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原文传递用于胰岛素样生长因子结合蛋白-1和胎儿纤维连接蛋白含量的联合定量检测系统

专利名称：	用于胰岛素样生长因子结合蛋白-1和胎儿纤维连接蛋白含量的联合定量检测系统
摘要：	本发明公开了一种用于胰岛素样生长因子结合蛋白‑1和胎儿纤维连接蛋白含量的联合定量检测系统，包括试剂盒、检测设备；试剂盒运用双抗体夹心法免疫层析技术，与配套仪器使用，实现对孕妇阴道分泌物或阴道流出液中胰岛素样生长因子结合蛋白‑1与胎儿纤维连接蛋白的定量检测，为诊断胎膜早破与预测早产提供参考依据。还公开了一种同时测定胰岛素样生长因子结合蛋白‑1和胎儿纤维连接蛋白含量的金标垫的制备方法及其制备的金标垫，所述金标垫采用两种抗体标记胶体金并混合复溶液喷金的方法实现两种蛋白的同时检测，实现了一次取样同时定量检测两个指标，操作快速简单，检测准确度高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	安徽;34
申请人：	安徽惠邦生物工程有限公司
发明人：	胡容;王忠亮
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-06T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-18T00:00:00+0800
申请号：	CN201910493157.5
公开号：	CN110346578A
代理机构：	合肥市上嘉专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	李璐
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	230088 安徽省合肥市高新区潜水东路18号
主权项：	1.一种用于胰岛素样生长因子结合蛋白-1和胎儿纤维连接蛋白含量的联合定量检测系统，其特征在于，包括试剂盒、检测设备；所述试剂盒主要包括检测卡、标准曲线对照表、样本稀释液，所述检测卡包括卡壳、设置在卡壳中的试条，所述试条包括衬底、依次粘附在衬底上的样品垫、金标垫、NC膜、吸收垫，所述金标垫采用两种抗体标记胶体金并混合复溶液喷金的方法实现两种蛋白的同时检测；所述检测设备用于对试剂盒中两种蛋白的定量检测，为诊断胎膜早破与预测早产提供参考依据。 2.根据权利要求1所述的用于胰岛素样生长因子结合蛋白-1和胎儿纤维连接蛋白含量的联合定量检测系统，其特征在于，所述卡壳包括相互卡接的上卡壳、下卡壳，上卡壳上开有位于样品垫上部的加样孔、位于NC膜上部的观测口，下卡壳的内表面设置有用于放置试条的卡槽。 3.根据权利要求1所述的用于胰岛素样生长因子结合蛋白-1和胎儿纤维连接蛋白含量的联合定量检测系统，其特征在于，所述NC膜上依次等间隔设置有T2检测线、T1检测线、质控线，T2检测线上包被IGFBP-1单克隆抗体2，T1检测线上包被fFN单克隆抗体2，质控线上包被羊抗鼠抗体。 4.根据权利要求1所述的用于胰岛素样生长因子结合蛋白-1和胎儿纤维连接蛋白含量的联合定量检测系统，其特征在于，所述样品垫与金标垫为玻璃纤维膜。 5.根据权利要求1所述的用于胰岛素样生长因子结合蛋白-1和胎儿纤维连接蛋白含量的联合定量检测系统，其特征在于，所述标准曲线对照表设置在条形码或SD卡上，条形码印在卡壳的表面。 6.一种同时测定胰岛素样生长因子结合蛋白-1和胎儿纤维连接蛋白含量的金标垫的制备方法，包括以下步骤： (1)在调节好pH值的胶体金溶液中分别标记胎儿纤维连接蛋白抗体1和胰岛素样生长因子结合蛋白-1抗体1； (2)将两种标记物沉淀混合，加入pH值为7.0—7.4的金标复溶液进行复溶，混匀得到用于金标垫制备的金标液； (3)利用喷金仪将步骤(2)制备的金标液喷涂于亲水性的未处理金标垫上，置于37℃烘干，得到标记的金标垫。 7.根据权利要求6所述的同时测定胰岛素样生长因子结合蛋白-1和胎儿纤维连接蛋白含量的金标垫的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述胎儿纤维连接蛋白抗体1的标记方法包括以下步骤： (101)在1ml胶体金加入0.1mol/L碳酸钾溶液调节pH至fFN最适标记pH，该pH值为6.9—7.4； (102)混匀后，边迅速搅拌边逐滴加入6μg浓度为0.1mg/ml的胎儿纤维连接蛋白抗体1，反应30min； (103)再加入50μl10％BSA，搅拌均匀，反应15min后，再加入20μl5％PEG20000，反应15min。 8.根据权利要求6所述的同时测定胰岛素样生长因子结合蛋白-1和胎儿纤维连接蛋白含量的金标垫的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述胰岛素样生长因子结合蛋白-1抗体1的标记方法包括以下步骤： (111)在1ml胶体金加入0.1mol/L碳酸钾溶液调节pH至IGFBP-1最适标记pH，该pH值为7.0—7.7； (112)混匀后，边迅速搅拌边逐滴加入6μg浓度为0.1mg/ml的胰岛素样生长因子结合蛋白-1抗体1，反应30min； (113)再加入50μl10％BSA，搅拌均匀，反应15min后，再加入20μl5％PEG20000，反应15min。 9.根据权利要求6所述的同时测定胰岛素样生长因子结合蛋白-1和胎儿纤维连接蛋白含量的金标垫的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述金标复溶液的组成包括： PB缓冲液：基质成分，pH值为7.0—7.4； 10％蔗糖及5％海藻糖； 1％BSA； 0.5％PVP； 0.5％Tween20。 10.利用权利要求6至9任一项所述的同时测定胰岛素样生长因子结合蛋白-1和胎儿纤维连接蛋白含量的金标垫的制备方法制备的金标垫。
所属类别：	发明专利