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原文传递适用动物源性食品班布特罗胶体金快速检测卡及制备方法

专利名称：	适用动物源性食品班布特罗胶体金快速检测卡及制备方法
摘要：	本发明旨在提供一种适用动物源性食品班布特罗胶体金快速检测卡及制备方法。制备获得的班布特罗胶体金快速检测卡具有灵敏度高、特异性强、稳定性高、操作简单、便于携带等特点，不需要复杂的仪器设备和专业的技术人员，其分析结果易于判断，短时间内可直接用肉眼观察到检测结果，广泛适用于快速食品检测等现场检测分析，在班布特罗监测领域具有广泛的实用性和开发价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	新疆;65
申请人：	克拉玛依市市场监督管理局
发明人：	郭燕;包文雯;李鹏;田杰;刘荣荣;陆武;张潇耀;陈思敏;曼古努尔·尼合买提;张艳
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-22T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-24T00:00:00+0800
申请号：	CN201910430797.1
公开号：	CN110275012A
代理机构：	西安亚信智佳知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	段国刚
分类号：	G01N33/532(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	834099 新疆维吾尔自治区克拉玛依市克拉玛依区天山路76号
主权项：	1.一种适用动物源性食品的班布特罗胶体金快速检测卡，其特征在于，包括人工制备的班布特罗单克隆抗体和PC-2羊抗鼠抗体成分的胶体金快速检测卡。 2.如权利要求1所述的一种适用动物源性食品的班布特罗胶体金快速检测卡，其特征在于，所述检测卡为检测班布特罗成分，检测卡包括：包括含有胶体金标记的班布特罗单克隆抗体溶液喷涂的金标垫、绘有T线和C线的NC膜、样品垫以及吸水垫，进行组装。 3.一种适用动物源性食品的班布特罗胶体金快速检测卡的制备方法，其特征在于，所述胶体金快速检测卡的制备具体过程为：（1）选取1.35%红色金颗粒标记取1mL胶体金溶液于2mL试管中，加入0.2M K2CO3 1.5-3.0µL/mL，混匀；加入抗体原液0.5-2.5µL，混匀后静置5min；加入含10% BSA的封闭液10µL/mL，混匀后静置5min；4℃，12000r/min离心，5min；1/20体积的复溶液复溶，喷涂于已封闭好的玻璃纤维素膜上，迅速转移至冷冻干燥机内进行冷冻干燥，制作成为金标垫；（2）用包被液将抗原稀释，将PC-2羊抗鼠250倍稀释制得C液，将制得的人工抗原50倍稀释获得T液；（3）将步骤（2）中制备获得的C液、T液分别在NC膜上划线，从左至右顺序依次为T液和C液，置37℃干燥20~40min，干燥后浸没入封闭液封闭，置于37℃恒温箱中干燥备用；（4）将步骤（1）、步骤（2）、步骤（3）中制备获得的样品垫、金标垫、NC膜以及吸水垫裁剪为宽度相同的长方形，依次进行重叠组装，并设置加样孔，组装成检测班布特罗的检测卡。 4.如权利要求3所述的一种适用动物源性食品的班布特罗胶体金快速检测卡的制备方法，其特征在于，所述的金标垫制备过程中加入0.2M K2CO3的量为1.5µL/mL。 5.如权利要求3所述的一种适用动物源性食品的班布特罗胶体金快速检测卡的制备方法，其特征在于，所述的金标垫制备过程中加入抗体原液的量为1.5µL。 6.如权利要求3所述的一种适用动物源性食品的班布特罗胶体金快速检测卡的制备方法，其特征在于，所述T液，用用制备获得的人工班布特罗抗体进行50倍稀释的溶液。 7.如权利要求3所述的一种适用动物源性食品的班布特罗胶体金快速检测卡及的制备方法，其特征在于，所述C液，用PC-2羊抗鼠稀释250倍获得的溶液。 8.如权利要求1一种适用动物源性食品的班布特罗胶体金快速检测卡的应用，具体包括以下步骤：（1）将待固态检样品于均质器中均质1min，10000rpm；称取5.0±0.05g匀浆好的组织样本至10mL聚苯乙烯离心管中，扣上管盖，不宜太紧；放入80℃水浴锅中水浴10min后取出冷却至室温，待检；液态待检样品用干燥、洁净的离心管或适当容器采集50mL左右，如果不立即检测，在2-8℃冷藏可保存24小时，注意避免腐败造成失效或污染；（2）使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温，从原包装袋中取出检测卡，将检测卡平放，用滴管吸取步骤（1）中获得的待检样品溶液，垂直滴加3滴于加样孔中，加样后开始计时3-5分钟观察T线及C线的出现情况；（3）待步骤（2）中检测卡中C线出现代表结果有效；检测卡中T线及未出现代表则表示样品中班布特罗浓度高于0.01ppb；检测卡中T线与C线同时出现，说明待检样品中不含有班布特罗或其浓度低于0.01ppb，纸条中C线未出现，代表结果无效。
所属类别：	发明专利