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原文传递一种黄曲霉毒素B1的荧光定量检测检测卡及其应用

专利名称：	一种黄曲霉毒素B1的荧光定量检测检测卡及其应用
摘要：	本发明公开了一种黄曲霉毒素B1的荧光定量检测卡及其应用。该黄曲霉毒素B1的荧光定量检测卡，包括背板、样品垫、猝灭抗体结合垫、荧光反应膜和吸水垫。本发明的荧光定量检测卡利用T区聚集的金可显著猝灭该处的荧光的原理，可用于检测谷物、饲料等样本基质中黄曲霉B1的含量。检测方法简单易行，前处理简便，同时具有灵敏度高、特异性强、精确度高、准确度高的特点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京维德维康生物技术有限公司
发明人：	马立才;刘河冰;丁亚芳;杨柳;贾良曦;覃丹凤;秦誉
专利状态：	有效
申请日期：	2018-04-04T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-18T00:00:00+0800
申请号：	CN201810299204.8
公开号：	CN110346562A
分类号：	G01N33/558(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	100095 北京市海淀区北清路156号环保示范园9号院3号楼
主权项：	1.一种黄曲霉毒素B1的荧光定量检测检测卡，其特征在于包括背板、样品垫、猝灭抗体结合垫、荧光反应膜和吸水垫，荧光反应膜位于背板的中央，荧光反应膜上设有包被有黄曲霉B1抗原的检测区T区和包被Ⅱ抗的质控区C区，背板的一端端头为样品垫，另一端端头为吸水垫，荧光反应膜两端分别与吸水垫和猝灭抗体结合垫相互交叠连接，在猝灭抗体结合垫上压有样品垫；所述T区靠近样品垫，所述C区靠近吸水垫。 2.一种黄曲霉毒素B1的荧光定量检测检测卡，其特征在于所述猝灭抗体结合垫包被有亲和素修饰胶体金颗粒标记的生物素化黄曲霉B1单克隆抗体。 3.一种黄曲霉毒素B1的荧光定量检测检测卡，其特征在于所述猝灭抗体结合垫是由如下方法制得而成：（1）亲和素修饰胶体金的制备在沸腾的100mL的1%氯金酸水溶液中加入2-4mL的0.5-5%柠檬酸三钠溶液，使用0.1~0.4μg /ml IgG/g亲和素修饰金，金颗粒大小为20~50nm；（2）亲和素-生物素共价标金的制备用150mM PBS稀释黄曲霉B1单克隆抗体至5mL，将稀释好的抗体加入10-25g的0.1~0.4μg/ml IgG/g亲和素修饰金溶液中混匀，4℃静置过夜，得到金标抗体悬浮液；（3）猝灭抗体结合垫的制备将玻璃纤维素膜平铺浸泡入金标抗体悬浮液中，取出37℃过夜烘烤，剪裁成18mm*300mm的长条，即为猝灭抗体结合垫。 4.一种黄曲霉毒素B1的荧光定量检测检测卡，其特征在于所述荧光反应膜是由如下方法制得而成：（1）检测区T区的制备：用150mM PBS将黄曲霉B1抗原稀释5~10倍，用作T区的划膜液；（2）用0.1~1mM PBS包被液将羊抗鼠二抗稀释10倍，用作C区的划膜液；在荧光反应膜上划膜，划膜量为0.7μl/cm，T区、C区的间距为2~4mm。 5.一种黄曲霉毒素B1的荧光定量检测检测卡，其特征在于所述背板可为PVC胶板；所述样品垫可为玻璃纤维棉制成；所述吸水垫可为吸水纸；所述荧光反应膜为事先固定有荧光供体的硝酸纤维素膜。 6.一种黄曲霉毒素B1的荧光定量检测检测卡，其特征在于所述样品垫和所述猝灭抗体结合垫有2mm重叠区，所述荧光反应膜C线端和所述吸水垫有2mm重叠区。 7.一种黄曲霉毒素B1的荧光定量检测检测卡的应用，其特征在于所述黄曲霉毒素B1荧光定量检测卡用于检测谷物、饲料检测，其最低检测限为2µg/kg。
所属类别：	发明专利