的方法，其特征在于：所述转染，其转染参数为：转染细胞密度：1×107个/mL，转染用PEI浓度：4μg/mL，转染质粒浓度：8μg/mL，转染PEI：质粒：2：1，细胞转染时间：4h，抑制细胞生长素VPA浓度：3.8mmol/L，表达培养细胞密度：2×106个/mL，表达时长：4d， ShcA蛋白的表达量在40μg/mL。 10.权利要求1所述的测定人血清磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA抗体的细胞免疫荧光试剂盒的应用，其特征在于：所述试剂盒能够检测狼疮肾炎、糖尿病肾病及IgAN、MN、FSGS足细胞病的病人血清中的血清磷酸酪氨酸衔接蛋白ShcA抗体的浓度，作为诊断试剂盒，诊断特异性为100％，敏感性为98.1％。
所属类别：	发明专利