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原文传递一种基于液相色谱串联质谱测定医用食品中氨基酸的方法

专利名称：	一种基于液相色谱串联质谱测定医用食品中氨基酸的方法
摘要：	本发明涉及医用食品中氨基酸分析检测技术领域，特别涉及一种基于液相色谱串联质谱测定医用食品中氨基酸的方法，具体步骤如下：(1)试剂准备、(2)样品制备、(3)测定样品溶液，分别得到样品中各氨基酸色谱峰面积，代入校正曲线计算含量；以超纯水作为空白样品，在相同条件下进行测定，计算空白样品中各氨基酸本底值，即得各样品中氨基酸含量；(4)空白试验、(5)计算、(6)检测方法灵敏度、准确度和精密度。本发明提供的技术方案带来的有益效果是：样品制备简单，一步提取，无需衍生；灵敏度高；检出范围宽；重现性好；高效快速，30分钟内完成分析。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东越品检验认证集团有限公司
发明人：	程雪荣;吴洪永;陈艾亭;孙学文
专利状态：	有效
申请日期：	2019-02-25T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-12T00:00:00+0800
申请号：	CN201910155790.3
公开号：	CN110007034A
分类号：	G01N30/06(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	250000 山东省济南市高新区港兴三路北段1号济南药谷研发平台区2号楼2501-2506
主权项：	1.一种基于液相色谱串联质谱测定医用食品中氨基酸的方法，其特征在于具体步骤如下：一、试剂准备 1.1 氨基酸标准品； 1.2 乙醇 1.3 盐酸 1.4 EDTA 1.5 甲醇：色谱级 1.6 甲酸：色谱级 1.7 5μmol/mL标准储备溶液：准确称量适量的各氨基酸对照品，用纯水溶解，分别配制成5μmol/mL的标准储备溶液，-20℃冰箱中保存，有效期3个月； 1.8 100μmol/L混合氨基酸标准储备溶液：分别准确量取适量的各氨基酸标准储备液，用纯水溶解，配制成混合溶液，-20℃冰箱中保存，有效期3个月；二、测定步骤 2.1 样品制备称取样品500mg，加入1mL50％的乙醇水溶液(含0.1mol/L的盐酸)，匀浆，离心机12000r/min离心10min；上清液过0.22μm滤膜后供高效液相色谱-串联质谱法测定； 2.2 标准曲线的制备精密量取适量的氨基酸混合标准工作液，制得0μmol/L、0.04μmol/L、0.20μmol/L、1.0μmol/L、5.0μmol/L、25.0μmol/L供高效液相色谱-串联质谱法测定； 2.3 测定 2.3.1 液相色谱条件 (1)色谱柱：Intertsil OSD-4 C18 1.7μm； (2)流动相：A：水，B：甲醇，C：0.5％甲酸； (3)流速：0.3L/min； (4)柱温：25℃； (5)进样量：5μL 2.3.2 质谱条件 (1)离子源：电喷雾离子源，正离子模式； (2)扫描方式：多反应监测(MRM)； (3)脱溶剂气、锥孔气、碰撞气均为高纯氮气或其他合适的高纯气体；使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求； (4)毛细管电压、锥孔电压、碰撞能量等电压值优化至最优灵敏度； (5)监测离子； 2.3.3 测定法测定样品溶液，分别得到样品中各氨基酸色谱峰面积，代入校正曲线计算含量；以超纯水作为空白样品，在相同条件下进行测定，计算空白样品中各氨基酸本底值，即得各样品中氨基酸含量；样品溶液中各氨基酸的响应值均应在仪器测定的线性范围之内； 2.4 空白试验除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作；三、计算按式(1)计算样品中各游离氨基酸的含量：式中：X-样品中各氨基酸组分的含量，单位为克每千克；c-样品浓度，单位为μmol/L；V-试样总体积，单位为毫升；M-氨基酸的摩尔质量，单位为克/摩尔；m-试样质量，单位为克；四、检测方法灵敏度、准确度和精密度 4.1 灵敏度 4.2 准确度 4.3 精密度。
所属类别：	发明专利