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原文传递一种化学发光定量检测粪便潜血的试剂及其检测方法和其在检测下消化道健康的用途

专利名称：	一种化学发光定量检测粪便潜血的试剂及其检测方法和其在检测下消化道健康的用途
摘要：	本发明公开了一种化学发光定量检测粪便潜血的试剂及其检测方法和其在检测下消化道健康的用途；本发明利用免疫学得到两个特定的抗体，再将抗体结合血红蛋白‑触珠蛋白复合物得到“标记后的第一特定抗体—血红蛋白‑触珠蛋白复合物—标记后的第二特定抗体”的免疫复合体，再运用磁珠化学发光检测体系完成检测；这样的设计能够特异性检测人粪便样本中血红蛋白‑触珠蛋白复合物，具有灵敏度高、稳定性好的优点，能很好反映下消化道出血状况，辅助早期筛查直肠癌或结肠癌等下消化道肿瘤，具有较高的临床应用价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	嘉兴行健生物科技有限公司
发明人：	高平
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-22T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-22T00:00:00+0800
申请号：	CN201910779607.7
公开号：	CN110361547A
代理机构：	杭州裕阳联合专利代理有限公司
代理人：	金方玮
分类号：	G01N33/72(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	314000 浙江省嘉兴市南湖区亚中路599号嘉兴软件园3号楼四楼
主权项：	1.一种化学发光定量检测粪便潜血的试剂，其特征在于，包括：由抗体检测体系与人体血红蛋白-触珠蛋白复合物形成的免疫结合体，免疫结合体的磁珠化学发光检测体系；所述磁珠化学发光检测体系的固定分离相为磁微粒，定标品和质控品为人体血红蛋白-触珠蛋白复合物；所述免疫结合体是“磁珠-第一特定抗体-人体血红蛋白-触珠蛋白复合物-发光标记物标记的第二特定抗体”。 2.根据权利要求1所述的一种化学发光定量检测粪便潜血的试剂，其特征在于，所述第一特定抗体、第二特定抗体为与人体血红蛋白单体结合的特定抗体和与人体触珠蛋白单体结合的特定抗体；所述特定抗体与人体血红蛋白-触珠蛋白复合物形成免疫结合体，与人体血红蛋白单体结合的特定抗体不与任何人体触珠蛋白单体结合，与人体触珠蛋白单体结合的特定抗体不与任何人体血红蛋白单体结合。 3.根据权利要求1所述的一种化学发光定量检测粪便潜血的试剂，其特征在于，所述第一特定抗体、第二特定抗体为与人体血红蛋白-触珠蛋白复合物结合的特定抗体和与人体触珠蛋白单体结合的特定抗体；所述特定抗体与血红蛋白-触珠蛋白复合物形成免疫结合体，与人体血红蛋白-触珠蛋白复合物结合的特定抗体不与任何人体触珠蛋白单体或人体血红蛋白单体结合；与人体触珠蛋白单体结合的特定抗体不与任何人体血红蛋白单体结合。 4.根据权利要求1所述的一种化学发光定量检测粪便潜血的试剂，其特征在于，所述第一特定抗体、第二特定抗体为与人体血红蛋白-触珠蛋白复合物结合的特定抗体和与人体血红蛋白单体结合的特定抗体，所述特定抗体抗体可与血红蛋白-触珠蛋白复合物形成免疫结合体，与人体血红蛋白-触珠蛋白复合物结合的特定抗体不与任何触珠蛋白单体或血红蛋白单体结合；与人体血红蛋白结合的特定抗体不与任何触珠蛋白单体结合。 5.根据权利要求1所述的一种化学发光定量检测粪便潜血的试剂，其特征在于，所述固定分离相是链霉亲和素包被的磁珠，所述磁珠与生物素标记的第一特定抗体结合。 6.根据权利要求1所述的一种化学发光定量检测粪便潜血的试剂，其特征在于，所述固定分离相是第一特定抗体包被的磁珠。 7.根据权利要求1所述的一种化学发光定量检测粪便潜血的试剂，其特征在于，所述第二特定抗体为发光标记物标记的抗体，所述发光标记物为吖啶酯。 8.根据权利要求1所述的一种化学发光定量检测粪便潜血的试剂，其特征在于，所述第一特定抗体、第二特定抗体为多克隆抗体或单克隆抗体。 9.一种化学发光定量检测粪便潜血的试剂的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：按校准定标程序用定标品对血红蛋白-触珠蛋白复合物定量检测进行定标；添加定标品、质控品和待检样本到指定的反应杯中；在各反应杯中添加第一特定抗体、第二特定抗体和磁珠；经过二次孵育使得反应杯中形成“磁珠-第一特定抗体-人体血红蛋白-触珠蛋白复合物-吖啶酯标记的第二特定抗体”的免疫复合体；用清洗液清洗各反应杯多次去除未结合的抗体；在各反应杯中添加全自动免疫检验系统用发光底物液A液；在各反应杯中添加全自动免疫检验系统用发光底物液B液；在全自动化学发光仪上依序测量，依据血红蛋白-触珠蛋白复合物试剂校准定标的校准曲线信息进行数据处理，得出待检样本人体血红蛋白-触珠蛋白复合物的浓度。 10.一种化学发光定量检测粪便潜血的试剂在检测下消化道健康的用途，其特征在于，检测下消化道健康的步骤包括：步骤一，体检样本采集和前处理：用样本萃取液采集并萃取新鲜待测人粪便样本，获得澄清待测样本；步骤二，检测试剂前处理：使用前，将血红蛋白-触珠蛋白复合物检测试剂置于室温复温，准备第一被标记的粪便潜血抗体，第二被标记的粪便潜血抗体，血红蛋白-触珠蛋白复合物定标品，血红蛋白-触珠蛋白复合物质控品，待测样本，被包被的磁微粒溶液，清洗液，全自动免疫检验系统用底物液A液，全自动免疫检验系统用底物液B液；制备血红蛋白-触珠蛋白复合物抗体的过程为：步骤一，免疫注射血红蛋白-触珠蛋白复合物到实验用动物；步骤二，终止免疫并放血；步骤三，制备免疫层析亲和柱；步骤四，提取和纯化抗体得到高浓度的血红蛋白-触珠蛋白复合物抗体；步骤三，定标品、质控品前处理；步骤四，定标；步骤五，在全自动化学发光测定仪上检测，各添加质控品和样本到指定的反应杯中；在各反应杯中添加第一被标记的粪便潜血抗体；在各反应杯中添加被包被的磁微粒溶液；孵育；用清洗液清洗各反应杯多次；在各反应杯中添加第二被标记粪便潜血抗体；孵育；用清洗液清洗各反应杯多次；在各反应杯中添加全自动免疫检验系统用底物液A液；在各反应杯中添加全自动免疫检验系统用底物液B液；在全自动化学发光仪上依序测量各反应杯相对光强度RLU；步骤六，计算：化学发光分析仪通过粪便潜血测定试剂卡内烧录的校准曲线和测定的相对光强度RLU，计算样品和质控品的浓度值；步骤七，质控：依据质控品的测定浓度，与标示值范围进行比较，若超出标示的质控范围，说明本次检测不合格，需重新进行检测；步骤八，根据参考范围和检测结果判定下消化道健康情况：正常健康人群的界定值低于200μg/g；阳性人群的界定值大于50μg/g；强阳性人群的界定值为大于1000μg/g。
所属类别：	发明专利