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一种利用液相色谱串联质谱检测鱼类小清蛋白的方法
| 专利名称： | 一种利用液相色谱串联质谱检测鱼类小清蛋白的方法 |
| 摘要： | 本发明提出一种利用液相色谱串联质谱检测鱼类小清蛋白的方法，包括如下步骤：步骤1：特征肽段的选择；步骤2：制作标准曲线：以定量肽段标准品的浓度值为横坐标，以其定量子离子峰面积作为纵坐标绘制标准曲线，得到方程；步骤3：待测鱼肉样品经处理酶解后得到的上清液进行HPLC‑MRM‑MS/MS检测，得到鱼肉样品中定量肽段子离子峰面积，求得样品中定量肽段浓度，进而得到样品小清蛋白浓度。本发明目的在于建立一种液相色谱串联质谱方法，该方法具有准确、精密和灵敏等优点。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 山东;37 |
| 申请人： | 中国海洋大学 |
| 发明人： | 李振兴;孙礼瑞;林洪;葛敏敏;田盛兰;罗晨 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810432023.8 |
| 公开号： | CN108469495A |
| 代理机构： | 青岛致嘉知识产权代理事务所(普通合伙) 37236 |
| 代理人： | 单虎 |
| 分类号： | G01N30/96(2006.01)I;G01N30/88(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/96;G01N30/88 |
| 申请人地址： | 266100 山东省青岛市崂山区松岭路238号 |
| 主权项： | 1.一种利用液相色谱串联质谱检测鱼类小清蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：特征肽段的选择，包括如下步骤：⑴从NCBI和UniProt蛋白库搜索到小清蛋白氨基酸序列；⑵将该氨基酸序列导入Skyline软件，模拟酶解过程，得到一系列肽段；⑶选择物种同源性高，8‑25个氨基酸的肽段，并且尽量避免易被修饰蛋白；⑷将酶解后的肽段进行质谱检测，选择响应高、重复性好的肽段作为小清蛋白的定量肽段；⑸将肽段进行化学合成，制备纯度高于95％的标准品；步骤2：制作标准曲线：以标准品的浓度值为横坐标，以定量肽段的定量子离子峰面积作为纵坐标绘制标准曲线，得到方程；步骤3：待测鱼肉样品经处理酶解后，将得到的上清液进行HPLC‑MRM‑MS/MS检测，得到鱼肉样品中定量肽段子离子峰面积，求得样品中定量肽段浓度，进而得到样品小清蛋白浓度。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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