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一种利用高效液相色谱同时测定枣中4种内源激素的方法
| 专利名称： | 一种利用高效液相色谱同时测定枣中4种内源激素的方法 |
| 摘要： | 本发明提供了一种利用高效液相色谱同时检测枣中4种内源激素的方法，包括植物激素的提取纯化步骤、标准溶液的配制步骤和高效液相色谱对样品和标品的分析测定步骤，在植物激素的提取纯化步骤中，采用低温研磨、低温避光浸提与超声波提取相结合、PVPP除杂质、乙酸乙酯和正丁醇萃取、C18固相萃取柱分离纯化等方式，可保证植物激素的充分提取。本发明的方法具有灵敏度高、样品提取较为简便、回收率高且准确度和精密度高等优点，适用于枣多类组织中内源激素的检测。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 河北;13 |
| 申请人： | 河北农业大学 |
| 发明人： | 刘孟军;刘平;刘警 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2018-04-18T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-10-29T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810349391.6 |
| 公开号： | CN110389178A |
| 分类号： | G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30 |
| 申请人地址： | 071000 河北省保定市南市区灵雨寺街289号 |
| 主权项： | 1.一种利用高效液相色谱同时测定枣中4种内源激素的方法，包括以下几个步骤： ⑴取枣组织1g，加入预冷的80%甲醇6～10ml研磨至匀浆，转入第一离心管中，低温避光浸提12～15h； ⑵超声波提取15min； ⑶提取液4℃ 13000r/min离心15min，将上清液转入第二离心管中，氮气吹干至水相； ⑷将前述水相用1M NaOH调节pH至8.0，加入PVPP，超声振荡后4℃ 10000r/min离心10min，将上清液转入第三离心管中，用1M柠檬酸调节pH至3.0，加入等体积的乙酸乙酯萃取，重复操作本步骤1～3次，将乙酸乙酯吸出于第四离心管中，水相待用； ⑸将前述水相用NaOH调节pH至8.0，加入等体积的正丁醇萃取，重复操作本步骤1～3次，将正丁醇吸出于第五离心管中； ⑹将前述酯相氮气吹干，加入2ml pH 3.5的乙酸溶解，得到粗提物1； ⑺将前述醇相氮气吹干，加入2ml pH 7.5的乙酸铵溶解，得到粗提物2； ⑻采用C18固相萃取柱对粗提物1和2分别进行分离纯化，合并，过微孔滤膜得到待测样品； ⑼利用高效液相色谱对待测样品进行分析，色谱条件为：色谱柱：Agilent ZORBAXODS-C18（4.6×150mm，5μm）；流动相：乙腈﹕甲醇﹕0.6%冰乙酸=5﹕55﹕40；进样量：10μL；柱温：30℃；检测波长：254nm；采用外标法进行定量测定，得到枣组织中4种内源激素即玉米素、赤霉素、生长素和脱落酸的含量。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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