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原文传递一种基于磁分离与量子点标记幽门螺杆菌快速检测方法和试剂盒

专利名称：	一种基于磁分离与量子点标记幽门螺杆菌快速检测方法和试剂盒
摘要：	本发明公开了一种基于磁分离与量子点标记幽门螺杆菌快速检测方法和试剂盒，该试剂盒包括抗幽门螺杆菌的免疫磁珠纳米磁珠和抗幽门螺杆菌的量子点标记的纳米探针。本发明利用了免疫纳米磁珠对样品的可富集性、分离的速度快、效率高等优点，同时结合量子点光化学稳定性高、荧光强度高等特性，使得检测体系具备多重信号协同放大的效果，从而具有超高的检测灵敏度；本发明检测方法简单，检测快速，易于判定，检测成本低廉；可进行早期诊断和防治，临床诊断符合率高；在临床诊断、病原学鉴别、流行病学调查等方面具有很高的实用价值，易于推广。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广东工业大学
发明人：	赵肃清;陈莉莉;肖益热;邹同达;王甜甜
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-13T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-05T00:00:00+0800
申请号：	CN201910395518.2
公开号：	CN110412261A
代理机构：	广州粤高专利商标代理有限公司
代理人：	陈嘉毅
分类号：	G01N33/543(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	510006 广东省广州市越秀区东风东路729号
主权项：	1.一种基于磁分离与量子点标记快速检测幽门螺杆菌的试剂盒，其特征在于，包括抗幽门螺杆菌的免疫磁珠纳米磁珠和抗幽门螺杆菌的量子点标记的纳米探针；其中，抗幽门螺杆菌的免疫磁珠纳米磁珠为单克隆抗体与纳米免疫磁珠亲和偶联制备得到，所述单克隆抗体为氨基酸序列为CHHLDKSIKEDVQFADSRI的肽段偶联血蓝蛋白作为抗原免疫得到的；抗幽门螺杆菌的量子点标记的纳米探针为外膜蛋白多克隆抗体与荧光量子点通过共价偶联制备得到，所述外膜蛋白多克隆抗体是由幽门螺杆菌外膜蛋白作为抗原免疫得到。 2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，外膜蛋白多克隆抗体是由幽门螺杆菌外膜蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔得到。 3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，抗幽门螺杆菌的免疫磁珠纳米磁珠的制备过程包括以下步骤： S11.取磁珠悬液，洗涤，磁性分离，重悬，重复一次； S12.步骤S11的产物进行磁性分离，弃上清液，加入单克隆抗体，混合，进行磁珠的抗体吸附，磁性分离，收集上清液； S13.用结合缓冲液洗涤，然后进行磁性分离，弃上清液，重复一次；其中，纳米磁珠用量不少于50μg，单克隆抗体的用量是不少于25μg，偶联反应时间不少于60min。 4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，抗幽门螺杆菌的量子点标记的纳米探针的制备过程包括以下步骤： S21.活化羧基水溶性量子点的羧基位点：羧基水溶性量子点、N-羟基琥珀酰亚胺、碳二亚胺和PBS缓冲混合，37℃反应，PBST溶液洗涤； S22.亲和偶联：步骤S21的产物与多克隆抗体混合，避光反应，PBST溶液洗涤； S23.封闭未反应的活化羧基位点：步骤S22的产物与BSA混合，避光反应，PBST溶液洗涤；其中，量子点用量不少于200μg，多克隆抗体的用量是不少于75μg，偶联反应时间不少于60min。 5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，量子点是羧基化两亲聚合物修饰的水溶性CdSe/Zns量子点。 6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，纳米磁珠是以超顺磁性Fe2O3为内核、壳材料为介孔二氧化硅、表面官能团为蛋白A/G、粒径为2μm的磁珠。 7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括阳性质控品和阴性质控品。 8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，阳性质控品为灭活的幽门螺杆菌干燥结合到人体健康粪便上。 9.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，阴性质控品为经临床诊断为幽门螺杆菌阴性的人体粪便。 10.权利要求1到9任一所述试剂盒在检测幽门螺杆菌中的应用。
所属类别：	发明专利