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原文传递一种黄柏对照提取物及其制备方法和应用

专利名称：	一种黄柏对照提取物及其制备方法和应用
摘要：	本发明公开了一种黄柏对照提取物及其制备方法和应用，所述提取物为黄色干燥粉末，其是由含重量百分比黄柏提取物67‑84％和辅料16‑33％组成，其中黄柏提取物中含有小檗碱含量不低于30％；该黄柏对照提取物一致性好、性状稳定、均匀，可用于黄柏药材、黄柏制剂的质量控制，对有效化合物定性定量的分析测定。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广州万正药业有限公司
发明人：	郭隆钢;陆顺瑶;许舜军;许艺镌
专利状态：	有效
申请日期：	2018-04-13T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-25T00:00:00+0800
申请号：	CN201810330280.0
公开号：	CN110376317A
代理机构：	北京君尚知识产权代理有限公司
代理人：	余长江
分类号：	G01N30/06(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	510663 广东省广州市萝岗区科学城芳草甸路2号
主权项：	1.一种黄柏对照提取物，其特征在于，所述提取物为黄色干燥粉末，其是由含重量百分比黄柏提取物67-84％和辅料16-33％组成，其中黄柏提取物中小檗碱含量不低于30％。 2.如权利要求1所述的黄柏对照提取物，其特征在于，其中黄柏提取物中小檗碱含量不低于34％。 3.如权利要求1所述的黄柏对照提取物，其特征在于，所述辅料为微粉硅胶、药用淀粉中一种或两种。 4.如权利要求1所述的一种黄柏对照提取物，其特征在于，是通过下述方法制备得到的： (1)黄柏干膏：取不同来源及批次的黄柏药材粉末用甲醇超声提取，滤过得滤液，滤液蒸干得到黄柏干膏； (2)黄柏提取物：黄柏干膏溶解于甲醇，再加入辅料蒸干研磨过筛即得黄柏提取物； (3)黄柏对照提取物：将不同来源或批次的黄柏提取物进行调配勾兑，得到黄柏对照提取物。 5.如权利要求4所述的一种黄柏对照提取物，其特征在于，步骤(1)前增加不同黄柏药材来源的筛选步骤：将不同来源或批次的原料药材以薄层色谱法和/或高效液相色谱法进行检测；然后对不同来源或批次的原料药材的通过薄层色谱法和/或高效液相色谱法得到的色谱图和/或测定的小檗碱含量进行比较分析，剔除色谱图和/或测定的含量异常的原料药材，保留色谱图和/或测定的含量一致的原料药材进行下一步的黄柏干膏的制备。 6.如权利要求4所述的一种黄柏对照提取物，其特征在于，步骤2与步骤3之间还包括以薄层色谱法和/或高效液相色谱法对不同批次的黄柏提取物的小檗碱进行检测的步骤。 7.如权利要求4所述的一种黄柏对照提取物，其特征在于，步骤1中黄柏药材粉末与甲醇的重量体积比为1:8～1:50；所述超声时间为30～60min，功率为100W～3kW；步骤2中甲醇用量为2-5倍干膏重量；步骤3中所述的调配具体指：将不同来源或批次的黄柏提取物进行调配，应使最终的黄柏对照提取物中对应原药材比例为1：(2-5)g/g，其中含量以wt％计小檗碱的含量≥34％。 8.如权利要求6所述的一种黄柏对照提取物，其特征在于，所述黄柏提取物的薄层色谱法和/或高效液相色谱法检测方法，包括如下步骤：其中薄层色谱法包括如下步骤： (1)化学对照品溶液：精密称取小檗碱，用甲醇配制成0.1mg/ml的溶液； (2)黄柏提取物溶液：精密黄柏提取物用甲醇超声处理，定容，配成浓度为2.5mg/ml溶液，过0.22μm滤膜即得； (3)所述薄层色谱法检测条件为：薄层板：G60预制板；点样：0.5μl，条带状点样长6mm；展开剂：乙酸丁酯：甲醇：异丙醇：氨水＝5：2：1.5：1.2；展开方式：双槽展开缸，一侧加展开剂，另一侧放置浓氨水试液共同预平衡15分钟，展开剂使用量：浓氨水使用量＝1：1-2；板的干燥：点样后的薄层板置于五氧化二磷真空干燥器，保证薄层板的干燥；检视:置于UV366nm下检视；其中高效液相色谱法包括如下步骤： (1)化学对照品溶液的制备：精密称取小檗碱，用甲醇配制成0.1mg/ml的溶液； (2)黄柏提取物供试品溶液的制备：取黄柏提取物加入甲醇-盐酸(100：1)，超声处理，放冷，配制成浓度为0.24mg/ml的溶液，滤过，取续滤液，即得黄柏提取物溶液； (3)色谱条件：所述的高效液相色谱法检测条件：色谱仪器：高效液相色谱仪，配有DAD检测器色谱柱：C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：A-乙腈，B-含0.3％磷酸-0.3％三乙胺1：1；梯度洗脱程序：检测波长270nm，DAD检测器；流速0.8ml/min；进样量10μl；柱温25℃； (4)检测方法：精密吸取供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图及计算小檗碱含量。 9.如权利要求1所述的一种黄柏对照提取物，其特征在于，所述黄柏对照提取物采用薄层色谱法检测得到的色谱图中的小檗碱的荧光斑点和采用高效液相色谱法检测得到的色谱图在小檗碱位置处的色谱峰应分别与其对应的化学对照品或其对应的原料药材一致。 10.一种黄柏药材或中药制剂的鉴别方法，或黄柏或含黄柏有效成分的药材或中药制剂的质量控制方法，其特征在于，将权利要求1中所述的黄柏对照提取物、待测样品以薄层色谱法和/或高效液相色谱法进行检测，对比判别，其中薄层色谱法包括如下步骤： (1)化学对照品溶液：精密称取小檗碱，用甲醇配制成0.1mg/ml的溶液； (2)黄柏对照提取物溶液：精密黄柏对照提取物用甲醇超声处理，定容，配成浓度为2.5mg/ml溶液，过0.22μm滤膜即得； (3)待测样品：药材供试品溶液或含黄柏制剂：取样品，加入甲醇超声，超声后取出，离心，取上清液过0.22um滤膜即得药材供试品溶液； (4)所述薄层色谱法检测条件为：薄层板：G60预制板；点样：0.5μl，条带状点样长10mm；展开剂：乙酸丁酯：甲醇：异丙醇：氨水＝5：2：1.5：1.2；展开方式：双槽展开缸，浓氨水试液预平衡，展开剂使用量：浓氨水使用量＝1：(1-2)；薄层板的干燥：点样后的薄层板置于五氧化二磷真空干燥器，保证薄层板的干燥；检视:置于UV366nm下检视；其中高效液相色谱法包括如下步骤： (1)化学对照品溶液的制备：精密称取小檗碱，用甲醇配制成0.1mg/ml的溶液； (2)黄柏对照提取物溶液的制备：取黄柏对照提取物加入甲醇-盐酸(100：1)，超声处理，放冷，配制成浓度为0.24mg/ml的溶液，滤过，取续滤液，即得黄柏对照提取物溶液； (3)待测样品供试品溶液：黄柏药材粉末或含黄柏制剂，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇，密塞，超声取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得； (4)色谱条件：所述的高效液相色谱法检测条件：色谱仪器：高效液相色谱仪，配有DAD检测器色谱柱：C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：A-乙腈，B-含0.3％磷酸-0.3％三乙胺的水溶液(1:1)；梯度洗脱程序：检测波长270nm，DAD检测器；流速0.8ml/min；进样量10μl；柱温25℃； (5)检测方法：精密吸取药材供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图及计算小檗碱含量。
所属类别：	发明专利