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原文传递一种黄连对照提取物及其制备方法和应用

专利名称：	一种黄连对照提取物及其制备方法和应用
摘要：	本发明公开了一种黄连对照提取物及其制备方法和应用，所述提取物为黄色干燥粉末，其是由含重量百分比黄连提取物67‑84％和辅料16‑33％组成，其中黄连提取物中含有药根碱、巴马汀、小檗碱、表小檗碱、黄连碱含量总和不低于18％；该黄连对照提取物一致性好、性状稳定、均匀，可用于黄连药材、黄连制剂的质量控制，对有效化合物定性定量的分析测定。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广州万正药业有限公司
发明人：	许舜军;郭隆钢;许艺镌
专利状态：	有效
申请日期：	2018-04-13T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-25T00:00:00+0800
申请号：	CN201810330289.1
公开号：	CN110376291A
代理机构：	北京君尚知识产权代理有限公司
代理人：	余长江
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	510663 广东省广州市萝岗区科学城芳草甸路2号
主权项：	1.一种黄连对照提取物，其特征在于所述提取物为黄色干燥粉末，其是由含重量百分比黄连提取物67-84％和辅料16-33％组成，其中黄连提取物中含有药根碱、巴马汀、小檗碱、表小檗碱、黄连碱含量总和不低于18％。 2.如权利要求1所述的黄连对照提取物，其特征在于，黄连对照提取物所述小檗碱的含量≥11.0％，巴马汀的含量≥3.0％，表小檗碱的含量≥1.5％，黄连碱的含量≥2.0％；或黄连对照提取物所述小檗碱的含量≥11.0％，巴马汀的含量≥3.0％，表小檗碱的含量≥1.5％，黄连碱的含量≥2.0％，药根碱的含量≥1.0％。 3.如权利要求2所述的黄连对照提取物，其特征在于，所述的黄连对照提取物中，小檗碱的含量≥11.8％，巴马汀的含量≥3.4％，表小檗碱的含量≥1.9％，黄连碱的含量≥2.5％。 4.如权利要求1所述的黄连对照提取物，其特征在于，所述辅料为微粉硅胶、药用淀粉中一种或两种。 5.如权利要求1所述的一种黄连对照提取物，其特征在于，是通过下述方法制备得到的： (1)黄连干膏：取不同来源及批次的黄连药材粉末用甲醇超声提取，滤过得滤液1；药渣再用甲醇超声提取1-3次，收集的1-3次滤液与滤液1混合、蒸干得到黄连干膏； (2)黄连提取物：黄连干膏溶解于甲醇，再加入辅料蒸干研磨过筛即得黄连提取物； (3)黄连对照提取物：将不同来源或批次的黄连提取物进行调配勾兑，得到黄连对照提取物。 6.如权利要求5所述的一种黄连对照提取物，其特征在于，步骤(1)前增加不同黄连药材来源的筛选步骤：将不同来源或批次的原料药材以薄层色谱法和/或高效液相色谱法进行检测；然后对不同来源或批次的原料药材的通过薄层色谱法和/或高效液相色谱法得到的色谱图和/或测定的巴马汀、小檗碱、表小檗碱和黄连碱含量进行比较分析，剔除色谱图和/或测定的含量异常的原料药材，保留色谱图和/或测定的含量一致的原料药材进行下一步的黄连干膏的制备。 7.如权利要求5所述的一种黄连对照提取物，其特征在于，步骤2与步骤3之间还包括以薄层色谱法和/或高效液相色谱法对不同批次的黄连提取物的巴马汀、小檗碱、表小檗碱和黄连碱进行检测的步骤。 8.如权利要求1所述的一种黄连对照提取物，其特征在于，步骤1中黄连药材粉末与甲醇的重量体积比为1:8～1:50；所述超声时间为30～60min，功率为100W～3kW；步骤2中甲醇用量为2-5倍干膏重量；步骤3中所述的调配具体指：将不同来源或批次的黄连提取物进行调配，应使最终的黄连对照提取物中对应原药材比例为1：(2-5)g/g，其中含量以wt％计小檗碱的含量≥11.0％，巴马汀的含量≥3.0％，表小檗碱的含量≥1.5％，黄连碱的含量≥2.0％。 9.如权利要求6所述的一种黄连对照提取物，其特征在于，所述黄连提取物的薄层色谱法和/或高效液相色谱法检测方法，包括如下步骤：其中薄层色谱法包括如下步骤： (1)化学对照品溶液：精密称取小檗碱，用甲醇配制成0.1mg/ml的溶液；分别精密称取药根碱、表小檗碱、黄连碱和巴马汀，分别用甲醇配制成0.2mg/ml的溶液； (2)黄连提取物溶液：精密黄连提取物用甲醇超声处理，定容，配成浓度为3mg/ml溶液，过0.22μm滤膜即得； (3)所述薄层色谱法检测条件为：薄层板：G60预制板；点样：0.5μl，条带状点样长10mm；展开剂：乙酸丁酯：甲醇：异丙醇：氨水＝5：2：1.5：1.2；薄层板的干燥：点样后的薄层板置于五氧化二磷真空干燥器，保证薄层板的干燥；检视:置于UV366nm下检视；其中高效液相色谱法包括如下步骤： (1)化学对照品溶液的制备：精密称取小檗碱，用甲醇配制成0.1mg/ml的溶液；分别精密称取药根碱、表小檗碱、黄连碱和巴马汀，分别用甲醇配制成0.2mg/ml的溶液； (2)黄连提取物供试品溶液的制备：取黄连提取物加入甲醇-盐酸(100：1)，超声处理，放冷，配制成浓度为0.24mg/ml的溶液，滤过，取续滤液，即得黄连提取物溶液； (3)色谱条件：所述的高效液相色谱法检测条件：色谱仪器：高效液相色谱仪，配有DAD检测器色谱柱：C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：A-乙腈，B-含0.3％磷酸-0.3％三乙胺的水溶液；梯度洗脱程序：0-25min：15％A→25％A， 25-40min：25％A→28％A， 40-50min：28％A；检测波长270nm，DAD检测器；流速0.8ml/min；进样量10μl；柱温25℃； (4)检测方法：精密吸取供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图及计算药根碱、表小檗碱、黄连碱和巴马汀，小檗碱含量。 10.一种黄连药材或中药制剂的鉴别方法，或黄连或含黄连有效成分的药材或中药制剂的质量控制方法，其特征在于，将权利要求1中所述的黄连对照提取物、待测样品以薄层色谱法和/或高效液相色谱法进行检测，对比判别，其中薄层色谱法包括如下步骤： (1)化学对照品溶液：精密称取小檗碱，用甲醇配制成0.1mg/ml的溶液；分别精密称取药根碱、表小檗碱、黄连碱和巴马汀，分别用甲醇配制成0.2mg/ml的溶液； (2)黄连对照提取物溶液：精密黄连对照提取物用甲醇超声处理，定容，配成浓度为3mg/ml溶液，过0.22μm滤膜即得； (3)待测样品：药材供试品溶液或含黄连制剂：取样品0.2g，加入甲醇20ml，超声后取出，离心，取上清液过0.22um滤膜即得药材供试品溶液； (4)所述薄层色谱法检测条件为：薄层板：G60预制板；点样：0.5μl，条带状点样长10mm；展开剂：乙酸丁酯：甲醇：异丙醇：氨水＝5：2：1.5：1.2；薄层板的干燥：点样后的薄层板置于五氧化二磷真空干燥器，保证薄层板的干燥；检视:置于UV366nm下检视；其中高效液相色谱法包括如下步骤： (1)化学对照品溶液的制备：精密称取小檗碱，用甲醇配制成0.1mg/ml的溶液；分别精密称取药根碱、表小檗碱、黄连碱和巴马汀，分别用甲醇配制成0.2mg/ml的溶液； (2)黄连对照提取物溶液的制备：取黄连对照提取物加入甲醇-盐酸(100：1)，超声处理，放冷，配制成浓度为0.24mg/ml的溶液，滤过，取续滤液，即得黄连对照提取物溶液； (3)待测样品供试品溶液：黄连药材粉末或含黄连制剂，精密称定各0.2g，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸(100：1的体积比)的混合溶液40ml，密塞，超声取出，放冷，加甲醇至刻度50ml处，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度10ml处，摇匀，滤过，取续滤液，即得； (4)色谱条件：所述的高效液相色谱法检测条件：色谱仪器：高效液相色谱仪，配有DAD检测器色谱柱：C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：A-乙腈，B-含0.3％磷酸-0.3％三乙胺的水溶液；梯度洗脱程序：0-25min：15％A→25％A， 25-40min：25％A→28％A， 40-50min：28％A；检测波长270nm，DAD检测器；流速0.8ml/min；进样量10μl；柱温25℃； (5)检测方法：精密吸取药材供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图及计算药根碱、表小檗碱、黄连碱和巴马汀，小檗碱含量。
所属类别：	发明专利