专利名称: |
一种利用高效液相色谱同时测定枣中4种内源激素的方法 |
摘要: |
本发明提供了一种利用高效液相色谱同时检测枣中4种内源激素的方法,包括植物激素的提取纯化步骤、标准溶液的配制步骤和高效液相色谱对样品和标品的分析测定步骤,在植物激素的提取纯化步骤中,采用低温研磨、低温避光浸提与超声波提取相结合、PVPP除杂质、乙酸乙酯和正丁醇萃取、C18固相萃取柱分离纯化等方式,可保证植物激素的充分提取。本发明的方法具有灵敏度高、样品提取较为简便、回收率高且准确度和精密度高等优点,适用于枣多类组织中内源激素的检测。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
河北;13 |
申请人: |
河北农业大学 |
发明人: |
刘孟军;刘平;刘警 |
专利状态: |
有效 |
申请日期: |
2018-04-18T00:00:00+0800 |
发布日期: |
2019-10-29T00:00:00+0800 |
申请号: |
CN201810349391.6 |
公开号: |
CN110389178A |
分类号: |
G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30 |
申请人地址: |
071000 河北省保定市南市区灵雨寺街289号 |
主权项: |
1.一种利用高效液相色谱同时测定枣中4种内源激素的方法,包括以下几个步骤: ⑴取枣组织1g,加入预冷的80%甲醇6~10ml研磨至匀浆,转入第一离心管中,低温避光浸提12~15h; ⑵超声波提取15min; ⑶提取液4℃ 13000r/min离心15min,将上清液转入第二离心管中,氮气吹干至水相; ⑷将前述水相用1M NaOH调节pH至8.0,加入PVPP,超声振荡后4℃ 10000r/min离心10min,将上清液转入第三离心管中,用1M柠檬酸调节pH至3.0,加入等体积的乙酸乙酯萃取,重复操作本步骤1~3次,将乙酸乙酯吸出于第四离心管中,水相待用; ⑸将前述水相用NaOH调节pH至8.0,加入等体积的正丁醇萃取,重复操作本步骤1~3次,将正丁醇吸出于第五离心管中; ⑹将前述酯相氮气吹干,加入2ml pH 3.5的乙酸溶解,得到粗提物1; ⑺将前述醇相氮气吹干,加入2ml pH 7.5的乙酸铵溶解,得到粗提物2; ⑻采用C18固相萃取柱对粗提物1和2分别进行分离纯化,合并,过微孔滤膜得到待测样品; ⑼利用高效液相色谱对待测样品进行分析,色谱条件为:色谱柱:Agilent ZORBAXODS-C18(4.6×150mm,5μm);流动相:乙腈﹕甲醇﹕0.6%冰乙酸=5﹕55﹕40;进样量:10μL;柱温:30℃;检测波长:254nm;采用外标法进行定量测定,得到枣组织中4种内源激素即玉米素、赤霉素、生长素和脱落酸的含量。 |
所属类别: |
发明专利 |