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原文传递一种蛋白质原位酶切的处理方法

专利名称：	一种蛋白质原位酶切的处理方法
摘要：	本发明公开一种蛋白质原位酶切的处理方法，涉及分析化学技术领域。所述处理方法包括将带有组织切片的载玻片固定在生化样品原位处理装置上，所述生化样品原位处理装置包括有磁铁，磁铁的磁力线垂直穿过所述载玻片；将可键合蛋白的磁性微球喷洒到组织切片表面，室温孵育；利用70％乙醇清洗组织切片1‑2次，然后利用96％乙醇清洗组织切片15s，真空干燥；将蛋白酶溶液喷洒到组织切片表面，充分原位酶切后真空干燥。该方法适用于生物组织切片表面蛋白质原位质谱成像的样本制备中。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	中国科学院动物研究所
发明人：	刘科辉;娄新徽;霍雨萌;孟青
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-13T00:00:00+0800
申请号：	CN201910356108.7
公开号：	CN110231487A
代理机构：	北京正理专利代理有限公司
代理人：	赵晓丹
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	100020 北京市朝阳区北辰西路1号院5号
主权项：	1.一种蛋白质原位酶切的处理方法，其特征在于，包括以下步骤：将带有组织切片的载玻片固定在生化样品原位处理装置上，所述生化样品原位处理装置包括有磁铁，所述磁铁的磁力线垂直穿过所述载玻片；将可键合蛋白的磁性微球喷洒到组织切片表面，室温孵育；利用70％乙醇清洗组织切片1-2次，每次15-30s，然后利用96％乙醇清洗组织切片15s，真空干燥；将蛋白酶溶液喷洒到组织切片表面，充分原位酶切后真空干燥。 2.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于，所述处理方法还包括将组织切片固定在载玻片上的步骤：用冰冻切片的方法将组织切片制备成冰冻切片，在载玻片表面涂匀20ul多聚赖氨酸溶液，烘干，将冰冻切片转移到载玻片上，得到带有组织切片的载玻片。 3.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于，所述可键合蛋白的磁性微球为NHS-EDC-苯乙烯磁性微球，所述处理方法还包括NHS-EDC-苯乙烯磁性微球的制备。 4.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于，所述处理方法还包括将原位酶切处理后的组织切片与磁铁分离，放进质谱成像仪进行质谱检测。 5.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于，所述生化样品原位处理装置包括：生化处理槽、被配置在生化处理槽内的载玻片托，以及被配置在载玻片托内的载玻片和双层磁铁；所述载玻片托包括用于固定载玻片的第一本体部，以及结合固定在所述第一本体部底部的用于固定所述双层磁铁的第二本体部；所述第二本体部包括有一端开口的容纳腔，所述双层磁铁位于所述容纳腔内；所述载玻片位于所述双层磁铁在第一本体部上的投影所限定的区域内，所述双层磁铁的磁力线垂直穿过所述载玻片。 6.根据权利要求5所述的处理方法，其特征在于，所述第一本体部包括用于放置载玻片的卡槽以及用于固定载玻片的第一卡子，所述载玻片通过第一卡子被水平固定在所述卡槽内；所述第二本体部还包括有用于固定所述双层磁铁的第二卡子，所述双层磁铁通过第二卡子被水平固定在所述容纳腔内。 7.根据权利要求5所述的处理方法，其特征在于，所述生化样品原位处理装置还包括用于提拉载玻片托的提绳。 8.根据权利要求5所述的处理方法，其特征在于，所述载玻片的厚度为0-2mm，且不包括0mm；载玻片与双层磁铁之间的距离为0-2mm；所述载玻片与所述双层磁铁之间设有用于支撑所述载玻片的隔离板，所述隔离板的厚度为0-2mm。 9.根据权利要求5所述的处理方法，其特征在于，所述第一本体部和所述第二本体部为一体结构，或者所述第一本体部和所述第二本体部为结合固定在一起的两个独立结构。 10.根据权利要求5所述的处理方法，其特征在于，所述生化处理槽和载玻片托的材料为聚苯乙烯、透明塑料或玻璃。
所属类别：	发明专利