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一种利用微波酸水解和阴离子交换色谱-脉冲安培法分析多糖中单糖组成的检测方法
| 专利名称： | 一种利用微波酸水解和阴离子交换色谱-脉冲安培法分析多糖中单糖组成的检测方法 |
| 摘要： | 本发明提供了一种利用微波酸水解和阴离子交换色谱‑脉冲安培法分析多糖中单糖组成的检测方法。本发明涉及使用单模微波蛋白水解仪将多糖降解为单糖，再应用阴离子交换色谱‑脉冲安培法分析多糖的单糖组成。本发明的技术方案具有水解快速，10分钟可完成样品降解；一次可降解10个样品；与传统方法使用相同的酸；酸用量少，只需10μL 3 mol/L HCl；操作步骤简单易学、无需衍生和直接上样等优点。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 山东;37 |
| 申请人： | 青岛大学附属医院 |
| 发明人： | 张丽娟;何燕利 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2018-04-04T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-10-18T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810295008.3 |
| 公开号： | CN110346457A |
| 代理机构： | 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) |
| 代理人： | 王晓晓 |
| 分类号： | G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30 |
| 申请人地址： | 266000 山东省青岛市市南区江苏路16号 |
| 主权项： | 1.一种利用微波酸水解和阴离子交换色谱-脉冲安培法分析多糖中单糖组成的检测方法，其特征在于：所述检测方法包括以下步骤： (1) 称取待测多糖，用HCl溶解待测多糖得到溶解液，取所述溶解液使用单模微波蛋白水解仪进行微波酸水解； (2) 微波酸水解后的水解液离心浓缩除酸； (3) 离心后的样品中添加甲醇，离心浓缩除残留HCl； (4) 将得到的干燥样品用水溶解，离心取上清； (5) 离心后的上清液进行阴离子交换色谱-脉冲安培法分析，得到色谱图； (6) 制备多种单糖的标准曲线； (7) 将步骤(5)得到的色谱图与步骤(6)中单糖的标准曲线比对并分析计算，确定待测多糖中的单糖组分。 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中待测多糖用1 mol/L -5 mol/L HCl溶解多糖得到溶解液。 3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中微波酸水解的条件是：功率80 w-100 w，温度80 ℃-100 ℃，水解时间5 min-15 min。 4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中微波酸水解的条件是：功率100 w，温度100 ℃，水解时间10 min。 5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述步骤(5)中的色谱条件为： 分析柱：Thermo Scientific Dionex Carbo PACTM PA10，4.0 mm×250 mm， 保护柱：Thermo Scientific Dionex Carbo PACTM PA10，4.0 mm×50 mm， 淋洗液：0-15 min 使用18 mM NaOH；15.1-30 min 使用18 mM NaOH和150 mMCH3COONa的混合液，流速：1.0 mL/min， 进样体积：10 μL， 柱温：30 ℃。 6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述步骤(6)中的单糖包括岩藻糖、半乳糖胺、葡萄糖胺、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、甘露糖醛酸和古罗糖醛酸。 7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述步骤(6)中单糖标准曲线的浓度范围为0.00005 mg/mL -0.05 mg/mL。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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