详情

原文传递一种检测血液中孕激素受体膜组分1蛋白的微流控免疫分析芯片及其制备方法和应用

专利名称：	一种检测血液中孕激素受体膜组分1蛋白的微流控免疫分析芯片及其制备方法和应用
摘要：	本发明涉及一种检测血液中孕激素受体膜组分1蛋白PGRMC1的微流控免疫分析芯片及其制备方法和应用；本微流控免疫分析芯片由芯片和固相反应基底及包被在固相反应基底上的特异性抗原PGRMC1组成；芯片为带有并行微流管道的片状结构，固相反应基底上的特异性抗原PGRMC1为并行条状平面结构，与所述芯片微流管道相互垂直，交叉角度为90°；PGRMC1是与孕激素相关乳腺癌的可能潜在标志物，通过检测全血中的PGRMC1的含量，可为乳腺癌早期诊断提供可能；该检测方法将微流控免疫分析芯片和化学发光相结合，兼具了微流控免疫分析芯片的快速、高效和样品用量小，化学发光特异性好、操作简单、成本低、高通量等优点，具有乳腺癌的早期诊断应用前景。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京化工大学
发明人：	魏芸;石勇
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-16T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201910406003.8
公开号：	CN110244065A
代理机构：	北京东岩跃扬知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	谷岳
分类号：	G01N33/76(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	100029 北京市朝阳区北三环东路15号
主权项：	1.一种检测血液中孕激素受体膜组分1蛋白的微流控免疫分析芯片，其特征在于：本微流控免疫分析芯片由芯片和固相反应基底及包被在固相反应基底上的特异性抗原PGRMC1组成；芯片为带有并行微流管道的片状结构，固相反应基底上的特异性抗原PGRMC1为并行条状平面结构，与所述芯片微流管道相互垂直，交叉角度为90°；所述芯片为经手工翻模或注塑而成的带有并行微流管道的片状结构；所述微流管道长度为3-5cm，所述微流管道直径500-600μm高度500-600μm，所述微流管道的间距为1-3mm；所述固相反应基底选自聚苯乙烯、聚二甲基硅氧烷、聚甲基丙烯酸甲酯的一种或多种。所述包被在固相反应基底上的特异性抗原PGRMC1为并行条状平面结构，长度为3-5cm，间距为1-3mm，与所述芯片微流管道相互垂直，交叉角度为90°。 2.根据权利要求1所述的一种检测血液中孕激素受体膜组分1蛋白的微流控免疫分析芯片，其特征在于：所述芯片带有3-21条并行微流管道。 3.一种检测血液中孕激素受体膜组分1蛋白的微流控免疫分析芯片制备方法，其特征在于：将芯片与固相反应基底贴合后形成封闭的微流管道，向所述微流管道中分别注入20uL，浓度范围为3ug/mL-20ug/mL特异性抗原PGRMC1，所述特异性抗原PGRMC1包被在固相反应基底上，包被好以后，抽出包被液，揭去所述的芯片，并贴上另一芯片，使第二块芯片上的管道与原第一块芯片的管道放置方向垂直，交叉角度为90°，并将其与固相反应基底密封后，向微流管道通入BSA封闭液，封闭后抽出封闭液。 4.根据权利要求3所述的一种检测血液中孕激素受体膜组分1蛋白的微流控免疫分析芯片制备方法，其特征在于：所述的特异性抗原PGRMC1包被液的制备：取1μL浓度为0.358mg/mL的PGRMC1加入17-119uL的PBS缓冲溶液中制备PGRMC1包被液，稀释PGRMC1包被液浓度为3ug/mL-20ug/mL，混匀，PBS的pH7.2-7.4。 5.一种检测血液中孕激素受体膜组分1蛋白的微流控免疫分析芯片的应用，其特征在于： (1)向所述的微流控免疫分析芯片的微流管道加样孔中加入20uL待检测物，孵育20-60min，用含有0.05％吐温-20的洗涤液进行洗涤； (2)向步骤(1)所述微流管道中加入酶标记的检测抗体10uL，用含有0.05％吐温的洗涤液进行洗涤； (3)向步骤(2)所述微流管道中加入鲁米诺化学发光底物20uL，通过化学发光检测仪进行检测。 6.根据权利要求5所述的一种检测血液中孕激素受体膜组分1蛋白的微流控免疫分析芯片的应用，其特征在于：所述酶标记的检测抗体为HRP标记的羊抗兔抗体。 7.根据权利要求5所述的一种检测血液中孕激素受体膜组分1蛋白的微流控免疫分析芯片的应用，其特征在于：所述待检测物为血液与抗原PGRMC1对应抗体K1反应后的溶液。 8.根据权利要求5所述的一种检测血液中孕激素受体膜组分1蛋白的微流控免疫分析芯片的应用，其特征在于：所述的待检测物的制备：取1μL浓度为1.35mg/mL抗体K1，加入500uL的3％BSA封闭液中，稀释成2.7ug/mL，等体积加入血液或者血清，反应20-60min。
所属类别：	发明专利