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原文传递 一种术中快速冰冻切片免疫组化染色方法
专利名称: 一种术中快速冰冻切片免疫组化染色方法
摘要: 一种术中快速冰冻切片免疫组化染色方法,包括以下步骤:将术中新鲜标本放在冷冻切片机内冰冻后切片,切片厚度为5μm,粘贴在载玻片上,空气干燥25~35秒;滴加一抗在40℃下孵育4min;用PBS清洗三次,每次4~7s;滴加二抗在40℃下孵育4min;用PBS清洗三次,每次4~7s;滴加DAB试剂,显色1~2mim;用苏木素染液染色3~10s。染色过程免固定,免内源性阻断,提高孵育温度,缩短反应时间,免去可省略步骤缩短染色时间,大大缩短实验总时间,全程时间约12分钟,为实现协助快速冰冻病理诊断时间上提供可能性,提高冰冻诊断准确率,与石蜡免疫组化结果有较好的重复性和可比性。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 广东;44
申请人: 李海南
发明人: 李海南
专利状态: 有效
申请日期: 2019-08-05T00:00:00+0800
发布日期: 2019-11-05T00:00:00+0800
申请号: CN201910715250.6
公开号: CN110411808A
代理机构: 广州京诺知识产权代理有限公司
代理人: 麦超群
分类号: G01N1/30(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址: 510000 广东省广州市天河区天河直街69号三楼
主权项: 1.一种术中快速冰冻切片免疫组化染色方法,其特征在于,包括以下步骤: (1)将标本放在冷冻切片机内冰冻后切片,切片厚度为5μm,粘贴在载玻片1/3与2/3之间,空气干燥25~35s; (2)滴加一抗在40℃下孵育4min; (3)用PBS清洗三次,每次4~7s; (4)滴加二抗在40℃下孵育4min; (5)用PBS清洗三次,每次4~7s; (6)滴加DAB试剂,显色1~2mim; (7)用苏木素染液染色3~10s。 2.根据权利要求1所述的一种术中快速冰冻切片免疫组化染色方法,其特征在于,还包括苏木素染液染色后用流水冲洗反蓝,冲洗后用中性树胶封片。 3.根据权利要求1所述的一种术中快速冰冻切片免疫组化染色方法,其特征在于,所述步骤(2)中一抗为CK、CD20、CD79a、CD163、CD68、GFAP、PLAP、Sall-4、CD117、H3K27M、SSTR2a、STAT-6、S-100、Syn、CD34、BRAF、 CK19、TPO、Glectin-3、D2-40、Inhibin-a中的其中一种。
所属类别: 发明专利
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