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原文传递一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒及其检测方法

专利名称：	一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒及其检测方法
摘要：	本发明公开了一种基于竞争法的同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒及其使用方法。该试剂盒包括试剂I，试剂II和荧光免疫层析试纸条，试剂I含有二硫苏糖醇(DTT)、腺苷甲硫氨酸、同型半胱氨酸甲基转移酶、缓冲液、稳定剂；试剂II含有生物素化聚苯乙烯荧光微球、缓冲液、稳定剂；试纸条由样品垫、包被有生物素化抗体的结合垫、包含检测线和质控线的NC膜、吸水纸以及PVC胶板。利用竞争式荧光免疫层析法检测腺苷同型半胱氨酸来达到检测同型半胱氨酸的目的，该检测方法，操作简单，可同时检测大量样本，受干扰因素少，成本低廉。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	南京东纳生物科技有限公司
发明人：	张宇;王建国;韩国志
专利状态：	有效
申请日期：	2018-04-04T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-18T00:00:00+0800
申请号：	CN201810318417.0
公开号：	CN110346575A
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	211112 江苏省南京市江宁区龙眠大道568号南京生命科技创新园2号楼北区6-7层
主权项：	1.一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒，其特征在于：包含试剂I、试剂II和荧光免疫层析试纸条三个部分，其中试剂I含有二硫苏糖醇、腺苷甲硫氨酸、同型半胱氨酸甲基转移酶、缓冲液、稳定剂；试剂II含有亲和素修饰聚苯乙烯荧光微球、缓冲液、稳定剂；荧光免疫层析试纸条包括五部：样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水纸及PVC胶板，腺苷同型半胱氨酸的生物素化抗体固定在结合垫上，硝酸纤维素膜上固定有腺苷同型半胱氨酸-牛血清白蛋白结合物和二抗作为检测线和质控线，通过竞争法定量检测由同型半胱氨酸转化形成的腺苷同型半胱氨酸。 2.根据权利要求1所述的一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒，其特征在于：每升试剂I溶液中各组分的含量是：每升试剂II溶液中各组分的含量是：亲和素修饰的聚苯乙烯荧光微球 0.05～5g/L 缓冲液 5～100mM 稳定剂 0.01～10％每厘米荧光免疫层析试纸条各组分的含量是：生物素化腺苷同型半胱氨酸抗体 1～4μL/cm 腺苷同型半胱氨酸-牛血清白蛋白结合物 0.5～2μL/cm 二抗 0.5～2μL/cm 3.根据权利要求2所述的一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒，其特征在于，每升试剂I溶液中各组分的含量是：每升试剂II溶液中各组分的含量是：亲和素修饰的聚苯乙烯荧光微球 0.1-1g/L 缓冲液 10-15mM 稳定剂 0.1-0.3％每厘米荧光免疫层析试纸条各组分的含量是：生物素化腺苷同型半胱氨酸抗体 2-3μL/cm 腺苷同型半胱氨酸-牛血清白蛋白结合物 1-1.5μL/cm 二抗 0.8-1μL/cm 4.根据权利要求2所述的一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒，其特征在于：所述的稳定剂为叠氮钠、叠氮锂、PC300、苯甲酸钠、山梨酸钾、对羟基苯甲酸丙酯、聚乙二醇、聚乙烯醇、乙二胺四乙酸二钠中的一种或几种。 5.根据权利要求2所述的一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒，其特征在于：所述缓冲液为PBS、PB、Tris中的一种或几种。 6.根据权利要求1所述的一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒的检测方法为：将样本(10-50μL)与试剂I(10-50μL)混合，反应10-30分钟，所得溶液与试剂II(900-980μL)混合，取100μL该混合样本加样到试纸条上，5-15分钟后在荧光免疫定量分析仪上读取检测线的荧光信号值，得到对应的同型半胱氨酸样本含量。
所属类别：	发明专利