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原文传递生姜根状茎、地上茎和叶片中游离氨基酸的液相色谱-串联质谱检测方法

专利名称：	生姜根状茎、地上茎和叶片中游离氨基酸的液相色谱-串联质谱检测方法
摘要：	本发明公开了一种生姜根状茎、地上茎和叶片中游离氨基酸的液相色谱‑串联质谱检测方法。所述检测方法包括如下步骤：S1、生姜组织经预处理后粉碎过筛得生姜粉末；S2、向生姜粉末中加入甲酸水溶液进行提取，离心后取上清液；S3、采用液相色谱‑串联质谱法检测上清液，即实现生姜中游离氨基酸的定性定量检测。本发明检测方法的开发是生姜中氨基酸参与生物学反应机制及代谢路径研究的重要前提和基础，为生姜的品种选育、品质评价和品质提升提供了可靠的技术手段。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
发明人：	翁瑞;钱永忠;刘秀华;邱静;刘平香
专利状态：	有效
申请日期：	2022-09-26T00:00:00+0800
发布日期：	2022-12-13T00:00:00+0800
申请号：	CN202211172295.1
公开号：	CN115469043A
代理机构：	北京纪凯知识产权代理有限公司
代理人：	王春霞
分类号：	G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86
申请人地址：	100081 北京市海淀区中关村南大街12号
主权项：	1.一种生姜中游离氨基酸的液相色谱-串联质谱检测方法，包括如下步骤： S1、生姜组织经预处理后粉碎过筛得生姜粉末； S2、向所述生姜粉末中加入甲酸水溶液进行提取，离心后取上清液； S3、采用液相色谱-串联质谱法检测所述上清液，即实现所述生姜中游离氨基酸的定性定量检测。 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述生姜组织为根状茎、地上茎和叶片。 3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于：所述游离氨基酸包括蛋氨酸、甘氨酸、缬氨酸、色氨酸、组氨酸、半胱氨酸、丝氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、精氨酸、赖氨酸、谷氨酰胺和谷氨酸。 4.根据权利要求1-3中任一项所述的检测方法，其特征在于：步骤S1中，所述预处理的步骤如下：将所述生姜组织速冻后进行冷冻干燥；所述冷冻干燥的温度为-60～-70℃；所述生姜粉末的粒度为40～80目。 5.根据权利要求1-4中任一项所述的检测方法，其特征在于：步骤S2中，所述甲酸水溶液中，甲酸的体积含量为0.1％～0.2％；所述甲酸水溶液的用量为：40～100mL/g所述生姜粉末。 6.根据权利要求1-5中任一项所述的检测方法，其特征在于：步骤S2中，所述提取的方式为超声；所述超声的时间为10～30min，温度为10～25℃。 7.根据权利要求1-6中任一项所述的检测方法，其特征在于：步骤S2中，所述离心的条件如下：时间为5～20min，转速为10000～14000rpm；在步骤S3之前，将所述上清液过0.22μm滤膜。 8.根据权利要求1-7中任一项所述的检测方法，其特征在于：步骤S3中，所述液相色谱-串联质谱法中液相色谱的检测条件如下：色谱柱：C18柱；流动相：A相为0.1％甲酸水溶液，B相为0.1％的甲酸乙腈溶液；梯度洗脱：0～2min，98％A相，2％B相；2～14min，2％A相，98％B相；14～15min，2％A相，98％B相。 9.根据权利要求1-8中任一项所述的检测方法，其特征在于：步骤S3中，所述液相色谱-串联质谱法中质谱的检测条件如下：离子源类型：电喷雾离子源；扫描方式：多反应监测；喷雾电压：正离子模式4500V；质谱离子源温度：550℃；气帘气：35psi；雾化气：55psi；辅助加热气：55psi。 10.根据权利要求1-9中任一项所述的检测方法，其特征在于：步骤S3中，采用标准曲线法对所述游离氨基酸进行定量检测。