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原文传递土壤毒死蜱快速检测方法

专利名称：	土壤毒死蜱快速检测方法
摘要：	本发明公开了土壤毒死蜱快速检测方法，包括：步骤1、制备金胶基底：对100mL的0.01％高氯金酸加热搅拌至沸腾，在保持高氯金酸沸腾状态下加入1％的柠檬酸三钠0.5mL，在柠檬酸三钠滴加完成后，在360℃保持加热25min，持续搅拌；步骤2、对毒死蜱的拉曼光谱进行谱峰归属，获得毒死蜱拉曼特征峰；步骤3、制备含有毒死蜱的土壤待测液；步骤4、将金胶基底、土壤待测液和NaBr溶液混合，进行拉曼光谱采集；步骤5、建立土壤毒死蜱残留量的线性回归方程。本发明制备的金胶基底能够增强土壤毒死蜱的SERS信号，提高土壤中毒死蜱的检测限，实现土壤毒死蜱的快速检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	浙江大学山东工业技术研究院
发明人：	聂鹏程;蔺磊;董涛
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-24T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-08T00:00:00+0800
申请号：	CN201910437792.1
公开号：	CN110308130A
代理机构：	杭州天昊专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	黄芳
分类号：	G01N21/65(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	277000 山东省枣庄市高新区互联网小镇15号楼
主权项：	1.土壤毒死蜱快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、制备金胶基底：对100mL的0.01％高氯金酸加热搅拌至沸腾，在保持高氯金酸沸腾状态下加入1％的柠檬酸三钠0.5mL，在柠檬酸三钠滴加完成后，在360℃保持加热25min，持续搅拌；步骤2、对毒死蜱的拉曼光谱进行谱峰归属，获得毒死蜱拉曼特征峰；步骤3、制备含有毒死蜱的土壤待测液；步骤4、将金胶基底、土壤待测液和NaBr溶液混合，其中，金胶基底、土壤待测液的比例为6：1，进行拉曼光谱采集；步骤5、建立土壤毒死蜱残留量的线性回归方程，公式为Y＝0.1516-0.0026x1+0.0027x2+0.0077x3+0.0016x4-0.0018x5+0.0067x6，式中，Y为土壤毒死蜱的残留量，单位：mg/k；x1为340cm-1处拉曼特征峰面积，x2为459cm-1处拉曼特征峰面积，x3为529cm-1处拉曼特征峰面积，x4为610cm-1处拉曼特征峰面积，x5为674cm-1处拉曼特征峰面积，x6为1270cm-1处拉曼特征峰面积。 2.如权利要求1所述的土壤毒死蜱快速检测方法，其特征在于，步骤1中，搅拌采用恒温磁力搅拌器，搅拌速度为100r/min。 3.如权利要求2所述的土壤毒死蜱快速检测方法，其特征在于，步骤2中，对毒死蜱的拉曼光谱进行谱峰归属的操作：(2.1)选取毒死蜱的标准品；(2.2)将少许标准品置于载玻片压平；(2.3)使用显微镜调整视野，确定被测物在激光扫描点上，拉曼探头焦距控制6mm；(2.4)进行拉曼光谱采集。 4.如权利要求3所述的土壤毒死蜱快速检测方法，其特征在于，步骤3中，制备土壤待测液包括以下步骤： (3.1)采集土壤样本，将采集到的土壤样本置于通风避光处自然晾干48h以上，研磨后过60目筛，装入自封袋保存；(3.2)将10mg/L的毒死蜱标准品溶液和土壤样本充分混合；(3.3)将混合后的土壤样本置于通风避光处自然风干后，获得混合土壤样本；(3.4)称取10g混合土壤样本于50mL离心管中，加入5mL超纯水，涡旋振荡30s后，加入1mL乙腈，涡旋振荡3min，超声2min，静置15分钟；(3.5)加入3g氯化钠和4g无水乙酸钠，摇匀后涡旋混合1min，以5000r/min的速度离心5min，取上清液；(3.6)取此上清液1.5mL，依次加入150mg硫酸镁、50mg PSA、10mg石墨化炭黑和50mg C18，再涡旋1min；(3.7)以5000r/min的速度离心5min，用0.22μm有机滤膜过滤得到土壤待测液。 5.如权利要求4所述的土壤毒死蜱快速检测方法，其特征在于，步骤(3.1)中，毒死蜱标准品溶液的制备方法包括以下步骤：准确称量标准品毒死蜱250mg并置于250mL容量瓶中，用乙腈溶剂配制10mg/L的毒死蜱标准品溶液，放置于4℃避光环境中存放。 6.如权利要求5所述的土壤毒死蜱快速检测方法，其特征在于，步骤4中，金胶、土壤待测液、NaBr溶液的体积分别为600μL、100μL、100μL，其中，NaBr溶液的质量分数为1％。 7.如权利要求6所述的土壤毒死蜱快速检测方法，其特征在于，步骤5中，建立线性回归方程的步骤为： (5.1)毒死蜱标准品溶液的配制：准确称量标准品毒死蜱250mg并置于250mL容量瓶中，用乙腈溶剂配制1000mg/L的毒死蜱标准品溶液，放置于4℃避光环境中存放；再用乙腈将1000mg/L的毒死蜱的储备溶液分别稀释为10、8、6、4、2、1、0.5、0.1、0.05和0.01mg/L的标准品溶液； (5.2)土壤样品制备：采集土壤样品，通风避光处自然晾干48h以后，研磨制备，过60目筛后装入自封袋保存；将采取的土壤样品分成3组，每组土壤样品83个样本，将毒死蜱标准品溶液和土壤样品充分混合，制备83种不同浓度土壤样本，每个浓度2份，浓度范围：0-10mg/kg，一份用于高效液相化学分析，一份用于拉曼光谱分析；将混合后的土壤样本放置在通风避光处自然风干； (5.3)土壤毒死蜱残留提取：(1)称取10g混合后的土壤样本于50mL离心管中，加入5mL超纯水，涡旋振荡30s；加入1mL乙腈、涡旋振荡3min，超声2min、静置15分钟；(2)加入3g氯化钠和4g无水乙酸钠，摇匀后涡旋混合1min，以5000r/min的速度离心5min，取上清液；(3)取此上清液1.5mL，依次加入150mg硫酸镁、50mg PSA、10mg石墨化炭黑和50mg C18，再涡旋混合1min；以5000r/min的速度离心5min，用0.22μm有机滤膜过滤得到土壤待测液； (5.4)土壤毒死蜱残留值检测：采用超高效液相方法检测土壤中的毒死蜱残留值，采用色谱柱，实验条件为流动相：甲醇+水＝50+50，流速0.3mL/min，检测波长300nm，进样量10μL，柱温30℃； (5.5)土壤毒死蜱拉曼光谱数据采集：向2mL石英瓶中依次加入金胶600μL、土壤待测液100μL、NaBr 100μL，涡旋振荡后将液体样本放入OTA-LK-1液体样品检测池； (5.6)根据拉曼光谱特征峰面积和土壤毒死蜱残留值，建立线性回归方程。 8.如权利要求7所述的土壤毒死蜱快速检测方法，其特征在于，步骤(2.4)、(4)、(5.5)中，拉曼光谱采集的参数设置均为：激发波长785nm，功率为200mW，扫描范围为200-3000cm-1，积分时间为10s，曝光次数1次，平滑系数为1，平行样品检测3次。
所属类别：	发明专利