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原文传递吐温系列辅料高效液相色谱-高分辨质谱联用分析和鉴定方法

专利名称：	吐温系列辅料高效液相色谱-高分辨质谱联用分析和鉴定方法
摘要：	本发明提供了一种吐温系列辅料，包括吐温‑80、吐温‑60、吐温‑40、吐温‑20和吐温‑85的分析方法及吐温系列辅料中化合物的鉴定方法。其特征在于，吐温系列辅料样品采用高效液相色谱‑高分辨质谱联用(HPLC‑HRMS)分析方法分析，吐温系列辅料中化合物的鉴定是基于保留时间与精确分子量之间的依数性关系。按照本发明可以实现吐温系列辅料全面、快速、高效的分析，以及对吐温系列辅料中化合物的准确鉴定，获得每种化合物的结构类型和聚合度信息。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	中国医学科学院药物研究所
发明人：	张金兰;王喆;王亚男;铁偲;贺文义
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-11T00:00:00+0800
申请号：	CN201811634778.2
公开号：	CN110320309A
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	100050 北京市西城区南纬路甲2号
主权项：	1.一种吐温系列辅料高效液相色谱-高分辨质谱联用分析和鉴定方法，其特征在于，所述的分析和鉴定方法包括如下步骤： 1)吐温系列辅料的高效液相色谱-高分辨质谱联用分析方法，其包括以下步骤： a、采用反相高效液相色谱柱作为液相色谱分析色谱柱，其中，柱长选自10-250mm，流动相A为10-90％的乙腈水溶液，流动相B为50-100％的四氢呋喃水溶液，流动相比例：A+B＝100％，分析时间为10-50min，在分析时间内从0-40％的流动相B梯度洗脱至60-100％的流动相B，流速0.1-1.0ml/min，色谱柱温：4-50℃，进样体积1-20μl； b、将a步骤的流出物进行高分辨质谱分析，采用电喷雾离子源，正离子检测模式； 2)基于保留时间和精确分子量依数性关系的吐温系列辅料中化合物的鉴定方法，其特征在于，吐温系列辅料中均含有结构类型不同的多组化合物，每组中化合物的保留时间和精确分子量之间存在依数性关系，不同组化合物的依数性关系不同，因此，样品采用步骤1)的分析方法检测到的化合物可以根据该依数性关系进行鉴定，判断该化合物的结构类型和聚合度。 2.根据权利要求1的分析和鉴定方法，其特征在于，所述的吐温系列辅料包括吐温-80、吐温-60、吐温-40、吐温-20和吐温-85。 3.根据权利要求1的分析和鉴定方法，其特征在于，所述的反相高效液相色谱柱，其柱长选自50-200mm，流动相A为20-80％的乙腈水溶液，流动相B为70-100％的四氢呋喃水溶液，流动相比例：A+B＝100％，分析时间为15-45min，在分析时间内从0-30％的流动相B梯度洗脱至70-100％的流动相B，流速0.1-0.8ml/min，色谱柱温：10-50℃。 4.根据权利要求3的分析和鉴定方法，其特征在于，所述的反相高效液相色谱柱，其柱长选自100-200mm，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，流动相A为30-70％的乙腈水溶液，流动相B为80-100％的四氢呋喃水溶液，流动相比例：A+B＝100％，分析时间为20-40min，在分析时间内从0-20％的流动相B梯度洗脱至80-100％的流动相B，流速0.2-0.6ml/min。 5.根据权利要求1的分析和鉴定方法，其特征在于，所述的高分辨质谱分析中扫描范围：50-3000Da。 6.根据权利要求1的分析和鉴定方法，其特征在于，所述的高分辨质谱分析中扫描范围：100-3000Da。 7.根据权利要求1的分析和鉴定方法，其特征在于，所述的高分辨质谱分析中，其干燥气温度：150-350℃；干燥气流速：5-20l/min；喷雾气流速：10-50psi；鞘气温度：250-400℃；鞘气流速：5-20l/min；喷雾电压：2500-5000V；毛细管温度：150-320℃。 8.根据权利要求1的分析和鉴定方法，其特征在于，所述的基于保留时间和精确分子量依数性关系的吐温系列辅料中化合物的鉴定方法中，吐温系列辅料中含有多组化合物，包括：聚氧乙烯山梨糖醇酐单脂肪酸酯、聚氧乙烯异山梨糖醇酐单脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐双脂肪酸酯、聚氧乙烯异山梨糖醇酐双脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐三脂肪酸酯、聚氧乙烯单脂肪酸酯、聚氧乙烯双脂肪酸酯，每组中化合物的保留时间和精确分子量之间存在依数性关系，样品采用步骤1)中所述的分析方法检测后，将样品中化合物的精确分子量分别带入不同组的依数性关系中计算保留时间，然后将该化合物保留时间的计算值与实测值匹配，判断该化合物的结构类型和聚合度，实现结构鉴定。
所属类别：	发明专利