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原文传递一种利用超高效液相色谱-串联质谱检测植物内源游离氨基酸的方法

专利名称：	一种利用超高效液相色谱-串联质谱检测植物内源游离氨基酸的方法
摘要：	本发明公开了一种利用超高效液相色谱‑串联质谱检测植物内源游离氨基酸的方法，包括：取植物组织，粉碎后加入提取液提取，提取完成后用有机相滤膜对提取液进行过滤，得到检测样品；利用超高效液相色谱‑串联质谱对检测样品进行分析，得到植物组织中内源游离氨基酸的种类和含量；其中，所述的提取液由甲醇、水和甲酸组成，其中甲醇、水和甲酸的体积比为70～80:29～19:1。本发明的方法具有灵敏度高、前处理方法简单、可检测的氨基酸浓度范围宽、基质干扰小、回收率高且准确度和精密度高、检测时间短等优点，适用于多类植物组织中内源游离氨基酸的检测和确证。
专利类型：	发明专利
申请人：	上海市农业科学院
发明人：	张夏南;叶正文;苏明申;杜纪红;周慧娟;李雄伟
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T14:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T22:00:00+0805
申请号：	CN202010036380.X
公开号：	CN111189939A
代理机构：	江苏斐多律师事务所
代理人：	张佳妮
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/60;G01N30/72;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/60;G01N30/72
申请人地址：	201106 上海市闵行区北翟路2901号
主权项：	1.一种利用超高效液相色谱-串联质谱检测植物组织内源游离氨基酸的方法，其步骤包括： (1)取植物组织，粉碎后加入提取液进行提取，提取完成后用有机相滤膜过滤，将提取液稀释，得到含有内源游离氨基酸的检测样品； (2)利用超高效液相色谱-串联质谱对检测样品进行分析，得到植物组织中内源游离氨基酸的种类和数量；其中，所述的提取液由甲醇、水和甲酸组成，其中甲醇、水和甲酸的体积比为70～80：29～19：1。 2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，甲醇、水和甲酸的体积比是80：19：1。 3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的植物组织与提取液的料液比为1g：15～20ml。 4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中提取时，先超声提取15～20min，再12000rpm离心10min,取上清液过0.22μm有机相滤膜。 5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中将提取液稀释5～20倍。 6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中将提取液稀释10倍。 7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，超高效液相色谱的流动相A：超纯水，含0.1％甲酸；B：乙腈，含0.1％甲酸，梯度洗脱条件如下： 8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，超高效液相色谱使用的色谱柱是ACQUITYUPLC HSS T3，规格:2.1mm*100mm,1.8μm。 9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的内源游离氨基酸为甘氨酸、L-丙氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、L-丝氨酸、L-脯氨酸、L-缬氨酸、L-苏氨酸、L-半胱氨酸、顺式-4-羟基-L-脯氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-天冬氨酸、L-天冬酰胺、L-谷氨酰胺、L-赖氨酸、L-谷氨酸、L-甲硫氨酸、L-组氨酸、L-苯丙氨酸、L-精氨酸、L-酪氨酸、L-间酪氨酸和L-色氨酸中的数种。 10.如权利要求7所述的方法，其特征在于，质谱条件如下：
所属类别：	发明专利