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原文传递甲功五项化学发光检测试剂盒

专利名称：	甲功五项化学发光检测试剂盒
摘要：	本发明公开了一种甲功五项化学发光检测试剂盒，涉及生物技术领域。所述检测试剂盒包括包被的微孔反应板、生物素标记物、碱性磷酸酶标记物、校准品、发光底物液和清洗液；所述生物素标记物包括T4抗原衍生物生物素标记物、T3抗原衍生物生物素标记物、TSH抗体生物素标记物、T4单克隆抗体生物素标记物和T3单克隆抗体生物素标记物；所述碱性磷酸酶标记物包括T4抗原衍生物碱性磷酸酶标记物、T3抗原衍生物碱性磷酸酶标记物、TSH配对抗体碱性磷酸酶标记物、T4单克隆抗体碱性磷酸酶标记物和T3单克隆抗体碱性磷酸酶标记物；所述校准品包括总四碘甲状腺原氨酸校准品、总三碘甲状腺原氨酸校准品、TSH校准品、FT4校准品和FT3校准品。本发明能同时检测五项甲功指标。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东博科诊断科技有限公司
发明人：	郭宣城;赵芮;韩重;李延爽;王秀
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-27T00:00:00+0800
申请号：	CN201910581232.3
公开号：	CN110286237A
分类号：	G01N33/78(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	250101 山东省济南市高新区工业南路51号小鸭工业园办公楼909室
主权项：	1.一种甲功五项化学发光检测试剂盒，其特征在于，包括包被的微孔反应板、生物素标记物、碱性磷酸酶标记物、校准品、发光底物液和清洗液，其中，所述微孔反应板为包被有链霉亲和素的微孔板；所述生物素标记物包括T4抗原衍生物生物素标记物、T3抗原衍生物生物素标记物、TSH抗体生物素标记物、T4单克隆抗体生物素标记物和T3单克隆抗体生物素标记物；所述碱性磷酸酶标记物包括T4抗原衍生物碱性磷酸酶标记物、T3抗原衍生物碱性磷酸酶标记物、TSH配对抗体碱性磷酸酶标记物、T4单克隆抗体碱性磷酸酶标记物和T3单克隆抗体碱性磷酸酶标记物；所述校准品包括总四碘甲状腺原氨酸校准品、总三碘甲状腺原氨酸校准品、促甲状腺激素校准品、游离四碘甲状腺原氨酸校准品和游离三碘甲状腺原氨酸校准品。 2.根据权利要求1所述的甲功五项化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述微孔反应板的制备方法包括：采用包被缓冲液稀释链霉亲和素，得到稀释后的链霉亲和素溶液；将稀释后的链霉亲和素溶液加入反应板，进行预包被，之后甩去反应板上的包被缓冲液；将封板缓冲液加入反应板，将反应板置于37℃恒温环境放置2h，之后去掉封板缓冲液，烘干；加干燥剂密封，得到包被的微孔反应板。 3.根据权利要求1所述的甲功五项化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述生物素标记物的制备方法包括：分别将T4抗原衍生物、T3抗原衍生物、TSH抗体、T4单克隆抗体和T3单克隆抗体单独溶于硼酸盐缓冲液中，配置成1～5mg/ml的T4抗原衍生物溶液、1～5mg/ml的T3抗原衍生物溶液、1～5mg/ml的TSH抗体溶液、1～5mg/ml的T4单克隆抗体溶液和1～5mg/ml的T3单克隆抗体溶液；采用二甲亚砜配将生物素置成浓度为1～5mg/ml的生物素溶液；将所述生物素溶液分别加入到T4抗原衍生物溶液、T3抗原衍生物溶液、TSH抗体溶液、T4单克隆抗体溶液和T3单克隆抗体溶液中，在10℃温度条件下避光振荡反应4h，其中，所述生物素溶液与T4抗原衍生物溶液、T3抗原衍生物溶液、TSH抗体溶液、T4单克隆抗体溶液和T3单克隆抗体溶液的比率均为30～80ug/mg；向振荡反应后得到的溶液中分别加入NH4Cl溶液，避光振荡反应10min后，用PBS避光透析过夜，根据终体积分别计算T4抗原衍生物、T3抗原衍生物溶液、TSH抗体溶液、T4单克隆抗体溶液和T3单克隆抗体溶液的浓度，之后加入甘油制备分别得到T4抗原衍生物生物素标记物、T3抗原衍生物生物素标记物、TSH抗体生物素标记物、T4单克隆抗体生物素标记物和T3单克隆抗体生物素标记物。 4.根据权利要求1所述的甲功五项化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述碱性磷酸酶标记物的制备方法包括：采用改良过碘酸钠-乙二醇法分别对T4抗原衍生物、T3抗原衍生物、TSH配对抗体、T4单克隆抗体和T3单克隆抗体进行碱性磷酸酶标记，分别得到T4抗原衍生物碱性磷酸酶标记物、T3抗原衍生物碱性磷酸酶标记物、TSH配对抗体碱性磷酸酶标记物、T4单克隆抗体碱性磷酸酶标记物和T3单克隆抗体碱性磷酸酶标记物；用含100g/L小牛血清的TBS缓冲液按2000：1的比例分别稀释T4抗原衍生物碱性磷酸酶标记物、T3抗原衍生物碱性磷酸酶标记物、TSH配对抗体碱性磷酸酶标记物、T4单克隆抗体碱性磷酸酶标记物和T3单克隆抗体碱性磷酸酶标记物，并分别保存。 5.根据权利要求1至4中任一所述的甲功五项化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述发光底物液为金刚烷胺衍生物。 6.根据权利要求1至4中任一所述的甲功五项化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述清洗液的组分及含量为：磷酸盐缓冲液PH7.4 0.01mol/L 吐温-20 2％。 7.根据权利要求2所述的甲功五项化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述包被缓冲液为PH9.6，50mmol/L的Na2CO3-NaHCO3缓冲液，所述链霉亲和素的浓度为8ug/mL。 8.根据权利要求7所述的甲功五项化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述封板缓冲液的组分及含量为： LTBS-T 0.01mol/L BSA 1％明胶 0.2％。 9.根据权利要求7所述的甲功五项化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述校准品的稀释液组分及含量为： PH值为7.5。 10.根据权利要求9所述的甲功五项化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述总四碘甲状腺原氨酸校准品的浓度为0～400nmol/L，所述总三碘甲状腺原氨酸校准品的浓度为0～10nmol/L，所述促甲状腺激素校准品的浓度为0～50uIU/L，所述游离四碘甲状腺原氨酸校准品的浓度为0～100pmol/L，所述游离三碘甲状腺原氨酸校准品的浓度为0～35pmol/L。
所属类别：	发明专利