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原文传递一种用于肝癌早期筛查和诊断的联合检测血清标志物、试剂盒及检测方法

专利名称：	一种用于肝癌早期筛查和诊断的联合检测血清标志物、试剂盒及检测方法
摘要：	本发明涉及一种用于肝癌早期筛查和诊断的联合检测血清标志物、包含该联合检测血清标志物的试剂盒以及检测方法，属于生物医学技术领域。本发明基于癌症驱动基因在肿瘤发生和发展中所起的作用，定制138个癌症驱动基因编码的人类蛋白质芯片，通过蛋白质芯片初步筛选出肝癌的早期检测血清标志物，再经过ELISA实验进行验证，最终筛选出可用于肝癌早期筛查和诊断的一组肝癌联合检测血清标志物，其包括PTEN、PTCH1、IDH1、SRSF2、MSH2和NPM1共6种基因编码的蛋白，可辅助肝癌的临床诊断，具有灵敏度高、特异性强、成本低等优点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河南;41
申请人：	郑州大学
发明人：	张建营;叶华;代丽萍;王晓;王鹏;史健翔;王科妍;杨倩
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-10T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-27T00:00:00+0800
申请号：	CN201910621860.X
公开号：	CN110286235A
代理机构：	郑州知一智业专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	刘彩霞
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	450000 河南省郑州市中原区高新技术开发区科学大道100号
主权项：	1.一种用于肝癌早期筛查和诊断的联合检测血清标志物，其特征在于：所述联合检测血清标志物包括PTEN、PTCH1、IDH1、SRSF2、MSH2和NPM1基因编码的蛋白；所述PTEN基因编码的蛋白具有如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列；所述PTCH1基因编码的蛋白具有如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列；所述IDH1基因编码的蛋白具有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列；所述SRSF2基因编码的蛋白具有如SEQ ID NO.5所示的氨基酸序列；所述MSH2基因编码的蛋白具有如SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列；所述NPM1基因编码的蛋白具有如SEQ ID NO.7所示的氨基酸序列。 2.根据权利要求1所述的用于肝癌早期筛查和诊断的联合检测血清标志物，其特征在于：所述联合检测血清标志物由PTEN、PTCH1、IDH1、SRSF2、MSH2和NPM1共6种基因编码的蛋白组成。 3.一种用于肝癌早期筛查和诊断的试剂盒，其特征在于：包含如权利要求1-2中任一项所述的用于肝癌早期筛查和诊断的联合检测血清标志物。 4.根据权利要求3所述的用于肝癌早期筛查和诊断的试剂盒，其特征在于：所述联合检测血清标志物包被于固相载体上。 5.根据权利要求4所述的用于肝癌早期筛查和诊断的试剂盒，其特征在于：所述固相载体的材质为聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺、纤维素中的任意一种。 6.根据权利要求3-5中任一项所述的用于肝癌早期筛查和诊断的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括阳性对照血清、阴性对照血清、封闭液、样本稀释液、第二抗体、第二抗体稀释液、洗涤液、显色液、终止液中的任意一种或几种的组合。 7.一种使用如权利要求1-2中任一项所述的用于肝癌早期筛查和诊断的联合检测血清标志物的检测方法，其特征在于：包括以下步骤： 1)对上述联合检测血清标志物进行包被，封闭后清洗； 2)与待检测血清进行一抗孵育，清洗，再进行二抗孵育，再清洗； 3)显色系统显色后终止反应，测定吸光度值； 4)以OD450-OD620为相对OD值，然后扣去空白对照，将各个指标的吸光度值代入以下公式，计算预测概率P值大小； P＝1/(1+Exp(-(3.504-6.810×ODPTEN-3.616×ODPTCH1+20.294×ODIDH1-9.224×ODSRSF2-11.667×ODMSH2+3.770×ODNPM1)))；式中ODPTEN、ODPTCH1、ODIDH1、ODSRSF2、ODMSH2、ODNPM1分别为各个指标的相对OD值减去空白对照后的吸光度值；当P值≥0.5时，初步判定为疑似肝癌样品；当P值＜0.5时，初步判定为正常样品。
所属类别：	发明专利