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原文传递一种基于Au@Co-MOFs复合材料的电化学免疫传感器的构建方法

专利名称：	一种基于Au@Co-MOFs复合材料的电化学免疫传感器的构建方法
摘要：	本发明涉及电化学免疫传感器领域，公开了一种基于Au@Co‑MOFs复合材料的电化学免疫传感器的构建方法，包括：1)2‑硝基对苯二甲酸的制备；2)2‑氨基对苯二甲酸的制备；3)Co‑MOFs材料的制备；4)Au@Co‑MOFs复合材料的制备；5)基于Au@Co‑MOFs复合材料的电化学免疫传感器的构建。通过本发明可以构建出一种基于Au@Co‑MOFs复合材料的电化学免疫传感器，可以用于超灵敏检测，具有更好的准确性，更高的灵敏度，对我国电化学免疫传感器领域具有十分重要的现实意义。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	浙江理工大学
发明人：	彭志勤;何宇杰;刘珉琦;黄诗莹;万军民
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-05T00:00:00+0800
申请号：	CN201910804968.2
公开号：	CN110412259A
代理机构：	杭州永航联科专利代理有限公司
代理人：	侯兰玉
分类号：	G01N33/53(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	310018 浙江省杭州市钱塘新区下沙高教西区2号大街928号浙江理工大学
主权项：	1.一种基于Au@Co-MOFs复合材料的电化学免疫传感器的构建方法，以g、mmol和μl、mL计，其特征在于包括以下步骤： 1)在反应容器中加入由浓硫酸和发烟硝酸混合而成的混酸，在室温及搅拌条件下加入对苯二甲酸，加料时间为20-40min；在55-75min内加热至60-70℃，保温60-80min，继续升温至77-82℃，然后控制温度超过85℃，保温2.5-4h，将所得反应物冷却后，倒入碎冰水中，过滤沉淀，水洗至中性，在水中重结晶，得到2-硝基对苯二甲酸，备用； 2)在反应容器中加入28-35ml浓盐酸，搅拌条件下加入13-15g SnCl2·2H2O，待全部溶解后，加入7-8g 2-硝基对苯二甲酸；在30-40min内加热97-103℃，反应2-3h，冷却至室温，过滤，用稀盐酸洗涤滤饼，用氢氧化钠溶液将滤饼溶解，再调至酸性，过滤沉淀，干燥得5.5-6.7g 2-氨基对苯二甲酸，备用； 3)取2.1-4.2mmol 2-氨基对苯二甲酸溶于33-47mL的N，N-二甲基甲酰胺中，另将1.1-2.1mmol醋酸钴溶于37-45ml的N，N-二甲基甲酰胺中，搅拌；待两种溶液混合搅拌1-1.5h后，转移到反应釜，120-140℃下反应44-52h，所得产物依次用无水乙醇和N，N-二甲基甲酰胺洗涤，真空干燥，得到Co-MOFs材料； 4)在75-85℃搅拌下将Co-MOFs材料和氯金酸溶液混合，超声分散，干燥后在管式炉中以4-6℃/min的速度升温至480-520℃，焙烧1.5-2.5h，得到的Au@Co-MOFs，备用； 5)将玻碳电极在microcloth垫上用20-25nm氧化铝抛光浆打磨后在无水乙醇中超声清洗，后在去离子水中超声清洗，接然后用稀硫酸对电极循环活化40-50圈，彻底洗涤； 6)在玻碳电极表面滴加10-15μL的Au@Co-MOFs溶液，室温干燥后在电极表面滴加10-15μL 0.04-0.06M的MPA水溶液，孵育成饱和MPA单层，然后用PBS清洗，得到修饰有MPA的电极；将修饰有MPA的电极在0.04-0.06M EDC/0.02-0.04M NHS的MES缓冲液中孵育，将MPA的末端羧基转化为活性NHS酯；然后滴加5-10μL特异性一抗，使其端氨基与活化后的羧基结合，用PBS清洗去除未结合的抗体后，再用10-15μL的BSA溶液在36-38℃下将电极封闭25-30min以减少分析物或杂质的非特异性结合，即完成电化学免疫传感器的组装，得到基于Au@Co-MOFs复合材料的电化学免疫传感器。 2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中，所述发烟硝酸和浓硫酸的体积比为1∶(1.2-1.5)。 3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中，所述浓盐酸的浓度是36-38wt％，所述稀盐酸的浓度为8-12wt％；所述氢氧化钠溶液的浓度为8-12wt％。 4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)中，真空干燥温度为65-75℃，真空干燥时间为10-15h。 5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)中，所述Co-MOFs材料和氯金酸摩尔比为1∶2-2.5；所述氯金酸溶液的浓度为0.8-1.2mmol/L。 6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5)中，两次超声时间为10-15min，所述稀硫酸的浓度范围是2-3mol/L。 7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤6)中，所述Au@Co-MOFs溶液的浓度范围为0.1-0.5mol/L。 8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤6)中，所述PBS的pH＝7.4。 9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤6)中，两次孵育的温度为36-38℃，时间为50-70min。 10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤6)中，所述BSA溶液的浓度为0.5-1.5wt％。
所属类别：	发明专利